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血清系列
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細(xì)胞因子分子
生物樣本庫
蛋白研究系列
從有限的細(xì)胞中提取 RNA2023/4/21
材料與儀器LCM帽子乙醇糖原RNA提取試劑盒超純水移液器步驟一,、材料1.緩沖液,、試劑和溶液75%乙醇(超純水配制）糖原,，5mg/ml(Ambion,，Austin,，TX)StratageneRNA提取試...
細(xì)胞融合的方法及誘導(dǎo)物2023/4/19
同種細(xì)胞在培養(yǎng)時2個靠在一起的細(xì)胞自發(fā)合并,，稱自發(fā)融合;異種間的細(xì)胞必須經(jīng)誘導(dǎo)劑處理才能融合，稱誘發(fā)融合,。仙臺病毒法融合①兩種細(xì)胞在一起培養(yǎng),，加入病毒，在4℃條件下病毒附著在細(xì)胞膜上,。并使兩細(xì)胞相互凝...
大腸桿菌質(zhì)粒DNA的提取2023/4/19
實(shí)驗(yàn)方法原理堿法提取主要是利用共價閉合環(huán)狀質(zhì)粒與線性染色質(zhì)在拓?fù)鋵W(xué)上的差異來分離它們,。在堿性pH環(huán)境，DNA變性,，當(dāng)恢復(fù)中性并在高鹽離子濃度時,，絕大多數(shù)質(zhì)粒DNA可以準(zhǔn)確復(fù)性，留在上清中,；而線性染色體...
蛋白酶活性檢測方法2023/4/19
1定義1g固體酶粉(或1mL液體酶),，在一定溫度和PH值條件下，1min水解酪素產(chǎn)生1ug酪氨酸為一個酶活力單位,，以(u/mL)表示,。2福林法(第一法)2、1原理蛋白酶在一琿的溫度與PH條件下,，水解底...
植物蛋白質(zhì)組學(xué)和糖基化2023/4/19
1.前言與其他真核細(xì)胞一樣,，植物細(xì)胞中，糖基化通常發(fā)生在分泌蛋白質(zhì)上,，雖然在細(xì)胞質(zhì)蛋白和核蛋白上也發(fā)現(xiàn)一些糖基化反應(yīng),。根據(jù)寡糖部分和蛋白質(zhì)骨架之間的連接方式，可將糖基化分為兩種類型：N-糖基化和O-糖...
標(biāo)記抗體的應(yīng)用技術(shù)2023/4/12
原理ELISA是以免疫學(xué)反應(yīng)為基礎(chǔ),，將抗原,、牽9體的特異性反應(yīng)與酶對底物的高效催化作用相結(jié)合起來的一種敏感性很高的試驗(yàn)技術(shù)。由于抗原,、抗體的反應(yīng)在一種固相載體──聚苯乙烯微量滴定板的孔中進(jìn)行,，每加入一...
B 淋巴細(xì)胞膜表面免疫球蛋白的檢查2023/4/12
原理SmIg是B細(xì)胞的抗原識別受體，也是B細(xì)胞特異的表面標(biāo)志,，用直接免疫熒光法可檢查出SmIg。用熒光素標(biāo)記的抗Ig抗體,，在一定條件下與淋巴細(xì)胞混合,，熒光素標(biāo)記的抗Ig抗體可以與B細(xì)胞表面的Ig結(jié)合，...
兔多克隆抗血清的制備2023/4/12
材料與儀器抗原PBS乙醇注射針頭注射器培養(yǎng)箱步驟1.取2ml的弗氏完-全佐劑加到2ml的溶于PBS的純化抗原中,，使之乳化,。用3ml注射器抽取此乳化液,，接上22G注射針頭，排出注射器中的氣泡,。2.將兔子...
怎么培養(yǎng)好你的細(xì)胞2023/4/11
細(xì)胞培養(yǎng)是細(xì)胞和分子生物學(xué)的主要工具之一,，提供研究細(xì)胞正常生理學(xué)和生物化學(xué)的優(yōu)秀模型系統(tǒng)（例如，代謝研究,、衰老）,、藥物和有毒化合物對細(xì)胞的影響，突變和致癌,。它還用于藥物篩選和開發(fā),，以及大規(guī)模生產(chǎn)生物化...
大鼠胰腺移植模型制作2023/4/11
原理成功的胰腺移植能為糖尿病患者或試驗(yàn)對象提供具有正常功能的胰腺組織，能生理性調(diào)節(jié)胰島素的分泌,，維持正常血糖,，阻止甚至逆轉(zhuǎn)糖尿病并發(fā)癥的發(fā)生、進(jìn)展,。目前建立的模型多是供胰的靜脈回流采用供體門靜脈與受體...
免疫組織化染色2023/4/10
材料與儀器新鮮組織二甲苯酒精H2O2抗原修復(fù)液枸櫞酸鈉緩沖液石蠟福爾馬林PBSDAB蘇木素樹膠丙酮打孔液檸檬酸鈉APES恒溫?fù)u床高壓鍋塑料切片架耐溫玻璃容器-80℃冰箱恒冷冰凍切片機(jī)載玻片步驟一．石蠟...
小鼠灌胃具體操作2023/4/7
小鼠灌胃方法比較簡單,，需要關(guān)注的只有兩點(diǎn)：一是要保持小鼠的頭部和頸部成一直線，方便灌胃針頭進(jìn)入,，二是動作要輕柔,，從口角進(jìn)入，防止損失食道,。做的多了自然就熟練了,。具體操作過程如下：1.準(zhǔn)備灌胃針頭。一般...
MAPK/ERK信號通路圖及簡介2023/4/7
MAPK,絲裂原活化蛋白激酶(mitogen-activatedproteinkinases,，MAPKs)是細(xì)胞內(nèi)的一類絲氨酸/蘇氨酸蛋白激酶,。研究證實(shí)，MAPKs信號轉(zhuǎn)導(dǎo)通路存在于大多數(shù)細(xì)胞內(nèi),，在將...
怎么處理植物組織培養(yǎng)過程中出現(xiàn)的各種污染2023/4/7
1.培養(yǎng)基的配制注意事項(xiàng)植物組織培養(yǎng)經(jīng)常用到MS培養(yǎng)基,，包含十幾種化合物。因?yàn)橛行┗衔锵嘤鰰l(fā)生化學(xué)反應(yīng)產(chǎn)生沉淀,，影響培養(yǎng)基的營養(yǎng)成分,，準(zhǔn)備MS培養(yǎng)基需要配制多種高倍母液。且配制母液時,，尤其涉及大量...
新生大鼠心臟細(xì)胞的分離和培養(yǎng)實(shí)驗(yàn)2023/4/7
材料與儀器SpragueDawley幼鼠胰酶液乙醇攪拌臺燒杯步驟組織消化和分離細(xì)胞1.在細(xì)胞操作間內(nèi),，放一個加熱攪拌臺，上放一個裝有100ml滅菌水的容量600ml的燒杯,，加熱至37℃,。2.準(zhǔn)備胰酶液...
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