細(xì)胞株培養(yǎng)時消毒滅菌的方法

時間：2017/6/6閱讀：1136

細(xì)胞株嚴(yán)格的消毒滅菌對保證細(xì)胞培養(yǎng)的成功是極為重要的，其方法分為物理法和化學(xué)法兩類,。前者包括干熱,、濕熱、濾過,、紫外線及射線等,，后者主要指使用化學(xué)消毒劑等。

①熱滅菌：玻璃器皿,，160~170℃,，90~120min或180℃45~60min。

②蒸氣滅菌：用于玻璃器皿,、濾器橡膠塞,、解剖用具、耐熱塑料器具,、受熱不變性的溶液等,，不同物品其有效滅菌壓力和時間不同，如培養(yǎng)用液,、橡膠制品,、塑料器皿等用68kPa(115℃)高壓滅菌10min;布類、玻璃制品,、金屬器械等用103kPa(121.3℃)高壓滅菌15~20min,。

③濾過除菌：適于含有不耐熱成分的培養(yǎng)基和試劑的除菌，用孔徑為0.22μm微孔濾膜可除去細(xì)菌和霉菌等,，用此濾膜過濾兩次,，細(xì)胞株可使支原體達到某種程度的去除，但不能除去病毒,。

④紫外線：紫外線的波長為200~300nm,，zui強是在254 nm，6~15平方米zui少一只紫外燈,，高度要在2.5m以下,，濕度45%~60%，桿菌效果好,，球菌次之,，霉菌、酵母菌zui差,，實驗前應(yīng)不低于30分鐘的照射時間,。

⑤熏蒸消毒：當(dāng)遇有細(xì)胞培養(yǎng)出現(xiàn)多次污染，或?qū)嶒炇覂蓚€月一次的常規(guī)消毒,，均可用高錳酸鉀5~7.5g,，加甲醛(40%)10~15ml，混合放入一開放容器內(nèi),，立即可見白色甲醛煙霧,，消毒房間需封閉24小時,，致少4小時以上。

⑥煮沸消毒：緊密情況時使用,，金屬器械和膠蹇在水中煮20~30分鐘,，趁熱傾去水分即可使用。

⑦化學(xué)消毒：化學(xué)藥品消毒滅菌法是應(yīng)用能殺死微生物的化學(xué)制進行消毒滅菌的方法,。實驗室桌面,、用具及洗手用的溶液均常用化學(xué)藥品進行消毒殺菌。細(xì)胞株常用的有：2%煤酚皂溶液(來蘇爾),、0.25%新潔爾滅,、3~5%甲醛溶液、75%酒精,。

細(xì)胞株培養(yǎng)時消毒滅菌的方法

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