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WB電泳技巧分享2021/9/14
①清洗玻璃板，去離子水沖,，風(fēng)干或烤干（一定要以處女座的精神去嚴(yán)格要求自己把板子洗干凈,，相當(dāng)重要）②按說明書配膠。先配下膠（分離膠）,，一般兩塊板配10ml的10%的膠（20~80kDa通用）膠的濃度根據(jù)...
蛋白樣品的制備與定量2021/9/14
（1）提細(xì)胞蛋白①消化或刮下細(xì)胞至1.5的EP管中,，標(biāo)記，10000r離心2min,，PBS洗3遍②吸去EP管中PBS,，最好用濾紙吸干里面的水分，加適量RIPA裂解液（RIPA裂解液：蛋白酶抑制劑=25...
三天征服Chip的經(jīng)驗分享2021/9/13
在科研界,，CHIP無疑是高冷的女神,，在追逐的過程總是分分鐘虐得體無完膚，糟心的實驗結(jié)果更是分分鐘想去“狗帶”,。征服CHIP的路上,，有多虐心就有多少要注意的地方。慶幸的是,，曾得到女神青睞的前輩們積累了不...
CO-IP沒有條帶的常見原因和解決的辦法2021/9/13
CO-IP并不容易做,，尤其是兩個蛋白豐度低，相互作用力較弱的時候,。做CO-IP經(jīng)常會遇到?jīng)]有條帶的問題,。這里談?wù)凜O-IP沒有條帶的常見原因和解決的辦法，更有獨門配方獻(xiàn)上,。蛋白濃度過稀絕大多數(shù)情況下,，...
染色質(zhì)免疫共沉淀值得注意的15個細(xì)節(jié)2021/9/13
染色質(zhì)免疫共沉淀，又叫Chip（ChromatinImmunoprecipitation）,。Chip又正好是英語里面薯片的意思,。為了有趣，就叫薯片實驗吧,。做薯片做了幾個月,，時間不長，但深刻體會到了魔鬼...
分享染色質(zhì)免疫共沉淀的方法2021/9/13
目前,，不斷發(fā)展的DNA和蛋白質(zhì)相互作用的方法和技術(shù)已經(jīng)成為研究DNA復(fù)制,、重組、修復(fù)和轉(zhuǎn)錄的核心,。今天跟大家分享的是花樣百出、拽酷炫的染色質(zhì)免疫共沉淀的方法！染色質(zhì)免疫共沉淀(chromatinimm...
ELISA實驗操作中值得關(guān)注的細(xì)節(jié)大盤點2021/9/10
酶聯(lián)免疫吸附測定（ELISA）因其具有敏感性高,、特異性強等優(yōu)點,，被廣泛應(yīng)用于臨床檢測中的各種抗原和抗體的測定。盡管ELISA操作簡單,，但是小實驗里也蘊含著大文章,，ELISA操作各個環(huán)節(jié)對實驗的檢測效果...
ELISA實驗中常遇到的問題,、產(chǎn)生的原因與解決辦法2021/9/10
酶聯(lián)免疫吸附實驗,，簡稱為ELISA。ELISA實驗是一種非常經(jīng)典的免疫學(xué)實驗,。雖然歷史非常悠久了,，但是還是不斷地在臨床和基礎(chǔ)研究中得到應(yīng)用。其主要用于：免疫酶染色各種細(xì)胞內(nèi)成份的定位,；研究抗酶抗體的合...
一句話知曉實驗方法怎么選？2021/9/8
在分子生物學(xué)實驗室里的玩法,，無非就是用某種特定的刺激物（如細(xì)胞活素）去刺激一些細(xì)胞或組織,，讓它們high起來，然后分析細(xì)胞對這些外源刺激物的反應(yīng),，檢測細(xì)胞內(nèi)哪條信號通路被激活或失活,，或者什么蛋白被分泌...
免疫組化（IHC）的10大實戰(zhàn)經(jīng)驗（附臨床上常用免疫組化指標(biāo)）2021/9/8
1.把要做的切片先分好，做幾個抗體可分幾盒,，不正常組織與正常組織要分開,。其余做預(yù)實驗用。2.選擇實驗要做的抗體時,，要結(jié)合他們的正常組織和癌組織的分別表達(dá)率,。3.試劑盒的選擇可結(jié)合生物素強弱的情況。如：...
免疫組化之8大疑難解答2021/9/8
IHC常見的8大疑問Q1：冰凍切片和石蠟切片如何取材,？Answer:冰凍切片取材可分為兩種情況：1）動物灌流固定：如小鼠心臟灌流,，首先采用預(yù)冷的1×PBS灌流沖洗直至血液全部放出，隨后灌注4%PFA直...
免疫組化結(jié)果分析應(yīng)該注意的一些事項和技巧2021/9/8
很多時候,，我們千辛萬苦地染出了一張張漂亮的免疫組化片子,。但是卻不知道如何正確地分析，得出理想的結(jié)果,。這實在是一件憾事,。其實，免疫組化結(jié)果分析的protocol教科書和實驗手冊上面都有,。今天主要談?wù)剳?yīng)該...
如何避免掉進(jìn)做免疫組化時導(dǎo)致非特異性染色的八大坑,？2021/9/8
全國江山一片紅，這可不是閱兵日的朋友圈,，而是在做免疫組化?。『煤玫囊粡埰尤镜门K臟的,。一下子整個人都不好了,。這里，總結(jié)出了導(dǎo)致非特異性染色的八個大坑,，以及避免掉坑里的一些做法,。皆是獨門絕技，不要眨眼咯...
發(fā)高分 SCI，不會免疫組化（IHC）怎么行,？2021/9/7
相信大家對IHC一定不陌生,，世界那么大，實驗方法層出不窮,，但是免疫組化卻是經(jīng)典中的經(jīng)典,，想看看別的高大上的技術(shù)？不急,，我們先來復(fù)習(xí)復(fù)習(xí)免疫組化,。免疫組化，免疫組織化學(xué)技術(shù)（immunohistoche...
基于質(zhì)譜技術(shù)的蛋白質(zhì)組學(xué)在基礎(chǔ)醫(yī)學(xué)科研領(lǐng)域的應(yīng)用前景2021/9/7
基于質(zhì)譜技術(shù)的蛋白質(zhì)組學(xué)方法具有的強大蛋白質(zhì)定性,、定量和蛋白翻譯后修飾分析能力,，其研究模式與方法已成為蛋白質(zhì)層面上研究腫瘤學(xué)研究的主流方案，并已取得了大量的研究成果,。利用差異比較蛋白質(zhì)組學(xué)的方法對不同...
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