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【RNAi與siRNA技術(shù)】基因敲除鼠的實驗建議2021/8/27
如果是在做動物實驗,，而且是基因敲除鼠的實驗,，那么就會做大批量的小鼠基因型鑒定試驗,，來確定自己小鼠的基因型,，然而,，再做實驗的過程中往往會出現(xiàn)一些意想不到的結(jié)果,，在這里為大家提一點點小建議,。提取DNA1,、...
一篇就夠了,，帶你了解高通量測序！2021/8/27
說到近十年來發(fā)展最迅猛的生物技術(shù),，首先想到了高通量測序,我們研究基因組學(xué)都離不開它,。目前，高通量測序已經(jīng)深入到生命科學(xué)的各個領(lǐng)域,，不僅有力地推動了基礎(chǔ)研究的發(fā)展,，也在逐漸征服臨床應(yīng)用。所謂的高通量測序...
避免踩坑，注意別踩DNA測序里的大坑,！2021/8/27
DNA測序技術(shù)自從發(fā)明以來,，作為一種重要的分子生物學(xué)手段，正在科研和臨床上得到了越來越廣泛的應(yīng)用。下面,，介紹一下DNA測序里的大坑,。給大家一個前車之鑒吧?？右唬盒盘査p/中斷測序信號衰減和中斷,，是測序...
DNA 甲基化測序常用方法2021/8/26
隨著高通量測序技術(shù)（NGS）技術(shù)的發(fā)展，使我們能夠從全基因組水平來分析5’甲基胞嘧啶及組蛋白修飾等事件,，由此能夠發(fā)現(xiàn)很多傳統(tǒng)的基因組學(xué)研究所不能發(fā)現(xiàn)的東西,，這就是所謂的“DNA甲基化測序”！DNA甲基...
電泳中的異?，F(xiàn)象及其原因分析2021/8/26
跑電泳是分子生物學(xué)實驗的一項基本技術(shù)。只要做分子生物學(xué)方面的實驗,，可能或多或少,，或早或晚都要跑跑電泳。有時候,，跑電泳跑著跑著也會出現(xiàn)一些奇奇怪怪的現(xiàn)象,。下面，談一談跑電泳的過程中可能會發(fā)生的異?，F(xiàn)象,，...
【DNA 電泳】教你做果凍：瓊脂糖凝膠電泳實驗技巧分享2021/8/26
果凍晶瑩剔透，口感QQ的,，其實果凍的原料瓊脂糖,，也是我們平時用來跑電泳的材料，瓊脂糖凝膠電泳實驗常用以DNA切膠回收,，DNA分離和用于佐證DNA是否重組,、質(zhì)粒等是否切開。今天我們就來聊聊瓊脂糖凝膠電泳...
【教程】構(gòu)建載體其實一點也不難,！2021/8/26
我們在研究基因的功能時，逃脫不掉的就是為了我們的實驗?zāi)康?，可能需要?gòu)建各種載體,，比如表達載體，克隆載體,，基因打靶載體等等,。很多人在構(gòu)建載體的時候都感覺很困難，特別是對于一個剛進入實驗室的新人來說那更是...
表達融合蛋白時,，如何把兩個基因拼接起來？2021/8/26
A君：我要表達一個ras加GFP融合蛋白,，怎么設(shè)計引物,？安培君：你的GFP標簽蛋白在載體里還是要你自己插進去？A君：是我自己插進去,。安培君：你打算怎樣融合,？A君：是不是這樣？酶切A基因,，酶切質(zhì)粒，把A...
教你如何做分子構(gòu)建，從此邁向科研達人,！2021/8/25
做過分子實驗的人都知道,，要想做的有效率有質(zhì)量是很苦逼的，1個月做100個克隆那都是小case,，沒點看家的本事怎么行,。如果再遇到比較稀有的基因，周旋個把月,，那也是家常便飯,。下面就和大家分享一些載體構(gòu)建的...
學(xué)學(xué)序列拼接,，想節(jié)省費用的千萬別錯過！2021/8/25
相信大家PCR之后一般要進行測序以保證擴增序列的正確性吧,？由于測序能力的限制,，目前好的公司也只能保證一個反應(yīng)800bp測準。如果大家的克隆片斷大于1k,，那么勢必要同時測兩個反應(yīng),，然后將兩個反應(yīng)得到的序...
你真的了解 TA 克隆嗎,？2021/8/25
首先,，TA克隆是用于PCR產(chǎn)物的克隆和測序。原理是利用Taq酶能夠在PCR產(chǎn)物的3’末端加上一個非模板依賴的A,，而T載體是一種帶有3’T突出端的載體,，在連接酶作用下，可以快速地,、一步到位地把PCR產(chǎn)物...
上圖！教你秒懂重組 DNA 技術(shù)常用工具酶,！2021/8/25
1分子剪刀——限制性內(nèi)切酶：作用：識別特異序列,，切割DNA限制酶的命名是根據(jù)細菌種類而定，以EcoRI為例：2膠水——DNA連接酶作用：跟限制性內(nèi)切酶對著干,，催化DNA中相鄰核苷酸間形成磷酸二酯鍵,，使...
如何解決酶切切過頭的問題,？2021/8/25
之前談到了酶切切不動的問題,。這一次，我們探討一下酶切的另外一端：酶切切過頭的問題,。還是按照一貫的做法和思路,，發(fā)現(xiàn)主要是兩個原因?qū)е碌模鉀Q辦法也是有的,。一,、酶切時間過長酶切時間過長的確有時候會對目的條...
【技術(shù)】酶切、酶切,，切還是不切,？2021/8/24
酶切，作為一種常用的分子克隆的手段,，如果應(yīng)用得當(dāng),，可謂寶刀屠龍，無往而不利,；如果應(yīng)用不當(dāng),，又會步步維艱。真是讓人歡喜讓人憂愁,。酶切,，最常見的問題就是切不動和切過了。這些問題比較復(fù)雜,。下面,，先講一講切不...
瓊脂糖凝膠電泳,、酶和試劑的使用等一些注意事項2021/8/24
基因克隆在發(fā)明后的32年,，需求一直不斷增加，但是有些小伙伴的重組質(zhì)粒就是怎么樣都構(gòu)建不出來,。其實,，看似簡單的傳統(tǒng)基因克隆,，可是存在著重重陷阱！美國羅林斯研究中心（RollinsResearchCent...
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