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PCR 產(chǎn)物純化2023/4/21
材料與儀器TE或去離子水PCR產(chǎn)物離心機(jī)和轉(zhuǎn)子PCR濾件微量離心管步驟一,、材料1.緩沖液和溶液TE(lOmmol/LTris-HCl,，lmmol/LEDTA,，pH7.5)或去離子水2.核酸和寡核苷酸待...
DNA 污染的柱上去除2023/4/21
材料與儀器DNA酶I緩沖液DNA酶I細(xì)胞裂解液步驟一,、材料1.酶和酶緩沖液DNA酶I,，擴(kuò)增級（無RNA酶）DNA酶I緩沖液,，10X2.細(xì)胞和組織利用總RNA純化試劑盒（例如Madigen總RNA快速純...
冷凍組織及切片的準(zhǔn)備2023/4/21
材料與儀器1,、新鮮的組織2,、丙酮蒸餾水干冰磷酸鹽緩沖液（PBS)TekOCT組織復(fù)合物3,、封閉容器燒杯恒冷裝置解剖工具平盤組織模子載玻片刀片步驟一、材料1.緩沖液,、溶液和試劑丙酮蒸餾水干冰磷酸鹽緩沖液...
單鏈 cDNA 的合成2023/4/21
材料與儀器步驟一,、材料1.緩沖液、溶液和試劑去除RNA酶的雙蒸水10XRT-PCR緩沖液（去除RNA酶的雙蒸水,，100mmol/LTris-HCl,、pH8.3，500mmol/LKC1,15mmol/...
從有限的細(xì)胞中提取 RNA2023/4/21
材料與儀器LCM帽子乙醇糖原RNA提取試劑盒超純水移液器步驟一,、材料1.緩沖液,、試劑和溶液75%乙醇(超純水配制）糖原，5mg/ml(Ambion,，Austin,，TX)StratageneRNA提取試...
細(xì)胞融合的方法及誘導(dǎo)物2023/4/19
同種細(xì)胞在培養(yǎng)時2個靠在一起的細(xì)胞自發(fā)合并，稱自發(fā)融合;異種間的細(xì)胞必須經(jīng)誘導(dǎo)劑處理才能融合,，稱誘發(fā)融合,。仙臺病毒法融合①兩種細(xì)胞在一起培養(yǎng)，加入病毒,，在4℃條件下病毒附著在細(xì)胞膜上,。并使兩細(xì)胞相互凝...
大腸桿菌質(zhì)粒DNA的提取2023/4/19
實驗方法原理堿法提取主要是利用共價閉合環(huán)狀質(zhì)粒與線性染色質(zhì)在拓?fù)鋵W(xué)上的差異來分離它們。在堿性pH環(huán)境,，DNA變性,，當(dāng)恢復(fù)中性并在高鹽離子濃度時，絕大多數(shù)質(zhì)粒DNA可以準(zhǔn)確復(fù)性,，留在上清中,；而線性染色體...
蛋白酶活性檢測方法2023/4/19
1定義1g固體酶粉(或1mL液體酶)，在一定溫度和PH值條件下,，1min水解酪素產(chǎn)生1ug酪氨酸為一個酶活力單位,，以(u/mL)表示。2福林法(第一法)2,、1原理蛋白酶在一琿的溫度與PH條件下,，水解底...
植物蛋白質(zhì)組學(xué)和糖基化2023/4/19
1.前言與其他真核細(xì)胞一樣，植物細(xì)胞中,，糖基化通常發(fā)生在分泌蛋白質(zhì)上,，雖然在細(xì)胞質(zhì)蛋白和核蛋白上也發(fā)現(xiàn)一些糖基化反應(yīng)。根據(jù)寡糖部分和蛋白質(zhì)骨架之間的連接方式,，可將糖基化分為兩種類型：N-糖基化和O-糖...
標(biāo)記抗體的應(yīng)用技術(shù)2023/4/12
原理ELISA是以免疫學(xué)反應(yīng)為基礎(chǔ),，將抗原、牽9體的特異性反應(yīng)與酶對底物的高效催化作用相結(jié)合起來的一種敏感性很高的試驗技術(shù)。由于抗原,、抗體的反應(yīng)在一種固相載體──聚苯乙烯微量滴定板的孔中進(jìn)行,，每加入一...
B 淋巴細(xì)胞膜表面免疫球蛋白的檢查2023/4/12
原理SmIg是B細(xì)胞的抗原識別受體，也是B細(xì)胞特異的表面標(biāo)志,，用直接免疫熒光法可檢查出SmIg,。用熒光素標(biāo)記的抗Ig抗體，在一定條件下與淋巴細(xì)胞混合,，熒光素標(biāo)記的抗Ig抗體可以與B細(xì)胞表面的Ig結(jié)合,，...
兔多克隆抗血清的制備2023/4/12
材料與儀器抗原PBS乙醇注射針頭注射器培養(yǎng)箱步驟1.取2ml的弗氏完-全佐劑加到2ml的溶于PBS的純化抗原中，使之乳化,。用3ml注射器抽取此乳化液,，接上22G注射針頭，排出注射器中的氣泡,。2.將兔子...
怎么培養(yǎng)好你的細(xì)胞2023/4/11
細(xì)胞培養(yǎng)是細(xì)胞和分子生物學(xué)的主要工具之一,，提供研究細(xì)胞正常生理學(xué)和生物化學(xué)的優(yōu)秀模型系統(tǒng)（例如，代謝研究,、衰老）、藥物和有毒化合物對細(xì)胞的影響,，突變和致癌,。它還用于藥物篩選和開發(fā)，以及大規(guī)模生產(chǎn)生物化...
大鼠胰腺移植模型制作2023/4/11
原理成功的胰腺移植能為糖尿病患者或試驗對象提供具有正常功能的胰腺組織,，能生理性調(diào)節(jié)胰島素的分泌,，維持正常血糖，阻止甚至逆轉(zhuǎn)糖尿病并發(fā)癥的發(fā)生,、進(jìn)展,。目前建立的模型多是供胰的靜脈回流采用供體門靜脈與受體...
免疫組織化染色2023/4/10
材料與儀器新鮮組織二甲苯酒精H2O2抗原修復(fù)液枸櫞酸鈉緩沖液石蠟福爾馬林PBSDAB蘇木素樹膠丙酮打孔液檸檬酸鈉APES恒溫?fù)u床高壓鍋塑料切片架耐溫玻璃容器-80℃冰箱恒冷冰凍切片機(jī)載玻片步驟一．石蠟...
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