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DNA 甲基化測序常用方法2021/8/26
隨著高通量測序技術（NGS）技術的發(fā)展，使我們能夠從全基因組水平來分析5’甲基胞嘧啶及組蛋白修飾等事件,，由此能夠發(fā)現很多傳統(tǒng)的基因組學研究所不能發(fā)現的東西,，這就是所謂的“DNA甲基化測序”！DNA甲基...
電泳中的異?，F象及其原因分析2021/8/26
跑電泳是分子生物學實驗的一項基本技術。只要做分子生物學方面的實驗,，可能或多或少,，或早或晚都要跑跑電泳。有時候,，跑電泳跑著跑著也會出現一些奇奇怪怪的現象,。下面，談一談跑電泳的過程中可能會發(fā)生的異?，F象,，...
【DNA 電泳】教你做果凍：瓊脂糖凝膠電泳實驗技巧分享2021/8/26
果凍晶瑩剔透，口感QQ的，其實果凍的原料瓊脂糖,，也是我們平時用來跑電泳的材料,，瓊脂糖凝膠電泳實驗常用以DNA切膠回收，DNA分離和用于佐證DNA是否重組,、質粒等是否切開,。今天我們就來聊聊瓊脂糖凝膠電泳...
【教程】構建載體其實一點也不難,！2021/8/26
我們在研究基因的功能時,，逃脫不掉的就是為了我們的實驗目的，可能需要構建各種載體,，比如表達載體,，克隆載體，基因打靶載體等等,。很多人在構建載體的時候都感覺很困難,，特別是對于一個剛進入實驗室的新人來說那更是...
表達融合蛋白時,，如何把兩個基因拼接起來？2021/8/26
A君：我要表達一個ras加GFP融合蛋白,，怎么設計引物,？安培君：你的GFP標簽蛋白在載體里還是要你自己插進去？A君：是我自己插進去,。安培君：你打算怎樣融合,？A君：是不是這樣？酶切A基因,，酶切質粒,，把A...
教你如何做分子構建，從此邁向科研達人,！2021/8/25
做過分子實驗的人都知道,，要想做的有效率有質量是很苦逼的，1個月做100個克隆那都是小case,，沒點看家的本事怎么行,。如果再遇到比較稀有的基因，周旋個把月,，那也是家常便飯,。下面就和大家分享一些載體構建的...
學學序列拼接,，想節(jié)省費用的千萬別錯過,！2021/8/25
相信大家PCR之后一般要進行測序以保證擴增序列的正確性吧？由于測序能力的限制,，目前好的公司也只能保證一個反應800bp測準,。如果大家的克隆片斷大于1k，那么勢必要同時測兩個反應,，然后將兩個反應得到的序...
你真的了解 TA 克隆嗎？2021/8/25
首先,，TA克隆是用于PCR產物的克隆和測序,。原理是利用Taq酶能夠在PCR產物的3’末端加上一個非模板依賴的A，而T載體是一種帶有3’T突出端的載體,，在連接酶作用下,，可以快速地、一步到位地把PCR產物...
上圖！教你秒懂重組 DNA 技術常用工具酶,！2021/8/25
1分子剪刀——限制性內切酶：作用：識別特異序列,，切割DNA限制酶的命名是根據細菌種類而定，以EcoRI為例：2膠水——DNA連接酶作用：跟限制性內切酶對著干,，催化DNA中相鄰核苷酸間形成磷酸二酯鍵,，使...
如何解決酶切切過頭的問題,？2021/8/25
之前談到了酶切切不動的問題,。這一次，我們探討一下酶切的另外一端：酶切切過頭的問題,。還是按照一貫的做法和思路,，發(fā)現主要是兩個原因導致的，解決辦法也是有的,。一,、酶切時間過長酶切時間過長的確有時候會對目的條...
【技術】酶切、酶切,，切還是不切,？2021/8/24
酶切,，作為一種常用的分子克隆的手段，如果應用得當,，可謂寶刀屠龍,，無往而不利；如果應用不當,，又會步步維艱,。真是讓人歡喜讓人憂愁。酶切,，最常見的問題就是切不動和切過了,。這些問題比較復雜。下面,，先講一講切不...
瓊脂糖凝膠電泳、酶和試劑的使用等一些注意事項2021/8/24
基因克隆在發(fā)明后的32年,，需求一直不斷增加,，但是有些小伙伴的重組質粒就是怎么樣都構建不出來。其實,，看似簡單的傳統(tǒng)基因克隆,，可是存在著重重陷阱！美國羅林斯研究中心（RollinsResearchCent...
DNA載體構建——【干貨】三圖讓你秒懂質粒圖譜2021/8/24
很多人拿到一個質粒圖譜,，第一反應只能是仰天長嘯,，這是什么玩意？這些ori,、RBS,、tet是什么鬼？這些箭頭代表什么,，轉錄的方向嗎,？為什么都不相同，不會“撞車”么,？來,，看幾張圖，上面的問題就能一一破解,。...
為什么不能用質粒DNA抽提試劑來提取基因組DNA？2021/8/24
導讀為什么同樣抽提質粒DNA的試劑不能用來抽提基因組DNA呢,？差別很大么？要買兩種試劑盒真是麻煩??！你還不要不相信,，有小伙伴試過，還真沒抽提出來,。今天小編就來和大家一起探究下原因,！基因組DNA的抽提，...
【技術貼】DNA 純化實驗的幾種常用方法2021/8/24
DNA純化是分子生物學研究中經常需要用到的一種方法,。一般來說,，做DNA純化有3個目的：1.獲得高純度的DNA；2.濃縮DNA,；3.用DNA做測序,，芯片等生物信息學方面的實驗。下面,，談一談DNA純化的幾...
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