血清沉淀是什么,？

血清中經(jīng)常會出現(xiàn)肉眼可見的沉淀，其成分有多種類型，產(chǎn)生的原因有很多,，主要有纖維蛋白、磷酸鈣還有一些其它成分,。

1. 纖維蛋白（Fibrin）

血清中肉眼可見的沉淀物大多屬于這一類型,。由于在生產(chǎn)過程中，血清采集,、過濾（3 次 0.1 μm過濾）和灌裝處理都是在低溫條件下快速完成, 此時血清中纖維蛋白原（Fibrinogen）處于溶解狀態(tài),。但在解凍之后, 血清中纖維蛋白原往往會發(fā)生凝集，形成肉眼可見的沉淀,。

2. 磷酸鈣（Calcium Phosphate）

這是一種常見的沉淀成分,，通常會造成血清出現(xiàn)云霧狀渾濁。當產(chǎn)品在 37℃保存時,，這種現(xiàn)象尤其明顯,，在倒置顯微鏡下可觀察到小黑點的存在。這些小黑點在布朗運動的作用下四處游動,，常被誤認為是微生物污染,。

3. 其他成分（Other） 

血清中的其他成分也會形成沉淀，例如膽固醇形成的油脂滴和其他蛋白沉淀等,。

血清沉淀會影響細胞培養(yǎng)嗎,？

1. 細胞生長

我們在出廠前都會對血清進行一系列質(zhì)檢測試，確保血清質(zhì)量達到嚴格標準,。血清測試和細胞培養(yǎng)經(jīng)驗也表明,，其沉淀成分不會影響血清作為細胞培養(yǎng)添加物的表現(xiàn)。這一點得到了眾多客戶和其他血清供應商的肯定,。解凍之后, 血清中纖維蛋白原往往會發(fā)生凝集,，形成肉眼可見的沉淀,。

2. 懷疑污染

磷酸鈣顆粒經(jīng)常會被當成微生物污染而引發(fā)不必要的擔憂。一般情況下,，當操作人員融化血清后注意到有霧狀渾濁時,，常將其存放在 4℃冰箱中觀察，并考慮接下來是否繼續(xù)使用,。但這樣會使沉淀進一步增多,，反而會使血清更加渾濁，進而誤以為存在血清污染,。并且,，在倒置顯微鏡下，可在血清中觀察到四處游動的小黑點（磷酸鈣顆粒的布朗運動）,，更容易使人誤以為存在微生物污染,。

為防止這類誤解的產(chǎn)生，我們不建議客戶培養(yǎng)血清來驗證是否存在污染,，而是將血清直接接種在細菌培養(yǎng)基上進行培養(yǎng),，以觀察是否有細菌的增殖。并且,，進行革蘭氏染色,，并在油鏡（100 X 10 倍）下觀察可直接確認是否存在微生物污染。

怎樣操作可以盡量避免沉淀出現(xiàn),？

1. 正確解凍

首先,，應按照逐步解凍的方式正確解凍血清：從-20℃取出后，置于 4℃冰箱緩慢解凍,，最后置于室溫完成解凍。如果直接從-20℃拿到室溫或 37 ℃水浴解凍,，則非常容易產(chǎn)生沉淀,。在解凍過程中，請注意時不時緩慢搖晃瓶子,，減少沉淀的產(chǎn)生,。為避免反復凍融，建議您將血清分裝使用,。

2. 使用和保存注意事項

血清沉淀很難預測和避免,，出現(xiàn)沉淀后也無需擔憂，這并不會影響血清的品質(zhì),。已知血清沉淀在以下條件下會有增多的可能：

1) 熱滅活,；

2) 37℃培養(yǎng)；

3) 反復凍融,；

4) 伽馬射線照射,； 

5) 2-8℃長期保存,； 

6) 長期保存于可自動化霜的冰箱中（溫度不穩(wěn)定）。

血清沉淀的形成機理多種多樣,，具體的機理尚不十分明確,。我們尚不能準確預測和控制血清沉淀的產(chǎn)生。目前市面上所有品牌的血清產(chǎn)品都存在沉淀現(xiàn)象,，這一點可以在各品牌網(wǎng)站上關(guān)于沉淀問題的聲明上得到證實,。

出現(xiàn)血清沉淀該如何處理？

若想去除沉淀,，我們建議您采用2000 rpm 離心5分鐘,，或用0.45 μm的過濾器去除沉淀。

總結(jié)：

血清產(chǎn)品中出現(xiàn)沉淀于常見現(xiàn)象,，無需過多擔心,，并且不會響血清的品質(zhì)，對細胞培養(yǎng)而言也是沒有任何問題的,，大家可以放心使用,。

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