凍存的ATCC細胞株和雜交腐細胞株在運送過程中使用干冰保持低溫,。收到細胞后，可以立即解凍復蘇,，去除二甲基亞砜（DSMO0）后進行細胞培養(yǎng),。如果不立即復蘇培養(yǎng)細胞，必須將細胞凍存管放置于液氮罐氣相層儲存。請不要將細胞存儲在-130℃以上的溫度,。如果溫度不夠低,，達不到-130℃，細胞活力會立即下降,。
ATCC細胞株產(chǎn)品附帶一份產(chǎn)品資料單,，其中包含細胞株的信息和詳細的操作指南。細胞株的所有詳細介紹可以在ATCC找到 ,，產(chǎn)品資料單也可以在ATCC下載,。此外產(chǎn)品還附帶細胞株具體批次的檢測報告，其中包含批次的特定信息,，如每只凍存管中細胞的數(shù)量,，無微生物污染的檢測結(jié)果等。
操作推薦
ATCC推薦在操作凍存的ATCC細胞株時使用手套,，工作服和防護面具以避免任何事故發(fā)生,。檢查包裝，查看是否有任何事破綻或滲漏,。東側(cè)的ATCC細胞株應處于固體狀,。
將凍存的ATCC細胞株從有干冰的包裝中取出，理解復蘇培養(yǎng),，或迅速轉(zhuǎn)移放置在液氧罐氣相層在——130°C以下的度存儲,。
1、 先準備好細胞培養(yǎng)皿或細胞株培養(yǎng)瓶,，及產(chǎn)品說明推薦的相應細胞培養(yǎng)基,。并在37°c水浴中預先溫熱細胞培養(yǎng)基
2、小心取出裝有細胞的凍存管,，保持管蓋擰緊，將凍存管蓋一下的部分置于37°C水浴中并輕微的攪拌以幫助解凍,。解凍過程應該盡快,，大約短于2分鐘或待zui后一塊小冰晶體剛?cè)诨蛻搶⒓毎麅龃婀苋〕鏊　?br />3,、在從水浴中取出的細胞凍存管表面噴灑70%乙醇配制的消毒劑,，用于菌紙巾或紗布試干。之后的操作步驟都應該遵循在無菌條件下生物安全柜中嚴格操作,。
4,、小心擰干凍存管的頂部，將管內(nèi)容物用1MI移槍轉(zhuǎn)移到9毫升培養(yǎng)基的無菌離心管中,。離心5到7分鐘（125*g）.小心吸去上清液以去除抗凍劑（二甲基亞砜）,，避免丟失細胞沉淀。將細胞沉淀重懸于配好的*培養(yǎng)基中。將細胞懸液轉(zhuǎn)移到培養(yǎng)容器,，輕輕搖晃使細胞均勻的分布,。生長較慢的細胞株可重懸于5——8mI培養(yǎng)基并轉(zhuǎn)移到T125培養(yǎng)瓶。生長較快的細胞株可重懸于12——20mI培養(yǎng)基并轉(zhuǎn)移到T75培養(yǎng)瓶,。
5,、將細胞培養(yǎng)容器置于細胞培養(yǎng)箱，在溫度37°C二氧化碳濃度5%的培養(yǎng)條件下進行卵育,。細胞培養(yǎng)24小時候后應在顯微鏡下觀察細胞株形態(tài)和生長狀況 ,。