同種細(xì)胞在培養(yǎng)時2個靠在一起的細(xì)胞自發(fā)合并,，稱自發(fā)融合;異種間的細(xì)胞必須經(jīng)誘導(dǎo)劑處理才能融合,，稱誘發(fā)融合,。

仙臺病毒法融合

①兩種細(xì)胞在一起培養(yǎng),，加入病毒,，在4℃條件下病毒附著在細(xì)胞膜上,。并使兩細(xì)胞相互凝聚;

②在37℃中,，病毒與細(xì)胞膜 發(fā)生反應(yīng)，細(xì)胞膜受到破環(huán),，此時需要Ca2+和Mg2+,，最適PH為8.0一8.2;

②細(xì)胞膜連接部穿通，周邊連接部修復(fù),，此時需Ca2+和ATP;

④融合成巨大細(xì)胞,，仍需ATP 。

聚乙二醇(PEG)法

聚乙二醇(PEG)結(jié)構(gòu)為：HOH2C(CH20CH2)nCH2OH,，分子 量大于200小于6000者均可用作細(xì)胞融合劑,。PEG經(jīng)高壓滅菌后，與溫?zé)岬腅ngle氏液混合,。通常用分子 量低于1000的PEG作融合劑最好,，50%PEG溶液能產(chǎn)生最多雜交細(xì)胞。PEG溶液在pH6.0時細(xì)胞融合率最高,。

電融合法

在直流電脈沖的誘導(dǎo)下,，細(xì)胞膜表面的氧化還原電位發(fā)生改變，使異種細(xì)胞粘合并發(fā)生質(zhì)膜瞬間破裂,，進(jìn)而質(zhì)膜開始連接,，直到閉和成完整的膜，形成融合體,。

優(yōu)點：融合率高,、重復(fù)性強、對細(xì)胞傷害小;

裝置精巧,、方法簡單,、可在顯微鏡下觀察或錄像觀察融合過程;

免去PEG誘導(dǎo)后的洗滌過程,、誘導(dǎo)過程可控性強。

融合誘導(dǎo)物

細(xì)胞融合的誘導(dǎo)物種類很多.常用的主要有生物法用滅活的仙臺病毒(Sendai virus),，化學(xué)法如用聚乙二醇(Polyethyleneglycol,，PEG)和物理法如電脈沖。目前應(yīng)用比較廣泛的是聚乙二醇,，因為它易得,、簡便，且融合效果穩(wěn)定,。PEG的促融機制尚不全部清楚,，它可能引起細(xì)胞膜中磷脂的酰鍵及極性基團發(fā)生結(jié)構(gòu)重排。動植物 細(xì)胞融合方法不同,，生物法利用滅活仙臺病毒是動物細(xì)胞融合所*的,。

自發(fā)條件下或人工誘導(dǎo)下, 兩個不同基因型的細(xì)胞或原生質(zhì)體融合形成一個雜的細(xì)胞?；具^程包括細(xì)胞融合導(dǎo)致異核體(heterokaryon)的形成, 異核體通過細(xì)胞有絲分裂導(dǎo)致核的融合, 形成單核的雜的細(xì)胞,。有性生殖時發(fā)生正常的細(xì)胞融合, 即由兩個配子融合成一個合子。

細(xì)胞融合不僅可用于基礎(chǔ)研究,，而且還有重要的應(yīng)用價值,，在植物育種方面已經(jīng)成功的有蘿卜+甘藍(lán)、粉藍(lán)煙草+郎氏煙草,、番茄+馬鈴薯等等,。細(xì)胞融合另一個重要應(yīng)用就是制備單克隆抗體，單克隆抗體可以用作診斷試劑,，治療疾病和運載藥物,，具有準(zhǔn)確，高效,，簡易，快速等優(yōu)點,。

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