聯(lián)系電話
上海北諾生物科技有限公司
中級(jí)會(huì)員·14年
- 聯(lián)系人：
- 周經(jīng)理 劉經(jīng)理
- 電話：
- 021-57730393
- 手機(jī)：
- 15800960770
- 傳真：
- 86-021-61496710
- 地址：
- 上海市徐匯區(qū)宜山路520號(hào)中華門大廈18樓D座
- 個(gè)性化：
- www.bnbiotech.com
- 網(wǎng)址：
- www.bnbiotech.com
掃一掃訪問手機(jī)商鋪
-
RNA實(shí)驗(yàn)技術(shù)：細(xì)胞質(zhì)RNA提取實(shí)驗(yàn)
標(biāo)簽：細(xì)胞質(zhì)RNA由于RNA的種類來源很多,，因而提取制備方法各異，一般有苯酚法，去污劑法和鹽酸胍法,，其中苯酚法實(shí)驗(yàn)室zui常用,。組織勻漿后用苯酚處理離心，RNA即溶于上層被酚飽和的水相中,，向水相加冷乙醇后,，RNA即以白色絮狀沉淀析出。此法較好除去DNA和蛋白質(zhì),，且獲得生物活性的RNA,。實(shí)驗(yàn)方法基本方案實(shí)驗(yàn)材料RNA試劑、試劑盒PBS細(xì)胞裂解液SDS蛋白酶K酚氯仿異戊醇無水乙醇儀器,、耗材離心機(jī)培養(yǎng)箱實(shí)驗(yàn)步驟1.對(duì)于單層培奍細(xì)胞（1）每10cm培養(yǎng)皿培養(yǎng)的細(xì)胞,，用冰冷PBS洗滌3次。（2）每次1ml -
RNA實(shí)驗(yàn)技術(shù)：Northern blot實(shí)驗(yàn)
標(biāo)簽：NorthernblotNorthernblot是一種通過檢測(cè)RNA的表達(dá)水平來檢測(cè)基因表達(dá)的方法,，通過northernblot的方法可以檢測(cè)到細(xì)胞在生長發(fā)育特定階段或者脅迫或病理環(huán)境下特定基因表達(dá)情況,。Northernblot首先通過電泳的方法將不同的RNA分子依據(jù)其分子量大小加以區(qū)分，然后通過與特定基因互補(bǔ)配對(duì)的探針雜交來檢測(cè)目的片段,。實(shí)驗(yàn)方法Northernblot技術(shù)NorthernBlot實(shí)驗(yàn)方法原理Northernblot的基本概述是將RNA樣品通過變性瓊脂糖凝膠電泳進(jìn)行分離,， -
RNA實(shí)驗(yàn)技術(shù)：RNA的變性瓊脂糖凝膠電泳實(shí)驗(yàn)原理,、材料和操作步驟
一,、實(shí)驗(yàn)?zāi)康膶W(xué)習(xí)RNA瓊脂糖凝膠電泳的使用技術(shù)。二,、實(shí)驗(yàn)原理RNA可以使用非變性或變性凝膠電泳進(jìn)行檢測(cè),。在非變性電泳中，可以分離混合物中不同分子量的RNA分子,，凡是無法確定分子量,。只有在變性情況下，RNA分子*伸展,，其泳動(dòng)率才與分子量成正比,。判斷RNA提取物的完整性是進(jìn)行電泳的主要目的之一。完整的未降解的RNA制品的電泳圖譜應(yīng)可清晰看到18srRNA,、28srRNA,、5srRNA的三條帶，且28srRNA的亮度應(yīng)為18srRNA的兩倍。三,、材料,、試劑及器具1、材料總RNA提取物,。2,、試劑（1）0 -
RNA實(shí)驗(yàn)技術(shù)：RNAi實(shí)驗(yàn)原理與方法選擇
一,、RNAi的分子機(jī)制通過生化和遺傳學(xué)研究表明,，RNA干擾包括起始階段和效應(yīng)階段（inititationａndeffectorsteps）。在起始階段,，加入的小分子RNA被切割為21-23核苷酸長的小分子干擾RNA片段（smallinterferingRNAs,siRNAs）,。證據(jù)表明；一個(gè)稱為Dicer的酶,，是RNaseIII家族中特異識(shí)別雙鏈RNA的一員,，它能以一種ATP依賴的方式逐步切割由外源導(dǎo)入或者由轉(zhuǎn)基因，病毒感染等各種方式引入的雙鏈RNA,，切割將RNA降解為19-21bp的雙鏈RNA -
RNA實(shí)驗(yàn)技術(shù)：RNA的瓊脂糖凝膠電泳實(shí)驗(yàn)原理和步驟
一,、實(shí)驗(yàn)?zāi)康恼莆罩参锟俁NA非變性膠電泳的原理和方法。二,、實(shí)驗(yàn)原理RNA電泳可以在變性及非變性兩種條件下進(jìn)行,。非變性電泳使用1.0%--1.4%的凝膠，不同的RNA條帶也能分開,，但無法判斷其分子量,。只有在*變性的條件下，RNA的泳動(dòng)率才與分子量的對(duì)數(shù)呈線性關(guān)系,。因此要測(cè)定RNA分子量時(shí),，一定要用變性凝膠。在需快速檢測(cè)所提總RNA樣品完整性時(shí),，配制普通的1%瓊脂糖凝膠即可,。三、實(shí)驗(yàn)材料,、器具及藥品蘑菇的總RNA溶液,。電泳儀，電泳槽,，電子天平,，移液器，槍頭,，微波爐,，紫外透射檢測(cè)儀等,。瓊脂糖，1XTA -
RNA實(shí)驗(yàn)技術(shù)：肝臟細(xì)胞RNA的提取
一．原理RNA提取技術(shù)不僅是分子生物學(xué)技術(shù)的重要組成部分,，也是功能基因組學(xué)科研技術(shù)的重要基礎(chǔ)。從RNA水平研究生物體內(nèi)基因的調(diào)控機(jī)制,，已成為分子生物學(xué)研究的一個(gè)重要手段,。對(duì)某一生物或組織進(jìn)行性狀研究，首先要獲得該性狀基因,，從組織細(xì)胞中分離完整的RNA對(duì)于分子克隆和基因表達(dá)分析等實(shí)驗(yàn)是至關(guān)重要的,，如Northern印跡及雜交分析、cDNA合成等實(shí)驗(yàn)的成效在很大程度上取決于RNA的質(zhì)量,。利用提取的RNA人們可以對(duì)特定的基因表達(dá)進(jìn)行定量的檢測(cè),，從分子水平的了解細(xì)胞生命活動(dòng)的規(guī)律。通常一個(gè)典型的哺乳動(dòng)物 -
RNA實(shí)驗(yàn)技術(shù)：RNAi表達(dá)載體構(gòu)建
近年來的研究表明,一些短片斷的雙鏈RNA可以通過促使特定基因的mRNA降解來,、特異的阻斷體內(nèi)特定基因表達(dá),誘使細(xì)胞表現(xiàn)出特定基因缺失的表型,稱為RNA干擾（RNAinterference,RNAi）.siRNA（smallinterferingRNAs）就是這種短片斷雙鏈RNA分子,能夠以序列同源互補(bǔ)的mRNA為靶目標(biāo),降解特定的mRNA.RNAi的發(fā)現(xiàn)具有劃時(shí)代的意義,它不僅深入揭示了細(xì)胞內(nèi)基因沉默的機(jī)制,而且它還是后基因組時(shí)代基因功能分析的有力工具,極大地促進(jìn)了人類揭示生命奧秘的進(jìn)程.現(xiàn)在越 -
RNA實(shí)驗(yàn)技術(shù)：總RNA的提取
完整RNA的提取和純化,，是進(jìn)行RNA方面的研究工作，如Nothern雜交,、mRNA分離,、RT-PCR、定量PCR,、cDNA合成及體外翻譯等的前提,。所有ＲＮＡ的提取過程中都有五個(gè)關(guān)鍵點(diǎn)，即１）：樣品細(xì)胞或組織的有效破碎,；２）,，有效地使核蛋白復(fù)合體變性；３）,，對(duì)內(nèi)源ＲＮＡ酶的有效抑制,；４）有效地將ＲＮＡ從ＤＮＡ和蛋白混合物中分離；5）,，對(duì)于多糖含量高的樣品還牽涉到多糖雜質(zhì)的有效除去,。但其中zui關(guān)鍵的是抑制ＲＮＡ酶活性。RNA的提取目前階段主要可采用兩種途徑,，1）,，提取總核酸，再用氯化鋰將RNA沉淀
