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科研細(xì)胞
天然蛋白,、重組蛋白
抗體
成纖維細(xì)胞排除法操作流程2017/3/7
1.原代細(xì)胞機(jī)械刮除法:是用不銹鋼絲末端插有橡膠刮頭(用膠塞剪成三角形插以不銹鋼絲),、或裹少許脫脂棉制成,裝入試管中高壓滅菌后備用(也可用特制電熱燒灼器刮除),。刮除程序?yàn)椋?1)標(biāo)記:鏡下觀察,,用不脫...
對(duì)淋巴細(xì)胞系進(jìn)行體外刺激預(yù)孵育,、或板內(nèi)同步刺激培養(yǎng)2017/3/2
1,、將抗原和淋巴細(xì)胞系在體外混合,刺激并預(yù)孵育,,是通用的方法,。預(yù)孵育的淋巴細(xì)胞,在置入ELISPOT板之前應(yīng)使用復(fù)溫到37℃的培養(yǎng)液清洗細(xì)胞1-2次,。置入ELISPOT板以后通常在37℃培養(yǎng)5~6小時(shí)...
細(xì)胞電穿孔轉(zhuǎn)染操作步驟2017/2/28
原代細(xì)胞對(duì)于細(xì)胞轉(zhuǎn)染而言,,目前主要是轉(zhuǎn)染試劑(多為脂質(zhì)體)的天下。磷酸鈣轉(zhuǎn)染的方法雖說有些out,,但有些細(xì)胞還就認(rèn)準(zhǔn)這一套,。不過,對(duì)于某些淋巴細(xì)胞而言,,化學(xué)方法怎么都不奏效,,那我們只能采取強(qiáng)硬手段,用...
植物細(xì)胞質(zhì)壁分離技術(shù)分析2017/2/23
(1)原代細(xì)胞質(zhì)壁分離法:成長的植物細(xì)胞一般具有中央液泡,,在中央液泡和細(xì)胞壁之間為細(xì)胞質(zhì)的薄層及其內(nèi)外膜——液泡膜和質(zhì)膜,。液泡中的胞液具有一定的溶質(zhì)勢(或稱滲透勢),而活的原生質(zhì)特別是液泡膜和質(zhì)膜則具...
動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)研究開發(fā)和工業(yè)化2017/2/21
動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)研究開發(fā)和工業(yè)化動(dòng)物細(xì)胞株(雜交瘤細(xì)胞,、CHO細(xì)胞,、昆蟲細(xì)胞等)大規(guī)模培養(yǎng)技術(shù)及其生物反應(yīng)器工程可廣泛應(yīng)用于抗體、基因重組蛋白質(zhì)藥物,、病毒疫苗等生物技術(shù)產(chǎn)品的研究開發(fā)和工業(yè)化,,長期以來...
人類體細(xì)胞染色體標(biāo)本制備實(shí)驗(yàn)原理和操作步驟2017/2/16
人類體細(xì)胞染色體標(biāo)本制備實(shí)驗(yàn)原理和操作步驟實(shí)驗(yàn)原理染色體是在顯微鏡下可見原代細(xì)胞有絲分裂過程中出現(xiàn)的結(jié)構(gòu)。因此,,必須獲得染色體標(biāo)本才能進(jìn)行檢查分析,,通常情況下,都是利用外周血淋巴細(xì)胞進(jìn)行核型分析,。正常...
培養(yǎng)原代細(xì)胞時(shí)哪些問題需要注意2017/2/14
培養(yǎng)原代細(xì)胞時(shí)哪些問題需要注意1.原代細(xì)胞用1640加10%胎牛血清,,有的種系用DMEM.血清要求質(zhì)量較高,在普通血清中細(xì)胞生長不太好,。1640用雙蒸水溶解,,按說明加入碳酸氫鈉,。2.培養(yǎng)液中應(yīng)加入HE...
造血干細(xì)胞的基本特性2017/2/9
造血干細(xì)胞的基本特性造血干細(xì)胞的多向分化潛能使造血干細(xì)胞分化為各類祖細(xì)胞系,祖細(xì)胞又可以分化為各種類型的血細(xì)胞。在造血干細(xì)胞發(fā)育,、成熟的過程中,除了分化為成熟的細(xì)胞,部分細(xì)胞會(huì)衰老,、死亡。為了維持終生...
雜交瘤細(xì)胞技術(shù)分析2017/2/7
雜交瘤細(xì)胞技術(shù)分析克隆化的細(xì)胞可以在體外進(jìn)行大量培養(yǎng),,收集上清液而獲得大量的單一的克隆化抗體,。不過體外培養(yǎng)法得到的單克隆抗體有限,其不能超過特定的細(xì)胞濃度,,且每天要換培養(yǎng)液,。而體內(nèi)雜交瘤細(xì)胞繁殖可以克...
體外培養(yǎng)的細(xì)胞系差異和分化2017/1/21
體外培養(yǎng)的細(xì)胞系差異和分化1、差異:細(xì)胞系離體后,,失去了神經(jīng)體液的調(diào)節(jié)和細(xì)胞間的相互影響,,生活在缺乏動(dòng)態(tài)平衡的相對(duì)穩(wěn)定環(huán)境中,日久天長,,易發(fā)生如下變化:分化現(xiàn)象減弱,;形態(tài)功能趨于單一化或生存一定時(shí)間后...
選購細(xì)胞株需要考慮哪幾個(gè)因素2017/1/19
選購細(xì)胞株需要考慮哪幾個(gè)因素1、細(xì)胞株的生物等級(jí),,由于有些細(xì)胞株及菌株屬于管制品,,所以從國外購貨比較麻煩,。2,、報(bào)關(guān)時(shí)盡量提供比較充足的證明材料,以免擔(dān)擱時(shí)間而導(dǎo)致干冰揮發(fā)完細(xì)胞株死亡,,甚至于被退回給發(fā)...
原代細(xì)胞生物學(xué)從哪幾個(gè)方面學(xué)習(xí)2017/1/17
原代細(xì)胞生物學(xué)從哪幾個(gè)方面學(xué)習(xí)*,、認(rèn)識(shí)原代細(xì)胞生物學(xué)課程的重要性,正如原子是物理性質(zhì)的zui小單位,,分子是化學(xué)性質(zhì)的zui小單位,,細(xì)胞是生命的基本單位。50年代以來諾貝爾生理與醫(yī)學(xué)獎(jiǎng)大都授予了從事細(xì)胞...
原代細(xì)胞HEPES緩沖液的使用方法及配制2017/1/12
原代細(xì)胞HEPES緩沖液的使用方法及配制(1)HEPES可按所需的濃度直接加入到配制的培養(yǎng)液中,,再過濾除菌,。每1000ml培養(yǎng)液中加入2.38克HEPES,待溶后用lNNaOH調(diào)pH至7.2,,濾過除菌...
培養(yǎng)細(xì)胞無菌操作注意事項(xiàng)2017/1/10
培養(yǎng)原代細(xì)胞無菌操作注意事項(xiàng)1,、操作原代細(xì)胞進(jìn)行培養(yǎng)時(shí),動(dòng)作要準(zhǔn)確敏捷,,但又不必太快,,以防空氣流動(dòng),增加污染機(jī)會(huì),。不能用手觸及已消毒器皿,,如已接觸,,要用火焰燒灼消毒或取備品更換。為拿取方便,,工作臺(tái)面上...
細(xì)胞系活性檢測方法之乳酸脫氫酶(LDH)釋放法2017/1/5
細(xì)胞系活性檢測方法之乳酸脫氫酶(LDH)釋放法LDH是活細(xì)胞漿內(nèi)酶,,當(dāng)細(xì)胞損傷,細(xì)胞膜通透性變化時(shí),,會(huì)將LDH釋放到培養(yǎng)液中,。因此培養(yǎng)液中該酶的活性與被裂解的細(xì)胞系數(shù)量成正比。由LDH催化的酶促反應(yīng)在...

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