Universal Color DNA Purification Kit

通用型彩色 DNA 純化回收試劑盒

通用型彩色DNA純化回收試劑盒 核酸提取

目錄號(hào):43018

產(chǎn)品內(nèi)容：

自備試劑：

無(wú)水乙醇

保存條件：

室溫（15 ~ 25℃）

產(chǎn)品簡(jiǎn)介：

本試劑盒既能從TAE 或TBE 瓊脂糖凝膠中回收 DNA 片段，又能用于直接純化 PCR 產(chǎn)物,，滿(mǎn)足多種實(shí)驗(yàn)需要,。Buffer GS 溶液中含有 pH 指示劑，可根據(jù)顏色來(lái)判斷溶膠或 PCR 產(chǎn)物回收是否達(dá)到優(yōu)良狀態(tài),。使用本產(chǎn)品可回收 100bp~8kb 大小的DNA 片段,，回收率可達(dá) 80%，該試劑盒操作簡(jiǎn)便,，得到的 DNA 片段可用于酶切,、連接,、測(cè)序等實(shí)驗(yàn)。

產(chǎn)品特點(diǎn)：

1. 快速：步驟少,，操作簡(jiǎn)便,，整個(gè)操作僅需 15 分鐘。

2. 高效：每個(gè)離心吸附柱可吸附 10 ug 以上的 DNA 片段,，回收效率在 85%以上,。

注意事項(xiàng)：

1. Buffer BL 的加入能夠改善吸附柱的吸附能力并提高吸附柱的均一性和穩(wěn)定性，消除高溫潮濕或其他不良環(huán)境因素對(duì)吸附柱造成的影響,。

2. 使用前請(qǐng)先檢查Buffer BL,、Buffer GS 是否出現(xiàn)渾濁，如有混濁現(xiàn)象,，可在 37℃水浴中加熱幾分鐘,，即可恢復(fù)澄清。

3. 溶液Buffer GS 含有 pH 指示劑,，為黃色,，指示 pH≤7.5。

4. 切膠時(shí),，紫外照射時(shí)間應(yīng)盡量短,，以免對(duì) DNA 造成損傷。

5. 回收率與初始 DNA 量和洗脫體積有關(guān),，初始量越少,、洗脫體積越小，回收率越低,。

操作步驟：

第一次使用前,，請(qǐng)先在 Buffer WB2 中加入無(wú)水乙醇，并打?qū)礃?biāo)記,，加入體積請(qǐng)參照瓶上的標(biāo)簽,。

一、從瓊脂糖凝膠中回收DNA 片段

1. 柱平衡：向吸附柱中（吸附柱放入收集管中）加入 400 ul Buffer BL,，12,000 rpm 離心 1 min，棄濾液,，將吸附柱重新放回收集管中,。（請(qǐng)使用當(dāng)天處理過(guò)的柱子）

2. 切膠：在長(zhǎng)波紫外燈下，用干凈刀片將目的 DNA 條帶切下,，盡量切除不含 DNA 的凝膠,。

3. 稱(chēng)重：將切下的含有目的 DNA 條帶的凝膠，放入 1.5 ml 離心管中,，稱(chēng)取凝膠重量（去除空管重量）,。如果凝膠重量為 100mg,，其體積可視為 100ul。

4. 溶膠：加入等體積 Buffer GS,，60℃水浴,，每隔 2 ~ 3 min 上下振蕩，直到凝膠wan全溶解,。

（如果凝膠濃度大于 2%,，應(yīng)加入 2 倍體積 Buffer GS。對(duì)于回收<300 bp 的小片段,，可在凝膠wan全溶解后,，再加入 0.5 倍膠塊體積的異丙醇以提高回收率。）

5. 吸附：待溶液冷卻至室溫后加入吸附柱中,，室溫靜置 2 min,，然后 12,000 rpm 離心 1 min，棄濾液,。

（如果總體積超過(guò) 750 ul,，可分 2 次將溶液加入同一離心吸附柱中）

6. 漂洗：加入 500 ul 漂洗液Buffer WB2，12,000 rpm 離心 1 min,，棄濾液,。

7. 二次漂洗：重復(fù)操作步驟 6。

8. 干燥：將吸附柱放回收集管中,， 12,000 rpm 離心 2 min,，甩干膜上殘留的乙醇，防止其抑制下游反應(yīng),。

9. 回收：將離心吸附柱置于一個(gè)新的 1.5 ml 離心管中,，在吸附柱中央加入 30 ~ 50 ul 洗脫液 Buffer EB，室溫放置 2 min,，12,000 rpm 離心 1 min 收集 DNA 片段,。

（注意：為增加回收效率，可將洗脫液在 65℃預(yù)熱,，也可將得到的溶液重新加入到離心管中,，室溫放置 2 min，再次離心收集,。）

二,、 從 PCR 反應(yīng)液或酶切反應(yīng)液中回收 DNA 片段

1. 柱平衡：向吸附柱中（吸附柱放入收集管中）加入 400 ul 平衡液Buffer BL，12,000 rpm 離心 1 min,，棄濾液,，將吸附柱重新放回收集管中。（請(qǐng)使用當(dāng)天處理過(guò)的柱子）

2. 加結(jié)合液：估計(jì)PCR 反應(yīng)液或酶切反應(yīng)液的體積，向其中加入等體積溶液Buffer GS,，充分混勻,。

（注意：對(duì)于回收小于 150bp 的小片段可將溶液 Buffer GS 的體積增加到 3 倍以提高回收率）

3. 吸附：將上一步所得溶液加入一套吸附柱中，室溫放置 2 min,，12,000 rpm 離心 1 min,，棄濾液。

（ 注意：吸附柱容積為 750ul,，若樣品體積大于 750ul,，可分批加入）

4. 漂洗：加入 500ul Buffer WB2，12,000 rpm 離心 1 min,，棄濾液,。

5. 二次漂洗：重復(fù)操作步驟 4。

6. 干燥：將吸附柱放回收集管中,， 12,000 rpm 離心 2 min,，甩干膜上殘留的乙醇，防止其抑制下游反應(yīng),。

7. 洗脫：將離心吸附柱置于一個(gè)新的 1.5 ml 離心管中,，在吸附柱中央加入 30 ~ 50 ul 洗脫液Buffer EB，室溫放置 2 min,。12,000 rpm 離心 1 min,，收集 DNA 片段。（注意：為增加回收效率,，可將洗脫液在 60℃預(yù)熱,，也可將得到的溶液重新加入到離心管中，室溫放置 2 min,，再次離心收集,。）

通用型彩色DNA純化回收試劑盒 核酸提取