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① 清洗玻璃板,，去離子水沖,，風(fēng)干或烤干（一定要以處女座的精神去嚴(yán)格要求自己把板子洗干凈，相當(dāng)重要）
② 按說明書配膠,。先配下膠（分離膠）,，一般兩塊板配 10ml 的 10%的膠（20~80kDa 通用）膠的濃度根據(jù)你所需要跑的蛋白的分子量大小決定,混勻后灌膠，立即用正丁醇或無水乙醇封,，待凝固后倒出正丁醇,，用去離子水沖洗，濾紙吸干,；③ 配上膠（積層膠），參考說明書，一般兩塊板配 4ml 的 5%的膠,，混勻后灌膠,，插板,待凝固。（可 4°過夜）
④ 配電泳液（tris3.03g,，甘氨酸 14.4g,，SDS1g，定容至 1L）
⑤ 將玻璃板裝好放入電泳槽中,，加電泳液，輕輕拔梳,。
⑥ 上樣（這是每個(gè)WB達(dá)人最能裝逼的一個(gè)環(huán)節(jié),，高手會(huì)告訴你憑感覺加樣連孔都不用看）
⑦ 連接電源，一定要注意紅對(duì)紅,，黑對(duì)黑,，定電壓和時(shí)間，上膠（90v,，約 40min,，maker 分出條帶）,，換壓，下膠（120v,，2h）,。（不要讓溴酚藍(lán)跑出去）
經(jīng)驗(yàn)總結(jié)：
想要條帶跑的好看點(diǎn)，最好把上膠稍微配高一點(diǎn),。
換電壓主要是看溴酚藍(lán)有沒有跑到下膠,，沒有確定的時(shí)間點(diǎn)。
膠最好現(xiàn)配現(xiàn)用,，如果需要保存最好用濕潤(rùn)的保鮮膜包好,。
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