1. 仔細(xì)收集污染培養(yǎng)液,，如有可能，應(yīng)測試該有機(jī)體對一系列抗生素的敏感性,，如果做不到,，則應(yīng)對培養(yǎng)液進(jìn)行高壓滅菌或加入次氯酸鹽。

2. 用 DBSS 沖洗細(xì)胞（每一次沖洗可使污染物濃度減少兩個(gè)對數(shù)級,，除非污染物黏貼在細(xì)胞上）,。

(a)對于單層培養(yǎng)物，用 DBSS 沖洗培養(yǎng)物三次,，然后用胰蛋白酶處理,，再用 DBSS 通過離心與再懸浮清洗細(xì)胞兩次以上。

(b)對于懸浮培養(yǎng)物,，通過離心和重懸,，用 DBSS 沖洗培養(yǎng)物 5 次。

3. 將細(xì)胞以盡可能低而又合適的細(xì)胞濃度接種于新的培養(yǎng)瓶內(nèi),。

4. 加入含高濃度抗生素的培養(yǎng)基,，每兩天換一次。

5. 用高濃度抗生素培養(yǎng)基進(jìn)行傳代培養(yǎng),。

6. 重復(fù)進(jìn)行 1~4 的步驟,，傳代培養(yǎng)三次。

7. 移去抗生素,，在無抗生素情況下,，將這些細(xì)胞再進(jìn)行三次傳代培養(yǎng)。

8. 用相差顯微鏡及 Hoechst 染色檢査培養(yǎng)物,。

9. 對這些細(xì)胞再進(jìn)行兩個(gè)月的培養(yǎng),，不加抗生素，檢査以確定所有污染已被消除,。

常見問題

一般的原則是應(yīng)將污染的培養(yǎng)物丟棄,，而不要試圖去除污染，除非是至關(guān)重要必須保留的細(xì)胞系才考慮去除污染,。在任何情況下,，很難做到完-全消除污染,。特別是在酵母污染時(shí),，如果試圖去除污染,，可能導(dǎo)致產(chǎn)生更頑固的對抗抗生素的細(xì)胞。

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