腫瘤細(xì)胞很多化合物都可以作為凍存保護(hù)劑,，它們既可以單獨(dú)使用也可以聯(lián)合使用,，例如糖,、血清和去污劑,。雖然凍存沒有的準(zhǔn)則，但是大家普遍認(rèn)為二甲基亞砜（DMSO）和甘油是保護(hù)活細(xì)胞和組織使用zui廣泛且zui有效的凍存保護(hù)劑,。其他凍存保護(hù)劑可根據(jù)情況使用,，可單獨(dú)使用也可聯(lián)合使用，包括：聚乙烯乙二醇（polyethylene glycol）,，丙烯乙二醇（propylene  glycol）,，甘油（glycerine），聚乙烯吡咯烷酮（polyvinylpyrolidone）,，山梨醇（sorbitol）,，右旋糖苷（dextran），海藻糖（trehalose）,。
凍存組織和整個器官的需求,，促進(jìn)了凍存方法的發(fā)展，新方法也提高了凍存腫瘤細(xì)胞和有機(jī)體的復(fù)蘇,。這些方法包括改變凍存保護(hù)劑的濃度和加入添加劑,，避免凍存過程引發(fā)的細(xì)胞調(diào)亡或 程序性死亡。多年來人們一直認(rèn)為,，是凍存過程中產(chǎn)生的細(xì)胞內(nèi)物理變化或損壞,，造成凍存后細(xì)胞的死亡。而zui近有研究發(fā)現(xiàn),，一些更為精細(xì)的胞內(nèi)活動可能導(dǎo)致了細(xì)胞死亡,，而這些活動可在一定程度上受控于適當(dāng)?shù)膬龃嫣砑觿?br />凍存過程中，凍存保護(hù)劑有多種功能,。例如,，DMSO 可以降低冰點(diǎn)，促進(jìn)細(xì)胞在胞內(nèi)冰晶形成之前脫水更加*,。普遍認(rèn)為,，當(dāng)凍存保護(hù)劑可有效穿透細(xì)胞，延遲胞內(nèi)冰晶形成,，降低溶液效應(yīng)時,，凍存保護(hù)的效果*。另外,，需要根據(jù)凍存的細(xì)胞類型來選擇凍存保護(hù)劑,。對絕大多數(shù)細(xì)胞來說，甘油是更好的選擇，因?yàn)樗亩拘员菵MSO 小,。但是,，DMSO 具有更好的滲透性， 通常作為較大型較復(fù)雜的細(xì)胞凍存,，如原生生物,。在添加到細(xì)胞懸液之前，凍存保護(hù)劑應(yīng)該用新鮮培養(yǎng)基稀釋到適宜濃度,，這能zui小化潛在的化學(xué)反應(yīng)損害,，并確保腫瘤細(xì)胞能均一接觸到保護(hù)劑，減少毒害效應(yīng),。DMSO 和甘油通常使用的濃度范圍為 5-10%（v/ v）,。除了用于植物細(xì)胞，二者一般不聯(lián)合使用,。