培養(yǎng)用液是維護(hù)組織細(xì)胞生存,、生長及進(jìn)行細(xì)胞培養(yǎng)各項(xiàng)操作過程中所需的基本溶液。常用的細(xì)胞培養(yǎng)試劑包括：超純水，平衡鹽溶液,，消化液,，PH調(diào)整液，谷氨酰胺溶液,，抗生素溶液,。

常見的超純水

1. 使用純水機(jī)純化而來；

2. 蒸餾水和離子交換水

3. 三蒸水

平衡鹽溶液

1,、平衡鹽溶液主要由無機(jī)鹽,、葡萄糖組成，它的作用是維持細(xì)胞滲透壓平衡,，保持pH穩(wěn)定及提供簡單的營養(yǎng),。主要用于取材時(shí)組織塊的漂洗、細(xì)胞的漂洗,、配制其他試劑等,。

2、D-Hank’s與Hank’s的一個(gè)主要區(qū)別在于前者不含有Ca2+,、Mg2+,，因此D-Hank’s常用于配制胰酶溶液。

3,、配制平衡鹽溶液也應(yīng)當(dāng)用三蒸水,。如果配方中含有Ca2+、Mg2+,，應(yīng)當(dāng)首先溶解這些成分,。配好的平衡鹽溶液可以過濾除菌或高溫高壓滅菌.

幾種常見的平衡鹽溶液配方：

消化液

（1）以配制250ml0.25%DEDTA的胰酶為例，稱取胰蛋白酶粉末0.625g置燒杯中,，先用少許D-Hanks 或PBS平衡鹽溶液（pH7.2 左右）調(diào)成糊狀,，然后再補(bǔ)足D-Hanks 平衡鹽溶液，并不斷攪拌振蕩直到攪拌混勻,，置室溫4 小時(shí)或冰箱過夜,；

（2）次日，先用濾紙粗濾,，再進(jìn)行過濾除菌,，定容至250ml，分裝于鹽水瓶或三角瓶,，低溫冰箱保存?zhèn)溆?，胰酶常用濃度?.25% 或0.125%。

胰蛋白酶作用于與賴氨酸或精氨酸相連接的肽健,，除去細(xì)胞間粘蛋白及糖蛋白,，影響細(xì)胞骨架，從而使細(xì)胞分離,。

胰蛋白酶液濃度越高,，作用越強(qiáng),，但超過一定限度會(huì)損傷細(xì)胞。

胰蛋白酶是一種黃白色粉末,，用無Ca2+,、Mg2+的PBS緩沖液配制常用的胰蛋白酶液濃度是0.25％ 。用濾器過濾除菌,。

胰蛋白酶液消化時(shí)間：2-10分鐘,，用含血清培養(yǎng)液終止其對細(xì)胞的消化作用。

pH調(diào)整液

常用的有HEPES液和NaHC03溶液

 1.NaHC03溶液:NaHC03是培養(yǎng)基中必須添加的成分,，一般情況下是按照說明書的要求準(zhǔn)確添加,，以保證培養(yǎng)基在5%CO2的環(huán)境下pH達(dá)到設(shè)計(jì)標(biāo)準(zhǔn)。

 2．HEPES液：HEPES是一種弱酸,，中文名稱是羥乙（乙）基哌（派）嗪乙硫磺酸,。HEPES對細(xì)胞無毒性，主要作用是防止培養(yǎng)基pH迅速變動(dòng)

100X的Hepes配制：取23.8g的HEPES溶于90ml的雙蒸水中 ,，用1N的NAHCO3調(diào)PH至7.8-8.0之間,，過濾除菌，定容至100ml.

谷氨酰胺補(bǔ)充液:

谷氨酰胺在細(xì)胞代謝過程中起重要作用,，合成培養(yǎng)基中都要添加,，由于谷氨酰胺容易降解，所以都是在使用前添加,。谷氨酰胺使用終濃度為0.002mol/L,。

一般配制為100倍濃縮液，配制時(shí)應(yīng)加溫至30℃,，*溶解后過濾除菌,，分裝至小瓶，儲存于-20℃,。

抗生素溶液:

常用的是青鏈霉素,，俗稱“雙抗溶液"。

青霉素主要對革蘭陽性菌有效,，鏈霉素主要對革蘭陰性菌有效,。加入這兩種抗生素可預(yù)防絕大多數(shù)細(xì)菌的污染。

青霉素使用的終濃度為100000U/L,，鏈霉素使用的終濃度為0.1g/L,。一般配制成100倍濃縮液，可用PBS或培養(yǎng)基配制,。