Gel DNA Purification Kit

瓊脂糖凝膠純化回收試劑盒

瓊脂糖凝膠DNA回收試劑盒 核酸提取

目錄號:43011

產(chǎn)品內(nèi)容：

自備試劑：

無水乙醇

保存條件：

室溫（15 ~ 25℃）

產(chǎn)品簡介：

本試劑盒適用于從TAE 或 TBE 瓊脂糖凝膠中回收 DNA 片段,，使用本產(chǎn)品可回收 100bp-10kb 大小的DNA 片段,，回收率可達(dá) 85%-95%,。該試劑盒操作簡便，得到的 DNA 片段可用于酶切,、連接,、測序等實驗。

產(chǎn)品特點：

1. 快速：步驟少,，操作簡便,，整個操作僅需 15 分鐘。

2. 高效：每個離心吸附柱可吸附 10 ug 以上的 DNA 片段,，回收效率在 85%以上,。

注意事項：

1. Buffer BL 的加入能夠改善吸附柱的吸附能力并提高吸附柱的均一性和穩(wěn)定性，消除高溫潮濕或其他不良環(huán)境因素對吸附柱造成的影響,。收到貨后 2 個月內(nèi),，不用做柱平衡。

2. 使用前請先檢查Buffer BL,、Buffer DB 是否出現(xiàn)渾濁,，如有混濁現(xiàn)象，可在 37℃水浴中加熱幾分鐘,，即可恢復(fù)澄清,。

3. 切膠時，紫外照射時間應(yīng)盡量短,，以免對 DNA 造成損傷,。

4. 回收率與初始 DNA 量和洗脫體積有關(guān)，初始量越少,、洗脫體積越小,，回收率越低。

操作步驟

第一次使用前,，請先在 Buffer WB 中加入無水乙醇,，并打?qū)礃?biāo)記，加入體積請參照瓶上的標(biāo)簽,。

從瓊脂糖凝膠中回收 DNA 片段

1. 柱平衡：向吸附柱中（吸附柱放入收集管中）加入 100 ul Buffer BL,，12,000 rpm 離心 1 min，棄濾液,，將吸附柱重新放回收集管中,。（請使用當(dāng)天處理過的柱子）

2. 切膠：在長波紫外燈下，用干凈刀片將目的 DNA 條帶切下,，盡量切除不含 DNA 的凝膠,。

3. 稱重：將切下的含有目的 DNA 條帶的凝膠,，放入 1.5 ml 離心管中，稱取凝膠重量（去除空管重量）,。如果凝膠重量為 100mg,，其體積可視為 100ul。

4. 溶膠：加入 3 倍體積 Buffer DB,，56℃水浴,，直到凝膠wan全溶解，期間顛倒混勻 2 次加速溶膠,。

（如果凝膠濃度大于 2%,，應(yīng)加入 6 倍體積 Buffer DB。對于回收<100 bp 的小片段,，可在凝膠wan全溶解后,，再加入 1.5 倍膠塊體積的異丙醇以提高回收率。）

5. 吸附：待溶液冷卻至室溫后加入吸附柱中,，室溫靜置 1 min,，然后 12,000 rpm 離心 1 min，棄濾液,。

（如果總體積超過 750 ul,，可分 2 次將溶液加入同一離心吸附柱中）

6. 漂洗：加入 600 ul 漂洗液Buffer WB，12,000 rpm 離心 1 min,，棄濾液,。

7. 二次漂洗：重復(fù)操作步驟 6。

8. 干燥：將吸附柱放回收集管中,， 12,000 rpm 離心 2 min,，甩干膜上殘留的乙醇，防止其抑制下游反應(yīng),。

9. 回收：將離心吸附柱置于一個新的 1.5 ml 離心管中,，在吸附柱中央加入 30 ~ 50 ul 洗脫液 Buffer EB，室溫放置 2 min,，12,000 rpm 離心 1 min 收集 DNA 片段,。

（注意：為增加回收效率，可將洗脫液在 65℃預(yù)熱,，也可將得到的溶液重新加入到離心管中，室溫放置 2 min,，再次離心收集,。）

瓊脂糖凝膠DNA回收試劑盒 核酸提取