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細(xì)胞培養(yǎng)常遇問題集錦（十七）2021/12/23
細(xì)胞培養(yǎng)問題集錦第十七期,，小編會繼續(xù)收集相關(guān)問題，每期都為大家更新5個細(xì)胞培養(yǎng)中遇到的問題并解答~81,、▲問：hepg2細(xì)胞有很多小球聚集到一起，這是污染還是沒有吹開的細(xì)胞,？是不是念珠菌感染,？出不來形...
細(xì)胞培養(yǎng)常遇問題集錦（十六）2021/12/23
細(xì)胞培養(yǎng)第十六期來了，今后也會陸續(xù)為大家更新,，一起來看看吧~76,、▲問：這是酵母菌感染嗎？一般會通過什么途徑污染,？答：是酵母菌污染,，像圈起來的連體結(jié)構(gòu)就是。一般是環(huán)境和操作等途徑污染,。問：用新潔爾滅擦...
細(xì)胞培養(yǎng)常遇問題集錦（十五）2021/12/23
本次更新第十五期細(xì)胞培養(yǎng)常遇問題集錦,，大家一起來看看有沒自己培養(yǎng)細(xì)胞時遇到的問題吧~71、問：凍存細(xì)胞放在4°最多可以放多久呀,？如不小心忘記了大概放4°放了3個小時還可以用嗎,？答：問題不大，有復(fù)蘇過這...
細(xì)胞培養(yǎng)常遇問題集錦（十四）2021/12/23
本期我們繼續(xù)更新細(xì)胞培養(yǎng)常遇問題,，看下有沒大家遇到的,，讓我們細(xì)胞培養(yǎng)做得更好，個個細(xì)胞都養(yǎng)得“肥肥白白”~話不多說,，以下為大家奉上本期精華~66,、問：thp-1誘導(dǎo)貼壁之后，背景比較臟,，還隱約看到有東...
內(nèi)質(zhì)網(wǎng)自噬及其特點詳解剖析2021/12/22
內(nèi)質(zhì)網(wǎng)自噬的概念最早于2007年提出,，是指內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激誘導(dǎo)酵母發(fā)生針對內(nèi)質(zhì)網(wǎng)的選擇性的自噬現(xiàn)象，其主要作用是降解多余的內(nèi)質(zhì)網(wǎng)膜,，控制內(nèi)質(zhì)網(wǎng)的體積從而維持細(xì)胞穩(wěn)態(tài),。近年來隨著對內(nèi)質(zhì)網(wǎng)自噬的研究方法、形成機...
腫瘤免疫治療靶點及相關(guān)小分子抑制劑/激動劑詳解2021/12/22
腫瘤相關(guān)的免疫治療主要包括細(xì)胞療法,、免疫檢查點抑制劑及腫瘤疫苗三大類,。免疫檢查點抑制劑（ICIs）主要是單克隆抗體（mAbs），而抗體類藥物大多存在不能口服,、組織滯留時間延長,、不能透膜等多種缺陷。因此...
如何快速測量細(xì)胞劃痕寬度,？2021/12/22
細(xì)胞劃痕實驗可謂是性價比高的一個小實驗了?？梢栽诓活~外購買實驗設(shè)備的情況下,，一定程度地評價腫瘤細(xì)胞或者成纖維細(xì)胞的遷移能力,。在課題組經(jīng)費的限制下，這個實驗成為很多老板的*,。細(xì)胞劃痕實驗本身的操作很簡單...
細(xì)胞培養(yǎng)常遇問題集錦（十三）2021/12/22
細(xì)胞培養(yǎng)常遇問題集錦系列,，由于之前小編都在收集一些大家實驗室中常遇到的問題并解答，現(xiàn)在和大家分享下最新的一期,，希望這些真實案例可以真切的幫助到童鞋們在細(xì)胞實驗中少走彎路和解決問題,，話不多說，以下上“正...
如何提升細(xì)胞轉(zhuǎn)染實驗效率?2021/12/22
細(xì)胞轉(zhuǎn)染是細(xì)胞生物學(xué)和分子生物學(xué)的一種常用的技術(shù)手段,。而轉(zhuǎn)染效率低卻是實驗童鞋們經(jīng)常遇到的問題,，尤其是原代細(xì)胞轉(zhuǎn)染，更是因為難度大,，號稱誰碰誰死,，而令人談虎色變。不,，應(yīng)該是談原代細(xì)胞色變,。那么，當(dāng)實驗...
從M13噬菌體模板合成固定長度的單鏈DNA探針2021/12/21
材料與儀器大腸桿菌DNA聚合酶IKlenow片段限制性內(nèi)切核酸酶模板DNA寡核苷酸引物乙酸銨DTTEDTA乙醇NaCl酚氯仿TBE電泳緩沖液Tris-ClKlenow基礎(chǔ)緩沖液dNTP溶液變性聚丙烯酰...
差異顯示PCR2021/12/21
材料與儀器反轉(zhuǎn)錄酶熱穩(wěn)定DNA聚合酶錨定3'-寡核苷酸引物隨機5'-寡核苷酸引物總RNA帶放射標(biāo)記的dATP擴增緩沖液DD-PCR反轉(zhuǎn)錄緩沖液DTTdNTP貯存液胎盤RNase抑制劑測序膠上樣緩沖液瓊...
cDNA 3'末端的快速擴增（3’-RACE)2021/12/21
原理在用oligo(dT)引物構(gòu)建的cDNA文庫中,，偶而發(fā)生部分cDNA克隆缺失了與靶mRNA3'末端互補的序列。這部分序列到底是在cDNA合成過程中還是在分子克隆中怎樣缺失和在哪個環(huán)節(jié)中缺失的尚不清...
cDNA 5’末端的快速擴增（5’-RACE）2021/12/21
原理在分子克隆中沒有比分離缺乏相應(yīng)的mRNA5'末端的序列特征結(jié)構(gòu)的cDNA克隆更易失敗的了,。通常存在于cDNA基因文庫中的部分克隆,，由于反轉(zhuǎn)錄酶未能沿全長mRNA模板延伸*，合成的cDNA第一條鏈往...
純化的RNA的點雜交和狹線雜交2021/12/21
原理點雜交和狹線雜交技術(shù)（Kafatosetal.1979)用于在同一固相支持物（通常為帶電荷的尼龍膜）上固定幾種核酸樣品,，然后用合適的探針與已固定的樣品雜交,，并由此判斷靶序列的濃度。通過估計樣品點發(fā)...
從鼠尾或其他小樣本中制備基因組DNA2021/12/20
原理這一簡單的實驗方案在成百上千的實驗室被廣泛應(yīng)用于轉(zhuǎn)基因或基因剔除小鼠的基因型鑒定以及從小量培養(yǎng)的細(xì)胞或組織塊中提取DNA,。材料與儀器蛋白酶K培養(yǎng)的細(xì)胞鼠尾或小鼠組織乙醇異丙醇酚氯仿異戊醇磷酸鹽緩沖...
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