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中級(jí)會(huì)員 | 第5年

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如何避免掉進(jìn)做免疫組化時(shí)導(dǎo)致非特異性染色的八大坑？2021/9/8
全國(guó)江山一片紅,，這可不是閱兵日的朋友圈,，而是在做免疫組化??！好好的一張片子染得臟臟的。一下子整個(gè)人都不好了,。這里,，總結(jié)出了導(dǎo)致非特異性染色的八個(gè)大坑,，以及避免掉坑里的一些做法,。皆是獨(dú)門(mén)絕技,，不要眨眼咯...
發(fā)高分 SCI,，不會(huì)免疫組化（IHC）怎么行,？2021/9/7
相信大家對(duì)IHC一定不陌生，世界那么大,，實(shí)驗(yàn)方法層出不窮，但是免疫組化卻是經(jīng)典中的經(jīng)典,，想看看別的高大上的技術(shù),？不急，我們先來(lái)復(fù)習(xí)復(fù)習(xí)免疫組化,。免疫組化,，免疫組織化學(xué)技術(shù)（immunohistoche...
基于質(zhì)譜技術(shù)的蛋白質(zhì)組學(xué)在基礎(chǔ)醫(yī)學(xué)科研領(lǐng)域的應(yīng)用前景2021/9/7
基于質(zhì)譜技術(shù)的蛋白質(zhì)組學(xué)方法具有的強(qiáng)大蛋白質(zhì)定性、定量和蛋白翻譯后修飾分析能力,，其研究模式與方法已成為蛋白質(zhì)層面上研究腫瘤學(xué)研究的主流方案,，并已取得了大量的研究成果。利用差異比較蛋白質(zhì)組學(xué)的方法對(duì)不同...
腫瘤相關(guān)蛋白翻譯后修飾研究中的應(yīng)用2021/9/7
腫瘤發(fā)生與發(fā)展過(guò)程中,，除了表達(dá)差異,，很多蛋白質(zhì)的功能受到翻譯后修飾的調(diào)控。利用蛋白質(zhì)組學(xué)的方法,，可對(duì)腫瘤相關(guān)蛋白質(zhì)的修飾進(jìn)行的定量及定性分析,，為激酶信號(hào)通路、組蛋白修飾等研究提供基礎(chǔ),。Kim等在201...
在腫瘤相關(guān)蛋白定性研究中的應(yīng)用2021/9/7
利用shotgun的蛋白組技術(shù),，可以實(shí)現(xiàn)對(duì)復(fù)雜樣品中大量蛋白質(zhì)的定性分析，進(jìn)而為闡明腫瘤相關(guān)蛋白質(zhì)的相互作用,、信號(hào)通路組成及蛋白質(zhì)亞細(xì)胞定位提供依據(jù),。Dawson等人發(fā)表于2011年《Nature》上...
在腫瘤相關(guān)蛋白定量研究中的應(yīng)用2021/9/7
利用非標(biāo)記（2D，Labelfree）及標(biāo)記（DIGE,、SILAC,、iTRAQ）定量的蛋白組技術(shù)與方法，可以實(shí)現(xiàn)對(duì)不同樣品中的大量蛋白進(jìn)行大規(guī)模的相對(duì)定量研究,，進(jìn)而為相關(guān)具體機(jī)制的深入闡明提供基礎(chǔ)和思...
蛋白質(zhì)組學(xué)生物信息學(xué)的作用和影響2021/9/6
蛋白質(zhì)組學(xué)本身是一門(mén)大科學(xué),，其產(chǎn)生的數(shù)據(jù)量是十分龐大。如何將大量的蛋白質(zhì)組學(xué)數(shù)據(jù)進(jìn)行儲(chǔ)存和加工,，使之轉(zhuǎn)變成可以理解的具有生物學(xué)意義的結(jié)果比如蛋白質(zhì)名稱,，多肽序列,，蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu)，蛋白質(zhì)差異等,；如何使蛋白質(zhì)...
認(rèn)識(shí)蛋白質(zhì)組學(xué)鑒定技術(shù)2021/9/6
在蛋白質(zhì)組學(xué)研究流程中,，蛋白質(zhì)鑒定技術(shù)是最關(guān)鍵的部分。在蛋白質(zhì)組分離技術(shù)方面還有凝膠電泳技術(shù)和色譜技術(shù)的選擇,，而蛋白質(zhì)鑒定技術(shù)方面卻只是生物質(zhì)譜技術(shù)（BioMassSpectrometry）一枝獨(dú)苗,。...
【蛋白技術(shù)】蛋白標(biāo)簽TAG是什么高大上的東西,？2021/9/3
首先,，蛋白標(biāo)簽（proteintag）是什么？蛋白標(biāo)簽（proteintag）是指利用DNA體外重組技術(shù),，與目的蛋白一起融合表達(dá)的一種多肽或者蛋白,，以便于目的蛋白的表達(dá)、檢測(cè),、示蹤和純化等,。蛋白標(biāo)簽大...
酵母雜交實(shí)驗(yàn)——從一無(wú)所知到略知一二2021/9/3
低分文章要想逆襲，實(shí)現(xiàn)向高分文章的跳躍,，就一定少不了要將細(xì)胞豪門(mén)中分子間錯(cuò)綜復(fù)雜的關(guān)系屢屢清楚,。為了找尋能讓自家目的蛋白榮登科研“頭條榜”的“花邊新聞”，一眾科研者可謂是操碎了心,。慶幸的是,，酵母雙雜交...
Get到這幾招,，方可輕松搞定SDS-PAGE電泳實(shí)驗(yàn)！2021/9/3
SDS-PAGE作為一個(gè)老生常談的實(shí)驗(yàn),，早已廣為科研者所知,。然而該實(shí)驗(yàn)雖然基礎(chǔ)，但是細(xì)節(jié)繁瑣,，耗時(shí)長(zhǎng)久,，光是配制試劑就要花費(fèi)2個(gè)小時(shí)左右。而這還只是Westernblot（WB）的第一步,，也使得完成W...
【技術(shù)】提升蛋白質(zhì)樣品質(zhì)量,，三招就足夠,！2021/9/3
在制備中丟失的蛋白質(zhì)是永遠(yuǎn)不可能在后面的實(shí)驗(yàn)中彌補(bǔ)回來(lái)的。蛋白質(zhì)樣品制備是許多實(shí)驗(yàn)重要的第一步,。為什么要進(jìn)行樣品的制備,？電泳的目的不就是分離嗎,？剛剛接觸時(shí)有這樣的疑問(wèn)。然并卵,，由于雙向電泳一般只能分辨...
真核細(xì)胞轉(zhuǎn)染操作方法2021/9/3
一些真核蛋白在原核宿主細(xì)胞中的表達(dá)不但行之有效而且成本低廉,，然而許多在細(xì)菌中合成的真核蛋白或因折疊方式不正確，或因折疊效率低下,，結(jié)果使得蛋白活性低或無(wú)活性,。不僅如此，真核生物蛋白的活性往往需要翻譯后加...
細(xì)胞轉(zhuǎn)染操作方法及各方法比較2021/9/2
轉(zhuǎn)染,，是將外源性基因?qū)爰?xì)胞內(nèi)的一種專門(mén)技術(shù),。隨著基因與蛋白功能研究的深入，轉(zhuǎn)染目前已成為實(shí)驗(yàn)室工作中經(jīng)常涉及的基本方法,。轉(zhuǎn)染大致可分為物理介導(dǎo),、化學(xué)介導(dǎo)和生物介導(dǎo)三類途徑。電穿孔法,、顯微注射和基因槍...
尋找轉(zhuǎn)錄因子與基因啟動(dòng)子的結(jié)合點(diǎn)2021/9/2
經(jīng)過(guò)EMSA、DNase1足跡實(shí)驗(yàn),、甲基化干擾實(shí)驗(yàn),、體內(nèi)足跡實(shí)驗(yàn)、Chip-on-chip等方式,，終于落實(shí)了轉(zhuǎn)錄因子跟基因的關(guān)系,，繼續(xù)探索轉(zhuǎn)錄因子跟該基因的啟動(dòng)子的結(jié)合位點(diǎn)在哪里？第一步,，要確定到啟動(dòng)...
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