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細(xì)胞培養(yǎng)過(guò)程中添加劑起到的作用2017/7/13
腫瘤細(xì)胞能量來(lái)源：谷氨酰胺L－谷氨酰胺是一種氨基酸,，細(xì)胞的重要能量來(lái)源,、參與蛋白質(zhì)的合成和核酸代謝。同時(shí)L-谷氨酰胺不穩(wěn)定,，在中性的水溶液中會(huì)自發(fā)降解,；降解產(chǎn)物對(duì)細(xì)胞有毒性（對(duì)干細(xì)胞，原代細(xì)胞影響尤其...
細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)注意事項(xiàng)2017/7/11
1.原代細(xì)胞實(shí)驗(yàn)進(jìn)行前,，無(wú)菌室及無(wú)菌操作臺(tái)(laminarflow)以紫外燈照射30-60分鐘滅菌,，以70%ethanol擦拭無(wú)菌操作抬面，并開啟無(wú)菌操作臺(tái)風(fēng)扇運(yùn)轉(zhuǎn)10分鐘后,，才開始實(shí)驗(yàn)操作,。每次操作...
原代細(xì)胞復(fù)蘇技術(shù)2017/7/6
1.原代細(xì)胞凍存復(fù)蘇技術(shù)簡(jiǎn)介在ELISPOT檢測(cè)的應(yīng)用中,，往往需要用到凍存的淋巴細(xì)胞樣品作為檢測(cè)細(xì)胞,。由于ELISPOT檢測(cè)的是細(xì)胞的免疫功能，不僅僅需要保持細(xì)胞的存活率,，而且還要保證細(xì)胞的功能不發(fā)生...
細(xì)胞常見(jiàn)的保存方法2017/7/4
原代細(xì)胞保存溫度越低,，保存時(shí)限更長(zhǎng),；溫度越低，對(duì)細(xì)胞傷害越大,；低溫也不怕,，我有防凍劑（e.g.甘油）。下面的表格就是五種常見(jiàn)保存細(xì)菌細(xì)胞的方法和大約時(shí)限,。保存條件溫度°C大約時(shí)間瓊脂平板44-6周（A...
細(xì)胞同步化實(shí)驗(yàn)操作步驟2017/6/29
在腫瘤細(xì)胞培養(yǎng)過(guò)程中,，細(xì)胞多處于不同的細(xì)胞周期時(shí)相中。不同時(shí)相的細(xì)胞對(duì)藥物干預(yù)存在不同的反應(yīng),，會(huì)影響實(shí)驗(yàn)的重復(fù)性,，因此需要制備細(xì)胞周期一致的細(xì)胞。細(xì)胞同步化是解決該問(wèn)題的好辦法,。細(xì)胞同步化是利用藥物或...
細(xì)胞懸液標(biāo)本制備實(shí)驗(yàn)步驟2017/6/27
細(xì)胞系懸液標(biāo)本制備實(shí)驗(yàn)步驟(1)取材：收集對(duì)數(shù)生長(zhǎng)期細(xì)胞于離心管中,，800～1000r／min離心10min，棄上清,，彈指法混勻細(xì)胞,。沿管壁加入2．0％～2．5％冷戊二醛，輕輕吹打,，4℃固定30min...
原代細(xì)胞培養(yǎng)注意事項(xiàng)2017/6/22
原代細(xì)胞培養(yǎng)：1,、實(shí)驗(yàn)材料要新鮮，從活體分離材料后要低溫保存,，并盡快進(jìn)行細(xì)胞分離實(shí)驗(yàn),。2、無(wú)菌操作,。操作時(shí)用的培養(yǎng)液,，可加平時(shí)細(xì)胞培養(yǎng)液5倍含量的青鏈霉素。3,、用酶法分離細(xì)胞時(shí),，注意酶液的濃度和控制消...
腫瘤細(xì)胞凍存保護(hù)劑2017/6/20
腫瘤細(xì)胞很多化合物都可以作為凍存保護(hù)劑，它們既可以單獨(dú)使用也可以聯(lián)合使用,，例如糖,、血清和去污劑。雖然凍存沒(méi)有的準(zhǔn)則,，但是大家普遍認(rèn)為二甲基亞砜（DMSO）和甘油是保護(hù)活細(xì)胞和組織使用zui廣泛且zui...
人類外周血淋巴細(xì)胞的培養(yǎng)方法2017/6/15
實(shí)驗(yàn)原理染色體是在顯微鏡下可見(jiàn)細(xì)胞系有絲分裂過(guò)程中出現(xiàn)的結(jié)構(gòu),。因此，必須獲得染色體標(biāo)本才能進(jìn)行檢查分析,，通常情況下,，都是利用外周血淋巴細(xì)胞進(jìn)行核型分析。正常情況下,，人體外周血淋巴細(xì)胞不再分裂,，但植物血...
細(xì)胞長(zhǎng)期保存的方法2017/6/13
細(xì)胞系長(zhǎng)期低溫冰凍必然會(huì)導(dǎo)致部分細(xì)胞死亡,，而且很多時(shí)候我們要把細(xì)胞樣本拿來(lái)重新接種做實(shí)驗(yàn)，所以解凍再凍的過(guò)程也會(huì)導(dǎo)致細(xì)胞死亡,。那么起始樣本的細(xì)胞濃度就要達(dá)到一定的高度,，這樣在以后保存的過(guò)程中就算死亡一...
原代細(xì)胞培養(yǎng)過(guò)程可能出現(xiàn)的問(wèn)題及解決辦法2017/6/8
原代細(xì)胞培養(yǎng)過(guò)程中會(huì)出現(xiàn)這樣或那樣的問(wèn)題，客戶遇到的問(wèn)題從細(xì)胞生長(zhǎng)角度來(lái)說(shuō),，針對(duì)細(xì)胞不貼壁,、生長(zhǎng)緩慢、生長(zhǎng)不好,，甚至死亡的原因,，我們做以下分析并提出相對(duì)應(yīng)的解決方法。一,、培養(yǎng)細(xì)胞不貼壁可能原因：●胰蛋...
細(xì)胞株培養(yǎng)時(shí)消毒滅菌的方法2017/6/6
細(xì)胞株嚴(yán)格的消毒滅菌對(duì)保證細(xì)胞培養(yǎng)的成功是極為重要的,，其方法分為物理法和化學(xué)法兩類。前者包括干熱,、濕熱,、濾過(guò)、紫外線及射線等,，后者主要指使用化學(xué)消毒劑等,。①熱滅菌：玻璃器皿，160~170℃,，90~1...
ATCC細(xì)胞株解凍和培養(yǎng)操作推薦2017/6/1
凍存的ATCC細(xì)胞株和雜交腐細(xì)胞株在運(yùn)送過(guò)程中使用干冰保持低溫,。收到細(xì)胞后，可以立即解凍復(fù)蘇,，去除二甲基亞砜（DSMO0）后進(jìn)行細(xì)胞培養(yǎng),。如果不立即復(fù)蘇培養(yǎng)細(xì)胞，必須將細(xì)胞凍存管放置于液氮罐氣相層儲(chǔ)存...
原代細(xì)胞保存的主要方法之一細(xì)胞凍存2017/5/25
利用凍存技術(shù)將原代細(xì)胞置于-196℃液氮中低溫保存,，可以使細(xì)胞暫時(shí)脫離生長(zhǎng)狀態(tài)而將其細(xì)胞特性保存起來(lái),，這樣在需要的時(shí)候再?gòu)?fù)蘇細(xì)胞用于實(shí)驗(yàn)。而且適度地保存一定量的細(xì)胞,，可以防止因正在培養(yǎng)的細(xì)胞被污染或其...
原代細(xì)胞培養(yǎng)基的保存方法分析2017/5/23
原代細(xì)胞培養(yǎng)基的保存方法分析1.干粉,，買了后一定要保存在4度。有人保存在-20度我認(rèn)為沒(méi)有必要,。但4度是非常必要的,。保證期是有提示的。2.配好的無(wú)血清培養(yǎng)基一定保存在4度,，保存不要超過(guò)3個(gè)月,。用時(shí)根據(jù)...
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