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雜交瘤細(xì)胞技術(shù)分析
克隆化的細(xì)胞可以在體外進(jìn)行大量培養(yǎng),，收集上清液而獲得大量的單一的克隆化抗體,。不過體外培養(yǎng)法得到的單克隆抗體有限,，其不能超過特定的細(xì)胞濃度，且每天要換培養(yǎng)液。而體內(nèi)雜交瘤細(xì)胞繁殖可以克服這些限制,。雜交瘤細(xì)胞具有從親代淋巴細(xì)胞得來的腫瘤細(xì)胞的遺傳特性,。如接種到組織相容性的同系小鼠或不能排斥雜交瘤的小鼠（無胸腺的裸鼠）,，雜交瘤細(xì)胞就開始無限地繁殖,，直至宿主死亡,。產(chǎn)生腫瘤細(xì)胞的小鼠腹水和血清中含有大量的雜交瘤細(xì)胞分泌的單克隆抗體，這種抗體的效價(jià)往往高于培養(yǎng)細(xì)胞上清液的100~1000倍,。
利用免疫抑制劑,，如降植烷,、液體石蠟,、抗淋巴細(xì)胞血清等,，可以加速和促進(jìn)腫瘤的生長,。
1．材料 （1）經(jīng)高壓滅菌的降植烷,。
（2）Balb/c鼠：5~8周齡。
（3）雜交腫瘤細(xì)胞：取對(duì)數(shù)生長期的細(xì)胞,。
（4）RPMI—1640培養(yǎng)液
（5）新生牛血清
2．操作方法
(1)于小鼠腹腔注射0.5ml降植烷，注射后1～9周內(nèi)種植細(xì)胞,。
(2)收取對(duì)數(shù)生長期的雜交瘤細(xì)胞，用5%FCS—1640液洗滌一次,，1000r/min離心10min。
(3)取樣,，用臺(tái)盼蘭染色，計(jì)活細(xì)胞數(shù),，重新用5%FCS—1640液配成1.0×107細(xì)胞/ml的懸液,。
(4)給注射了降植烷的小白鼠接種雜交腫瘤細(xì)胞,，每只腹腔注射1ml（含1.0×107個(gè)細(xì)胞/ml）,。
(5)接種后10天左右時(shí)間腫瘤體積zui大,，此時(shí)可由腹腔抽取腹水,，每隔1~3天取1次，可取10次,。血清可由腋下動(dòng)脈或心臟采血后分離,。
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