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分離人臍靜脈內(nèi)皮細胞2023/1/6
材料與儀器D-PBSA胰蛋白酶EDTA人臍帶膠原蛋內(nèi)酶H冷的新生小牛血Hank平衡鹽溶液HBSSPSG70%乙醇HUVRC生長培養(yǎng)液培養(yǎng)瓶手術(shù)刀和22號刀片手術(shù)針20ml注射器鱷魚夾動脈夾尖頭剪棉紙鋁...
小鼠胚胎MEF細胞的提取2023/1/6
小鼠胚胎MEF細胞的提取步驟:1.將新鮮收獲的胚胎放入10厘米的細胞培養(yǎng)皿中2.用PBSA覆蓋胚胎,,取出胎盤和其他母體組織3.切掉頭頂(眼睛及以上),取出內(nèi)臟4.保存頭部/卵黃囊進行DNA分離以進行基...
從哺乳動物細胞中制備核和細胞質(zhì)提取物2023/1/6
材料與儀器轉(zhuǎn)瓶或單層培養(yǎng)的哺乳動物細胞(如HeLa細胞)PBS低滲緩沖液高鹽緩沖液含1.2molLKCl透析緩沖液液氮貝克曼JS4.2轉(zhuǎn)子或相當?shù)霓D(zhuǎn)子50mL圓錐形刻度聚丙烯離心管(對較小體積的提取物...
單層細胞在細胞瓶中的接種2023/1/6
原理單層生長的細胞增殖,,融合成片,,并長滿細胞瓶表面。有些細胞靠頻繁地換液可維持細胞在平臺期數(shù)天至數(shù)周,;而許多其他細胞系需要胰蛋白酶處理,、傳代培養(yǎng)后才能存活下來,用胰蛋酶處理可將細胞從生長物表面分離下來...
細胞凍存實驗2023/1/5
原理傳統(tǒng)上的細胞凍存(甘油/二甲基亞砜做保護劑)講求的是:慢凍速溶,。細胞凍存時向培養(yǎng)基中加入的甘油或二甲基亞砜(DMSO),,這兩種物質(zhì)能提高細胞膜對水的通透性,加上緩慢冷凍可使細胞內(nèi)的水分滲出細胞外,,...
免疫熒光抗體法2023/1/5
原理用人結(jié)腸癌細胞為免疫原,,免疫小鼠,制得鼠抗人結(jié)腸癌細胞表面抗原(Ag)的單克隆抗體IgG(第一抗體),,二者可以發(fā)生特異性的抗原抗體反應(yīng),,形成抗原抗體復(fù)合物,再加入市售(也可自制)的熒光標記的羊抗鼠...
神經(jīng)膠質(zhì)細胞培養(yǎng)實驗2023/1/5
材料與儀器大鼠CMF-Hanks液胰蛋白酶DMEMF12水浴鍋培養(yǎng)箱步驟一,、原代培養(yǎng)1.選用生后1周的新生大白鼠,,用碘酒,酒精棉球消毒,斷頭取其大腦皮層組織,。2.解剖顯微鏡下,,剝離腦膜,切除大腦髓質(zhì)部...
小鼠肝細胞培養(yǎng)實驗2023/1/5
原理直接從生物體內(nèi)獲取組織細胞進行的首-次培養(yǎng)稱為原代細胞培養(yǎng),。原代培養(yǎng)是建立各種細胞系的第一步,,是從事培養(yǎng)工作的人員應(yīng)熟悉和掌握的最基本的技術(shù)。根據(jù)培養(yǎng)方法不同分為組織塊培養(yǎng)法和單層細胞培養(yǎng)法。材料...
斑馬魚胚胎細胞的培養(yǎng)2023/1/5
原理收集胚胎,,除去絨毛膜,,用胰蛋白酶分散胚胎細胞,然后在胚胎成纖維細胞飼養(yǎng)層上培養(yǎng)從斑馬魚囊胚和原腸期胚獲得的原代細胞,。材料與儀器鏈酶蛋白酶E用D-PBSA配制1%胰蛋白酶和1mmolLEDTA胚胎成...
原代細胞怎么永生化2023/1/4
原代細胞都無法擴增幾輪增殖,,這被稱為Hayflick極限,因為每一輪的增殖都會縮短端粒,。當端粒達到臨界縮短長度時,,DNA損傷被觸發(fā),導(dǎo)致細胞衰老,,如果你試圖培養(yǎng)一個珍-稀原代細胞群,,當心它最終會死亡,...
內(nèi)皮細胞實驗的新秀來啦2023/1/4
內(nèi)皮細胞實驗的新秀來啦,,HECV人臍靜脈內(nèi)皮細胞來啦,,HECV細胞是不-可-多得的永生化內(nèi)皮細胞株,代次靠前,,一周可以傳4-5次,8-12小時可達到5倍增,,遠遠超于HMEC-1細胞株和HUVEC-T1...
收到活細胞怎么處理?2023/1/4
收到細胞后,,發(fā)現(xiàn)是培養(yǎng)瓶,,第一次操作的束手無策,怎么辦,?首先我們得弄明白我們得細胞是貼壁細胞還是懸浮細胞或者是半懸浮細胞,不明白的同學(xué)可以參考下圖哦:貼壁細胞:SKOV3懸浮細胞:THP-1半懸浮半貼...
怎么使用GSIS方法檢測細胞胰島素分泌2023/1/4
Min6細胞是這次贈送活動中很多客戶選擇的細胞,,一共送出去有50多株,隨之而來的就是問胰島素的檢測,,很多客戶檢測出來只有低表達,。Min6細胞培養(yǎng)需要注意三點:1.細胞易聚團,消化的時間表面上看會非常短...
小鼠MSC細胞的提取操作2023/1/4
MMSC細胞一般采用,,長骨解剖和骨髓分離程序,,總體目標是快速、系統(tǒng)地取出長骨,,并收集骨髓細胞進行進一步的實驗分析,。這種方法有助于回答有關(guān)骨髓生物學(xué)、腫瘤轉(zhuǎn)移和免疫學(xué)的關(guān)鍵問題,。這項技術(shù)的主要優(yōu)點是解剖...
毒王蝙蝠是怎么作為病毒宿主的?2023/1/3
以及目前流行的2019冠狀病毒病。值得注意的是,,所有這些暴發(fā)都與蝙蝠傳播的病毒有關(guān),。蝙蝠是會飛的哺乳動物,它還有一些哺乳動物*的額外特征,,比如相對于體型而言,,較長的壽命,較低的腫瘤發(fā)生率,,以及在宿主病...

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