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生物樣本庫
蛋白研究系列
有趣的細(xì)胞冷知識2021/9/23
1.人體細(xì)胞都很小嗎,？答案是否定的，比如說星形膠質(zhì)細(xì)胞,，它的胞體上有著長長的軸突,，長度甚至可達(dá)一米；（jing）子是人體內(nèi)最小的細(xì)胞,，只有不到3微米,，而卵子卻有140微米。2.人體免疫細(xì)胞過多是好事嗎...
凍存細(xì)胞的這些坑，你踩過嗎,？2021/9/23
凍存細(xì)胞的錯誤時機(jī)主要有：細(xì)胞量太少,，細(xì)胞狀態(tài)不好，細(xì)胞變形嚴(yán)重,，或者細(xì)胞生長堆積,，一旦生長過平頂期，培養(yǎng)基就會變得很黃,，細(xì)胞可疑污染,；鏡下觀察細(xì)胞有很多碎片或者不明物,；培養(yǎng)時間過長,，連續(xù)培養(yǎng)超過二個...
常見細(xì)胞培養(yǎng)試劑的配制方法分享2021/9/23
培養(yǎng)用液是維護(hù)組織細(xì)胞生存,、生長及進(jìn)行細(xì)胞培養(yǎng)各項(xiàng)操作過程中所需的基本溶液。常用的細(xì)胞培養(yǎng)試劑包括：超純水,，平衡鹽溶液,，消化液，PH調(diào)整液,，谷氨酰胺溶液,，抗生素溶液。常見的超純水1.使用純水機(jī)純化而來...
細(xì)胞培養(yǎng)無小事，需注意的四個事項(xiàng),！2021/9/22
培養(yǎng)細(xì)胞的*培養(yǎng)基一般由基礎(chǔ)培養(yǎng)基（如MEM）和添加劑（血清或細(xì)胞生長因子）組成,，培養(yǎng)基的配方都會隨著細(xì)胞需要的營養(yǎng)不斷的改進(jìn)，而抗生素也是,，廣譜抗生素使用太多,，會導(dǎo)致細(xì)胞的耐受性提高，從而產(chǎn)生抗性,，...
如何通過細(xì)節(jié)挑選血清？2021/9/22
體外生長的細(xì)胞對微生物及一些有害有毒物質(zhì)無任何抵抗力,，挑選血清是一個很艱難的決定,，有些血清可能前期養(yǎng)細(xì)胞沒有看到多大的問題，但是養(yǎng)著養(yǎng)著細(xì)胞突然暴斃,，之前我們一直以為是細(xì)胞或者培養(yǎng)基的問題,，后來給血清...
分享哺乳動物細(xì)胞培養(yǎng)的9個基本技巧,！2021/9/22
一,、凈化空氣在開始任何組織培養(yǎng)工作之前，打開新風(fēng)系統(tǒng)至少15分鐘,，確保有清潔的空氣流入,。要始終確保沒有任何東西覆蓋它。每周打開紫外線燈3-4次,，最多半個小時,，可以幫助保持你的實(shí)驗(yàn)室無污染，但你應(yīng)該記住...
怎么培養(yǎng)好的你細(xì)胞,？2021/9/22
細(xì)胞培養(yǎng)是細(xì)胞和分子生物學(xué)的主要工具之一，提供研究細(xì)胞正常生理學(xué)和生物化學(xué)的優(yōu)秀模型系統(tǒng)（例如,，代謝研究,、衰老）,、藥物和有毒化合物對細(xì)胞的影響，突變和致癌,。它還用于藥物篩選和開發(fā),，以及大規(guī)模生產(chǎn)生物化...
消除細(xì)胞聚團(tuán)就是這么簡單,！2021/9/22
當(dāng)在生長培養(yǎng)基中進(jìn)行單懸浮細(xì)胞培養(yǎng)時,，樣本中出現(xiàn)細(xì)胞丟失的情況并不少見。當(dāng)細(xì)胞破裂時,，它們會釋放DNA和碎片,，導(dǎo)致細(xì)胞聚集成大團(tuán)塊，使其難以擴(kuò)張,。細(xì)胞聚團(tuán)既可導(dǎo)致細(xì)胞凋亡,，也可引起細(xì)胞死亡。隨著更多的...
清晰的條帶是這樣跑出來的——western blot八大秘訣,！2021/9/17
1.制膠：先制分離膠，再制濃縮膠,，嚴(yán)格按照制膠說明書來就可以了,。需要注意的一點(diǎn)是制膠一定要混勻！混勻,！混勻,！個人經(jīng)驗(yàn)是每加一種試劑，就混勻一下,，直到最后一種試劑加完,。對于初學(xué)者，還要區(qū)分制膠的玻璃板是...
如何在WB中順利獲取大分子蛋白,？2021/9/17
分子量大于150Ka的蛋白，經(jīng)常折磨我們實(shí)驗(yàn)人,。想當(dāng)初,，辛辛苦苦忙到深夜，結(jié)果發(fā)現(xiàn)顯影空空如也,。連續(xù)幾個月如此,，內(nèi)心是何等抓狂。當(dāng)大分子條帶第一次出來的時候,，心里特別開心,，就像見到了初戀情人一樣?？吹?..
如何優(yōu)雅地獲得漂亮小分子蛋白條帶2021/9/17
做過Western-Blot的童鞋知道,，分子量小于30KDa的蛋白分子不容易做,。小分子蛋白虐我千百遍，我待小分子蛋白如初戀,。抱怨是沒用的,，想方設(shè)法解決問題才是正道,。一次又一次的調(diào)整方案,，一次又一次的徒...
分享總結(jié)Western跑磷酸化蛋白的要點(diǎn)2021/9/17
抗體工欲善其事必先利其器，抗體很關(guān)鍵,。這里我們要說的并不是最貴的就是好的,，如果條件允許，建議同時購買不同廠家的抗體,，一起來試一試,，因?yàn)橛袝r候即使是好的品牌，不同批次穩(wěn)定性也不一樣,?？贵w從訂購到到貨有一...
盤點(diǎn)RACE技術(shù)的幾種類型及特點(diǎn)2021/9/16
在分子生物學(xué)中，未知基因全長序列的獲取是研究新基因的重要步驟,。當(dāng)我們不清楚目的基因的完整序列時,，獲得未知序列的方法有反向PCR、mRNA差異顯示技術(shù),、基因組減法技術(shù)以及cDNA文庫篩選技術(shù)等等.......
搞定內(nèi)參，駕馭 Western blot 已成功一半2021/9/15
westernblot對絕大多數(shù)實(shí)驗(yàn)新人而言,，絕對是心中痛,，一碰就要抓狂。沒辦法,誰讓導(dǎo)師發(fā)話了,，WB做不好,，延畢就是分分鐘的事兒。這還真是讓小伙伴們感嘆道,，WB想說愛你不容易,。那么為了*馴服WB，獲...
用磷酸化抗體做Western Blot時，要注意哪些,？2021/9/15
今天給大家分享一下在用磷酸化抗體做WesternBlot時,，應(yīng)該注意些什么。1.警惕內(nèi)部敵人一定要在lysisbuffer中加入蛋白酶抑制劑,，還要加入一定量的磷酸酶抑制劑,，因?yàn)榻M織或細(xì)胞裂解時會釋放出...
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