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細(xì)胞中液泡系活體染色

時間:2023/1/12閱讀:1943
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簡介

細(xì)胞中液泡系活體染色實驗是利用中性紅(neutrol red)是液泡系的專一性活體染色劑的特性,,在細(xì)胞處于生活狀態(tài)時,只將液泡系染成紅色,,細(xì)胞質(zhì)和細(xì)胞核不被染色,。

原理

細(xì)胞中液泡系活體染色實驗的基本原理是動物細(xì)胞內(nèi)由單層膜包裹的小泡都屬于液泡系,包括高爾基復(fù)合體,、溶酶體,、內(nèi)質(zhì)網(wǎng),、轉(zhuǎn)運泡、吞噬泡等,。軟骨細(xì)胞內(nèi)含有較多的粗面內(nèi)質(zhì)網(wǎng)和發(fā)達(dá)的高爾基復(fù)合體,,能合成與分泌軟骨黏蛋白及膠原纖維等,因而液泡系發(fā)達(dá),。中性紅(neutrol red)是液泡系的專一性活體染色劑,,在細(xì)胞處于生活狀態(tài)時,只將液泡系染成紅色,,細(xì)胞質(zhì)和細(xì)胞核不被染色,。

材料與儀器

器材:
解剖器材、蠟盤,、載玻片,、蓋片、吸管,、吸水濾紙,、普通光學(xué)顯微鏡、蟾蜍,。
試劑:

① 1/3000 中性紅;

② 0.65% Ringer 液(兩棲動物用)(氯化鈉,,0.65 g;氯-化-鉀,,0.042 g,;氯化鈣,0.025 g,;蒸餾水,,100 ml。)

步驟

細(xì)胞中液泡系活體染色實驗的基本過程可分為如下幾步:
A 取蟾蜍 1 只,,搗毀脊髓法處死,,將其腹面朝上固定于蠟盤上,剪開腹腔,,取胸骨劍突軟骨最薄部分的一小片,,置于載片上。
B 滴加 1/3000 中性紅,,染色 15 min,。
C 濾紙吸去染液。
D 滴加 0.65% Ringer 液,,蓋上蓋片,,用濾紙從蓋片側(cè)面吸取多余液體。
E 鏡下觀察,。

注意事項

1 為便于觀察,,在取胸骨劍突時,盡量取較薄部位,。

2 本實驗因是活體染色,,在實驗的整個過程中,應(yīng)注意保持標(biāo)本的活體狀態(tài),,特別在取材時應(yīng)做到準(zhǔn)確,、快速。


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