植物總 RNA 提取試劑盒

FlashPure Plant Total RNA Mini Kit

植物總RNA提取試劑盒 核酸提取 

目錄號：91019

產(chǎn)品內(nèi)容

保存溫度

室溫（15 ~ 25℃）保存,，有效期 12 個月。

產(chǎn)品簡介

適用于提取絕大多數(shù)植物根,、莖,、葉、花的總RNA,，RNA可直接用于RT， RT-PCR,，RT-qPCR,，RACE，普通轉(zhuǎn)錄組測序等,。

本試劑盒是同類產(chǎn)品中適應(yīng)性zui廣泛,，不但可以提取小麥、玉米,、水稻,、大豆、番茄,、煙草,、擬南芥等簡單植物，也可以提取茶樹葉片,、棉花葉片,、葡萄葉片、楊樹葉片,、番薯葉片,、花生葉片、香蕉葉片,、荔枝葉片,、白松葉片等多糖多酚含量一般的植物。

如果遇到果實(shí),、種子,、中草藥，例如：多糖多酚巨高的作物種子（小麥/玉米/大豆/水稻）,、葡萄果實(shí),、藍(lán)莓果實(shí)、百合鱗莖,、土豆塊莖,；或者次級代謝產(chǎn)物巨豐富的葛根、虎杖、雪蓮等藥用植物,，請選擇R513-果實(shí)種子總RNA提取試劑盒,。

產(chǎn)品特點(diǎn)

1. 無毒：免氯仿、免β-巰基乙醇,！

2. 高質(zhì)：28s/18s=2:1,，OD260/280=2.0～2.2！

3. 高效：提取全過程僅需20分鐘,！

注意事項(xiàng)

a. 自備試劑：無水乙醇,。

b. 提取過程使用 RNase-Free 的吸頭；研缽用水che底洗凈,，烘箱烘干即可,；

c. 樣品加入裂解液PRL勻漿后，可在–80℃保存一個月以上,。

d. 取RNA樣本時(shí),，把新鮮組織樣本浸入RNAsafe( RNA樣品保存液， 91115-100 ) 中,，可在37℃保存一天,，在25℃保存一周，在4℃保存一個月,，在-20℃或者–80℃長期保存,。

具體產(chǎn)品的參數(shù)以收到產(chǎn)品說明書的參數(shù)為準(zhǔn)

操作步驟

提示：所有離心步驟必須在室溫（15 ~37℃）下進(jìn)行。

第一次使用前,，請先在漂洗液 RW 中加入無水乙醇,，加入體積詳見標(biāo)簽

1. 材料處理：

a．取 500 μl 裂解液 PRL，轉(zhuǎn)入 1.5 ml 離心管中,，再加入 50 μl 糖酚去除劑 PAD,，混勻備用。

注意：對于幼嫩的農(nóng)作物葉片等簡單樣本,，不加糖酚去除劑 PAD,，RNA

的產(chǎn)量可能會提高一些。

b．液氮中研磨適量植物組織成細(xì)粉,，取≤50 mg 細(xì)粉轉(zhuǎn)入上述裝有裂解液PRL的1.5ml 離心管中,劇烈渦旋震蕩30sec,，充分混勻。

（冬天氣溫低,，37℃搖床振蕩3min,，可增強(qiáng)裂解效果，提高產(chǎn)量）

c．將裂解物13,000rpm離心 5-10 分鐘,，沉淀不能裂解的碎片,。

注意：使用1ml的裂解液PRL和100μl糖酚去除劑去裂解100mg樣品,，RNA產(chǎn)量會翻倍。

2. 小心吸取上清（一般 480 μl,，注意不要吸到沉淀）轉(zhuǎn)入一個新的離心管中,，加入 0.5 倍上清體積的無水乙醇（例如：480μl上清，加入240 μl無水乙醇）,，此時(shí)可能出來沉淀,，用移液器吹打混勻，不需要離心,。

3. 轉(zhuǎn)移上清混合液至 RNA 吸附柱中,，13,000 rpm 離心 2 min，倒棄濾液,。

注：吸附柱的容積為 750 μl,，如果混合液超過此體積，請分兩次上柱,。

4. 加入700μl去蛋白液RW1，室溫放置1min , 13,000rpm離心30sec,，倒棄濾液,。

5. 加入500μl漂洗液 RW,13,000rpm 離心30sec，倒棄濾液,。

6. 重復(fù)步驟 5,。

7. 將RNA吸附柱放回空收集管中，13,000rpm 離心2min,，除去吸附膜上殘留的乙醇,。

8. 取出RNA吸附柱，放入 1.5 ml RNase-free離心管中,，向RNA吸附膜的中央懸空滴加30~50μl的RNase-free H2O,，室溫放置1min，13,000rpm離心 1 min,。

9. 提取的RNA可直接用于下游實(shí)驗(yàn),，或于-70℃保存，避免 RNA 降解,。

附錄：

一,、免液氮直接研磨（自動研磨儀）——適用于新鮮樣本

a. 在2.0ml 液氮研磨管中加入4 mm兩粒，加600μl裂解液 ARL,，

放進(jìn)20 mg左右的樣本,，設(shè)置65個頻率，震蕩2 min,。

b. 將裂解物13,000 rpm 離心3 min,，沉淀不能裂解的碎片,。

二、液氮研磨（自動研磨儀）:

a. 把研磨模塊丟到液氮中預(yù)冷,，直到?jīng)]有氣泡冒出視為預(yù)冷完畢,。

b. 在2.0 ml液氮研磨管中放入3mm 鋼珠3粒，放進(jìn)20-30mg樣本,，投入液氮中預(yù)冷,。

c. 把預(yù)冷好的離心管插入研磨模塊中，放進(jìn)研磨儀,，設(shè)置 55 個頻率,， 震蕩 30~60 sec。（以北京赫得研磨儀——京 N9548 為例）

d. 研磨完成后,，馬上加600μl裂解液ARL,，劇烈渦旋振蕩,充分混勻。

e. 將裂解物 13,000 rpm 離心 3 min,，沉淀不能裂解的碎片,。

相關(guān)產(chǎn)品： 

71118-100 Script III 1st Strand cDNA Synthesis Kit（for PCR or qPCR）

71710-100 Script III All-in-one RT Mix with dsDNase（for qPCR）

71600-500 2x Universal SYBR Green qPCR Mix (適用于所有qPCR儀)

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