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細(xì)胞培養(yǎng)是細(xì)胞和分子生物學(xué)的主要工具之一,,提供研究細(xì)胞正常生理學(xué)和生物化學(xué)的優(yōu)秀模型系統(tǒng)(例如,,代謝研究,、衰老),、藥物和有毒化合物對細(xì)胞的影響,突變和致癌,。它還用于藥物篩選和開發(fā),,以及大規(guī)模生產(chǎn)生物化合物(如疫苗、治療性藥物)match蛋白質(zhì)),。在這些應(yīng)用中使用細(xì)胞培養(yǎng)的主要優(yōu)點是通過使用一批試驗獲得的結(jié)果的一致性和再現(xiàn)性克隆細(xì)胞,。
培養(yǎng)基是細(xì)胞培養(yǎng)最重要的組成部分,因為它為細(xì)胞生長提供必要的營養(yǎng),、生長因子和激素,,以及調(diào)節(jié)培養(yǎng)物的pH值和滲透壓。雖然最初的細(xì)胞培養(yǎng)實驗是使用從組織提取物和體液中獲得的天然培養(yǎng)基進(jìn)行的,,但是實驗的標(biāo)準(zhǔn)化,、培養(yǎng)基質(zhì)量穩(wěn)定和需求的增加導(dǎo)致了化學(xué)合成的培養(yǎng)基的發(fā)展。目前合成的培養(yǎng)基分為:基礎(chǔ)培養(yǎng)基,、還原血清培養(yǎng)基和無血清培養(yǎng)基,,它們的不同之處在于仍需要補(bǔ)充血清。血清是生長和粘附因子,、激素,、脂質(zhì)的重要來源。以及用于在基礎(chǔ)培養(yǎng)基中培養(yǎng)細(xì)胞的礦物質(zhì),。此外,,血清還調(diào)節(jié)細(xì)胞膜通透性,作為脂質(zhì),、酶,、微量營養(yǎng)素的載體,和微量元素進(jìn)入細(xì)胞,。在培養(yǎng)基中使用血清有許多優(yōu)點,;但是仍然有缺點不可避免包括成本高、標(biāo)準(zhǔn)化問題,、特殊性,、可變性以及刺激或抑制生長和/或細(xì)胞功能等有害影響,在某些細(xì)胞培養(yǎng)上,,如果血清來源不好,,則會造成污染也會對成功的細(xì)胞培養(yǎng)實驗造成嚴(yán)重威脅,。
在這低血清和無血清培養(yǎng)成為實驗得力助手之一,他們大大的減少了培養(yǎng)細(xì)胞的成本,。低血清培養(yǎng)基是目前很多實驗室通用的培養(yǎng)細(xì)胞的方法之一,。
其優(yōu)點在于:
缺點:
1. 增加了細(xì)胞培養(yǎng)基蛋白的檢測;
2. 不同的細(xì)胞生長需要的蛋白,,維生素,,礦物質(zhì)的含量和種類不同,增加了配制的難度
無血清培養(yǎng)基通過通過替代動物血清來避免使用動物血清的問題含適當(dāng)營養(yǎng)和激素配方的蛋白,。無血清培養(yǎng)基許多原代培養(yǎng)物和細(xì)胞系都有配方,,如配方不當(dāng)培養(yǎng)不合適的細(xì)胞,則細(xì)胞就會有營養(yǎng)不良的狀態(tài)發(fā)生,。
優(yōu)點
•更一致的性能
•更易于凈化和下游
•精確評估細(xì)胞功能
•提高生產(chǎn)力
•更好地控制細(xì)胞的新城代謝
缺點:
•成本高,;
•增強(qiáng)對細(xì)胞培養(yǎng)基的檢測
•不同的細(xì)胞所需的蛋白和氨基酸,維生素濃度和種類不一樣 ,,濃度過大或者添加不對會導(dǎo)致細(xì)胞變異或者活化,,增加了配制的難度。
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