（一）原代細(xì)胞計(jì)數(shù) 
1、將血球計(jì)數(shù)板及蓋片用擦試干凈,，并將蓋片蓋在計(jì)數(shù)板上,。 
2、將細(xì)胞懸液吸出少許,，滴加在蓋片邊緣,，使懸液充滿(mǎn)蓋片和計(jì)數(shù)板之間,。 
3,、靜置3分鐘。 
4、鏡下觀(guān)察,，計(jì)算計(jì)數(shù)板四大格細(xì)胞總數(shù),，壓線(xiàn)細(xì)胞只計(jì)左側(cè)和上方的。然后按下式計(jì)算： 
細(xì)胞數(shù)/ml＝4大格細(xì)胞總數(shù)/ 4×10000 
注意：鏡下偶見(jiàn)由兩個(gè)以上細(xì)胞組成的細(xì)胞團(tuán),，應(yīng)按單個(gè)細(xì)胞計(jì)算,，若細(xì)胞團(tuán)占10%以上，說(shuō)明分散不好,，需重新制備細(xì)胞懸液,。 
（二）原代細(xì)胞活力 
1、將細(xì)胞懸液以0.5ml加入試管中,。 
2,、加入0.5ml 0.4%臺(tái)盼蘭染液，染色2一3分鐘,。 
3,、吸取少許懸液涂于載玻片上，加上蓋片,。 
4,、鏡下取幾個(gè)任意視野分別計(jì)死細(xì)胞和活細(xì)胞數(shù)，計(jì)細(xì)胞活力,。 
死細(xì)胞能被臺(tái)盼蘭染上色,，鏡下可見(jiàn)深蘭色的細(xì)胞，活細(xì)胞不被染色,，鏡下呈無(wú)色透明狀,。 
活力測(cè)定可以和細(xì)胞計(jì)數(shù)合起來(lái)進(jìn)行，但要考慮到染液對(duì)原細(xì)胞懸液的加倍稀釋作用,。 
（三）MTT法測(cè)細(xì)胞相對(duì)數(shù)和相對(duì)活力 
活細(xì)胞中的琥珀酸脫氫酶可使MTT分解產(chǎn)生蘭色結(jié)晶狀甲贊顆粒積于細(xì)胞內(nèi)和細(xì)胞周?chē)?。其量與細(xì)胞數(shù)呈正比，也與細(xì)胞活力呈正比,。 
l,、細(xì)胞懸液以1000rpm離心10分鐘，棄上清液,。 
2,、沉淀加入0.5－1ml MTT，吹打成懸液,。 
3,、37℃下保溫2小時(shí)。 
4,、加入4—5 ml酸化異丙醇（定容）,。打勻。 
5、1000 rpm離心,，取上清液酶標(biāo)儀或分光光度計(jì)570nm比色,，酸化異丙醇調(diào)零點(diǎn)。 
注意：MTT法只能測(cè)定原代細(xì)胞相對(duì)數(shù)和相對(duì)活力,，不能測(cè)定細(xì)胞數(shù),。 
附：1、0.4%臺(tái)盼蘭染液配制： 
臺(tái)盼蘭 0.4克 加雙蒸水至100 ml,。 
2,、MTT配制： 
MTT 0.5克，溶于100 ml的磷酸緩沖液或無(wú)酚紅的基礎(chǔ)液中,。4℃下保存,。 
3、酸化異丙醇配制： 
異丙醇中加入HCl使zui終達(dá)0.04mol/L,。