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【RNA提取】RNA抽提的三大紀(jì)律八項注意,！2021/8/30
今天我們談一談RNA抽提的問題,。為了方便大家記憶,，總結(jié)出了“三大紀(jì)律八項注意”。紀(jì)律一：無外源酶的污染,。外源酶會造成RNA的降解,，造成RNA得率太低，或者*失敗,。而外源酶又是無處不在的,。這就要求注意以...
基因研究做引物設(shè)計,，一定要知道轉(zhuǎn)錄本能干什么！2021/8/30
我們平常通過數(shù)據(jù)庫查找某個基因的相關(guān)信息時,，會發(fā)現(xiàn)該基因有多個轉(zhuǎn)錄本,。為什么一個基因可以有多個轉(zhuǎn)錄本呢？轉(zhuǎn)錄本能干什么,？轉(zhuǎn)錄本其實就是基因通過轉(zhuǎn)錄形成的一種或多種可供編碼蛋白質(zhì)的成熟的mRNA,。一個基...
RNA反轉(zhuǎn)錄又失敗了,？填坑還得看這六大要素,！2021/8/30
老話說的好，萬事開頭難,。而這話在RT-PCR中則較為體現(xiàn)出來,，其開頭的第一步——將RNA反轉(zhuǎn)為cDNA,，表面上看似簡單,，實際上則暗潮洶涌,，指不定就在哪里挖個坑，就會讓斗志高昂的實驗汪們摔的鼻青臉腫,，而...
RNA轉(zhuǎn)錄的實驗方法選擇和步驟2021/8/27
正規(guī)化管理的實驗室都會給新人進行相關(guān)技能體系的培訓(xùn),，但是被老板散養(yǎng)的研究僧或者無奈從0開始做科研的臨床醫(yī)生也不在少數(shù)。他們在初始接觸分子實驗時,，手持《現(xiàn)代分子生物學(xué)實驗指導(dǎo)》這本寶典,，很容易被五花繚亂...
新型RNAi載體——saiRNA，更為安全的高效RNA干擾載體,！2021/8/27
RNAi技術(shù)的前世今生造物真的很神奇,。生物體有很多機會被來自病毒、細(xì)菌等外源性基因隨機整合到宿主細(xì)胞基因組內(nèi),。但宿主會說,，“你有張良計我有過墻梯”,，這個過墻梯就是RNAi：宿主細(xì)胞會對這些外源性基因d...
【RNAi與siRNA技術(shù)】基因敲除鼠的實驗建議2021/8/27
如果是在做動物實驗，而且是基因敲除鼠的實驗,，那么就會做大批量的小鼠基因型鑒定試驗,，來確定自己小鼠的基因型，然而,，再做實驗的過程中往往會出現(xiàn)一些意想不到的結(jié)果,，在這里為大家提一點點小建議。提取DNA1,、...
一篇就夠了,，帶你了解高通量測序,！2021/8/27
說到近十年來發(fā)展最迅猛的生物技術(shù)，首先想到了高通量測序,我們研究基因組學(xué)都離不開它,。目前,，高通量測序已經(jīng)深入到生命科學(xué)的各個領(lǐng)域，不僅有力地推動了基礎(chǔ)研究的發(fā)展,，也在逐漸征服臨床應(yīng)用,。所謂的高通量測序...
避免踩坑,，注意別踩DNA測序里的大坑！2021/8/27
DNA測序技術(shù)自從發(fā)明以來,，作為一種重要的分子生物學(xué)手段,，正在科研和臨床上得到了越來越廣泛的應(yīng)用。下面,，介紹一下DNA測序里的大坑,。給大家一個前車之鑒吧?？右唬盒盘査p/中斷測序信號衰減和中斷,，是測序...
DNA 甲基化測序常用方法2021/8/26
隨著高通量測序技術(shù)（NGS）技術(shù)的發(fā)展，使我們能夠從全基因組水平來分析5’甲基胞嘧啶及組蛋白修飾等事件,，由此能夠發(fā)現(xiàn)很多傳統(tǒng)的基因組學(xué)研究所不能發(fā)現(xiàn)的東西,，這就是所謂的“DNA甲基化測序”！DNA甲基...
電泳中的異?，F(xiàn)象及其原因分析2021/8/26
跑電泳是分子生物學(xué)實驗的一項基本技術(shù)。只要做分子生物學(xué)方面的實驗，可能或多或少,，或早或晚都要跑跑電泳,。有時候，跑電泳跑著跑著也會出現(xiàn)一些奇奇怪怪的現(xiàn)象,。下面,，談一談跑電泳的過程中可能會發(fā)生的異常現(xiàn)象,，...
【DNA 電泳】教你做果凍：瓊脂糖凝膠電泳實驗技巧分享2021/8/26
果凍晶瑩剔透,，口感QQ的，其實果凍的原料瓊脂糖,，也是我們平時用來跑電泳的材料,，瓊脂糖凝膠電泳實驗常用以DNA切膠回收，DNA分離和用于佐證DNA是否重組,、質(zhì)粒等是否切開,。今天我們就來聊聊瓊脂糖凝膠電泳...
【教程】構(gòu)建載體其實一點也不難,！2021/8/26
我們在研究基因的功能時,，逃脫不掉的就是為了我們的實驗?zāi)康模赡苄枰獦?gòu)建各種載體,，比如表達載體,，克隆載體，基因打靶載體等等,。很多人在構(gòu)建載體的時候都感覺很困難,，特別是對于一個剛進入實驗室的新人來說那更是...
表達融合蛋白時,，如何把兩個基因拼接起來？2021/8/26
A君：我要表達一個ras加GFP融合蛋白,，怎么設(shè)計引物,？安培君：你的GFP標(biāo)簽蛋白在載體里還是要你自己插進去？A君：是我自己插進去,。安培君：你打算怎樣融合,？A君：是不是這樣？酶切A基因,，酶切質(zhì)粒,，把A...
教你如何做分子構(gòu)建,，從此邁向科研達人！2021/8/25
做過分子實驗的人都知道，要想做的有效率有質(zhì)量是很苦逼的,，1個月做100個克隆那都是小case，沒點看家的本事怎么行,。如果再遇到比較稀有的基因,，周旋個把月，那也是家常便飯,。下面就和大家分享一些載體構(gòu)建的...
學(xué)學(xué)序列拼接,，想節(jié)省費用的千萬別錯過,！2021/8/25
相信大家PCR之后一般要進行測序以保證擴增序列的正確性吧？由于測序能力的限制,，目前好的公司也只能保證一個反應(yīng)800bp測準(zhǔn),。如果大家的克隆片斷大于1k，那么勢必要同時測兩個反應(yīng),，然后將兩個反應(yīng)得到的序...
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