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Get到這幾招,方可輕松搞定SDS-PAGE電泳實驗,!2021/9/3
SDS-PAGE作為一個老生常談的實驗,早已廣為科研者所知。然而該實驗雖然基礎,,但是細節(jié)繁瑣,耗時長久,,光是配制試劑就要花費2個小時左右,。而這還只是Westernblot(WB)的第一步,也使得完成W...
【技術】提升蛋白質樣品質量,三招就足夠,!2021/9/3
在制備中丟失的蛋白質是永遠不可能在后面的實驗中彌補回來的,。蛋白質樣品制備是許多實驗重要的第一步。為什么要進行樣品的制備?電泳的目的不就是分離嗎,?剛剛接觸時有這樣的疑問,。然并卵,由于雙向電泳一般只能分辨...
真核細胞轉染操作方法2021/9/3
一些真核蛋白在原核宿主細胞中的表達不但行之有效而且成本低廉,,然而許多在細菌中合成的真核蛋白或因折疊方式不正確,,或因折疊效率低下,結果使得蛋白活性低或無活性,。不僅如此,,真核生物蛋白的活性往往需要翻譯后加...
細胞轉染操作方法及各方法比較2021/9/2
轉染,是將外源性基因導入細胞內的一種專門技術,。隨著基因與蛋白功能研究的深入,,轉染目前已成為實驗室工作中經常涉及的基本方法。轉染大致可分為物理介導,、化學介導和生物介導三類途徑,。電穿孔法、顯微注射和基因槍...
尋找轉錄因子與基因啟動子的結合點2021/9/2
經過EMSA,、DNase1足跡實驗,、甲基化干擾實驗、體內足跡實驗,、Chip-on-chip等方式,,終于落實了轉錄因子跟基因的關系,繼續(xù)探索轉錄因子跟該基因的啟動子的結合位點在哪里,?第一步,,要確定到啟動...
關于lncRNA,,你必須知道的秘密(內附彩蛋)2021/9/2
lncRNA一開始被認為是由RNA聚合酶II轉錄形成的轉錄副產物,,并沒有生物學功能,只是一種轉錄噪音(遺傳噪音),。然后,,現(xiàn)在越來越多的研究發(fā)現(xiàn)lncRNA有及其重要的生理功能,這些功能包括:遺傳印記(...
IncRNA系列:lncRNA的生物學功能介紹2021/9/2
(一)lncRNA對于細胞周期及凋亡的調控作用有研究報道,,lncRNA可以通過調節(jié)細胞周期和凋亡的方式,,來影響細胞的增殖。例如,,Gas5(growtharrest-specific5,,非編碼RNA)在...
【專欄】一文總結LncRNA研究思路2021/9/2
lncRNA參與了X染色體沉默,基因組印記以及染色質修飾,,轉錄激活,,轉錄干擾,核內運輸?shù)榷喾N重要的調控過程,,很多人看到lncRNA的熱點還沒有過去,,經常會問如果沒有相關的工作基礎,如何開始lncRNA...
詳解miRNA的誕生之旅2021/9/1
miRNA是由內源性發(fā)卡結構轉錄產物衍生而來的一種長為19-25nt左右的單鏈RNA,。第一,,miRNA基因最先被RNApolymeraseII轉錄生成5'蓋帽和3‘加尾的初級轉錄體,稱為pri-miR...
【科研熱點】腫瘤中的 miRNA(一)2021/9/1
雖然miRNA的研究已經沒有前幾年那么熱門了,,但是任誰都無法否認腫瘤細胞中的miRNAs在腫瘤發(fā)生,、發(fā)展及轉移中起到的重要作用。因此,,選擇miRNA作為切入點,,是希望對過往在miRNA研究領域內的發(fā)現(xiàn)...
【科研熱點】腫瘤中的miRNA(二)2021/9/1
miRNAs是一類由發(fā)卡結構的轉錄物而形成的短的單鏈非編碼RNA,長度一般在19-25個nt,。miRNA發(fā)揮作用的方式是通過和編碼蛋白的mRNA的3‘UTR區(qū)域進行互補結合,,從而抑制mRNA的翻譯或者...
基因研究,,我該拿你怎么辦?2021/9/1
有時候小伙伴們拿到一個Gene-A,,可能是芯片篩查的結果,,可能是導師拍腦袋的結果,這個A很低調,,被人研究的頗少,,作為一個基礎研究的新手,簡直一頭霧水,!凡是都有規(guī)律可循,。如果你文獻看的沒有那么多,腦洞未...
【技術】教你如何達到提取RNA的最高境界,!2021/8/31
免除RNase的困擾RNA分子異常脆弱,很容易就會被無處不在的RNase降解,,輕輕松松的就讓實驗人員的種種努力付之東流,。尤其是當樣品極其稀少且珍貴時,RNA的降解更是讓各位小伙伴們想自掛東南枝,。因而R...
RNA Trizol 抽提步驟2021/8/30
PCR,、qRT-PCR最最初始,都離不開RNA的抽提,,RNA質量的好壞,,直接影響到后續(xù)的反轉錄及PCR等過程,。很多時候,小伙伴們明明跟著Trizol步驟一步一步來的,,謹小慎微,,不敢懈怠,但就是RNA抽...
【干貨】RNA抽提原理和流程2021/8/30
現(xiàn)在我們所熟知的TRIzol是LifeTechnologies公司的商品名,,而同樣的試劑在PiotrChomczynski創(chuàng)辦的MRC公司則被命名為RNAzol(據PiotrChomczynski透露...

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