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中級(jí)會(huì)員 | 第5年

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血清系列
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細(xì)胞復(fù)蘇2023/1/11
簡(jiǎn)介細(xì)胞復(fù)蘇是將凍存在液氮中的細(xì)胞解凍之后重新培養(yǎng)，細(xì)胞恢復(fù)生長(zhǎng)的過(guò)程,。材料與儀器器材：37℃水浴箱,、離心機(jī),、無(wú)菌試管以及培養(yǎng)瓶,。試劑：①含20％血清RPMI1640培養(yǎng)液,；步驟細(xì)胞復(fù)蘇的基本過(guò)程可分...
混合淋巴細(xì)胞增殖2023/1/11
簡(jiǎn)介混合淋巴細(xì)胞增殖實(shí)驗(yàn)也稱混合淋巴細(xì)胞培養(yǎng)（MLC）或稱混合淋巴細(xì)胞反應(yīng)（MLR）,，常用于器-官-移-植前的組織配型,，以測(cè)定受體和供體主要組織相容性抗原（HLA抗原）相容的程度。材料與儀器器材：細(xì)胞...
小鼠胚胎成纖維細(xì)胞（MEF）原代培養(yǎng)2023/1/11
原理將小鼠的胚胎成纖維細(xì)胞（MEF）從機(jī)體中取出,，經(jīng)胰酶,、螯合劑（常用EDTA）處理，分散成單細(xì)胞,，置MEF生長(zhǎng)培養(yǎng)基中培養(yǎng),，使細(xì)胞得以生存、生長(zhǎng)和繁殖,。材料與儀器孕鼠PBSEDTA胰酶MEF生長(zhǎng)培養(yǎng)...
Nunc細(xì)胞工廠2023/1/11
原理用培養(yǎng)液制備細(xì)胞懸液,，將懸液注入單元的各小室內(nèi)。使長(zhǎng)邊朝下,，放置,。將單元旋轉(zhuǎn)90度，放平后用CO2充氣,。然后封閉,，進(jìn)行培養(yǎng)。材料與儀器單層細(xì)胞0.25%天然胰蛋白酶D-PBSA生長(zhǎng)培養(yǎng)液Nunc細(xì)...
EB 病毒轉(zhuǎn)化成淋巴細(xì)胞2023/1/11
材料與儀器全血刀豆凝集素ARPMI生長(zhǎng)培養(yǎng)基離心管步驟1.混合10ml全血和10mlRPMI生長(zhǎng)培養(yǎng)基,。生長(zhǎng)培養(yǎng)基（RPMI1640800ml,，F(xiàn)BS200ml，2mmol/L-谷氨酰胺,，5μg/ml...
細(xì)胞復(fù)蘇的小細(xì)節(jié)操作讓您的細(xì)胞嗨起來(lái)2023/1/10
假期太快結(jié)束,，又到了復(fù)蘇細(xì)胞開(kāi)始實(shí)驗(yàn)的環(huán)節(jié)了，以下是整理的一些復(fù)蘇細(xì)胞的注意事項(xiàng)：1.細(xì)胞儲(chǔ)存在液氮中,，溫度達(dá)-196℃,，理論上儲(chǔ)存時(shí)間是無(wú)限的。只要一直在液氮,，凍存沒(méi)有問(wèn)題,，那么復(fù)蘇也不會(huì)出現(xiàn)很大的...
3D 細(xì)胞培養(yǎng)具體操作2023/1/10
體外三維細(xì)胞建模和成像是候選分子毒性評(píng)估的一個(gè)有價(jià)值的早期步驟，3D細(xì)胞培養(yǎng)很大程度上可檢測(cè)臨床前藥物開(kāi)發(fā)工作流程,，包括在細(xì)胞,、組織,、器官和整個(gè)有機(jī)體的迭代更高生物水平上的毒性評(píng)估。在這些層次上建模和...
細(xì)胞活性測(cè)定方法大全2023/1/10
代謝增殖測(cè)定MTT檢測(cè)法活細(xì)胞線粒體中的琥珀酸脫氫酶,，能使額外添加的MTT還原為不溶于水的藍(lán)紫色結(jié)晶甲瓚（Formazan）,，并沉積在細(xì)胞中，死細(xì)胞則無(wú)此現(xiàn)象,。接著用二甲基亞砜（DMSO）溶解沉積在細(xì)...
血清沉淀知多少2023/1/10
血清沉淀是什么,？血清中經(jīng)常會(huì)出現(xiàn)肉眼可見(jiàn)的沉淀，其成分有多種類型,，產(chǎn)生的原因有很多,，主要有纖維蛋白、磷酸鈣還有一些其它成分,。1.纖維蛋白（Fibrin）血清中肉眼可見(jiàn)的沉淀物大多屬于這一類型,。由于在生...
T淋巴細(xì)胞轉(zhuǎn)化實(shí)驗(yàn)2023/1/10
原理T細(xì)胞在體外培養(yǎng)時(shí)，受到非特異性有絲分裂原（如PHA,、ConA）刺激后,，可出現(xiàn)細(xì)胞體積增大，代謝旺盛,，蛋白和核酸合成增加,即向淋巴母細(xì)胞轉(zhuǎn)化,。淋巴細(xì)胞轉(zhuǎn)化率的高低可以反映機(jī)體的細(xì)胞免疫水平，因此可...
消除微生物污染2023/1/6
原理通過(guò)沖洗單層培養(yǎng)物或通過(guò)離心重懸非貼壁細(xì)胞,，以高濃度抗生素清洗培養(yǎng)物數(shù)次,，然后將培養(yǎng)物傳代，用加抗生素的培養(yǎng)基傳三次,，再用不加抗生素的培養(yǎng)基傳三次,，每次傳代后都要檢測(cè)是否污染。材料與儀器DBSS高...
分離人臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞2023/1/6
材料與儀器D-PBSA胰蛋白酶EDTA人臍帶膠原蛋內(nèi)酶H冷的新生小牛血Hank平衡鹽溶液HBSSPSG70%乙醇HUVRC生長(zhǎng)培養(yǎng)液培養(yǎng)瓶手術(shù)刀和22號(hào)刀片手術(shù)針20ml注射器鱷魚夾動(dòng)脈夾尖頭剪棉紙鋁...
小鼠胚胎MEF細(xì)胞的提取2023/1/6
小鼠胚胎MEF細(xì)胞的提取步驟：1.將新鮮收獲的胚胎放入10厘米的細(xì)胞培養(yǎng)皿中2.用PBSA覆蓋胚胎,，取出胎盤和其他母體組織3.切掉頭頂（眼睛及以上）,，取出內(nèi)臟4.保存頭部/卵黃囊進(jìn)行DNA分離以進(jìn)行基...
從哺乳動(dòng)物細(xì)胞中制備核和細(xì)胞質(zhì)提取物2023/1/6
材料與儀器轉(zhuǎn)瓶或單層培養(yǎng)的哺乳動(dòng)物細(xì)胞（如HeLa細(xì)胞）PBS低滲緩沖液高鹽緩沖液含1.2molLKCl透析緩沖液液氮貝克曼JS4.2轉(zhuǎn)子或相當(dāng)?shù)霓D(zhuǎn)子50mL圓錐形刻度聚丙烯離心管（對(duì)較小體積的提取物...
單層細(xì)胞在細(xì)胞瓶中的接種2023/1/6
原理單層生長(zhǎng)的細(xì)胞增殖，融合成片,，并長(zhǎng)滿細(xì)胞瓶表面,。有些細(xì)胞靠頻繁地?fù)Q液可維持細(xì)胞在平臺(tái)期數(shù)天至數(shù)周；而許多其他細(xì)胞系需要胰蛋白酶處理,、傳代培養(yǎng)后才能存活下來(lái),，用胰蛋酶處理可將細(xì)胞從生長(zhǎng)物表面分離下來(lái)...
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