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中級會(huì)員 | 第5年

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冰凍切片的原位雜交實(shí)驗(yàn)2022/3/24
材料與儀器冰凍切片Tris·ClEDTA甘氨酸PBSSSC乙醇甲酰胺硫酸葡聚糖DTTNaCl加濕盒水浴鍋培養(yǎng)箱步驟1.從冰箱中取出載玻片，平衡至室溫,，再打開玻片盒,。置載玻片于架中，浸泡于以50mmol...
部分分解多肽兩端有關(guān)的 PCR 法篩選 PK-120 基因?qū)嶒?yàn)2022/3/24
材料與儀器PK-120Sephadex-50GeneAmpRNAPCR試劑盒合成寡聚核苷酸抽提液酵母tRNAPCR擴(kuò)增儀步驟實(shí)驗(yàn)所需「試劑」具體見「其他」1.引物設(shè)計(jì)PK-120部分分解多肽氨基酸序列...
標(biāo)簽酶消化釋放標(biāo)簽實(shí)驗(yàn)2022/3/24
材料與儀器溶液與緩沖液LoTEEppendorf試管步驟實(shí)驗(yàn)方案A1.向含有Dynabeads的每個(gè)試管中加入下列物質(zhì)：2.65℃下酶解Ih(每IOmin混合1次),。3.時(shí)收集上清液（含有釋放的cDN...
Biozellen植物源基質(zhì)膠在小鼠皮下成瘤實(shí)驗(yàn)的使用步驟2022/3/23
小鼠皮下成瘤實(shí)驗(yàn)準(zhǔn)備程序A,、細(xì)胞房內(nèi)材料準(zhǔn)備,、試劑制備及步驟(1)材料準(zhǔn)備:1.冰盒、2.37℃水浴槽,、3.C緩沖溶液(10X),、4.無血清細(xì)胞培養(yǎng)液(例如:無血清DMEM，DMEM-F12等,，不可用...
Biozellen基質(zhì)膠在3D細(xì)胞球體培養(yǎng)實(shí)驗(yàn)的應(yīng)用操作2022/3/23
Biozellen®3D細(xì)胞培養(yǎng)基質(zhì)膠在3D細(xì)胞球體培養(yǎng)試驗(yàn)步驟：A,、試劑制備1、A基質(zhì)膠：將A基質(zhì)膠溶于37℃水浴槽回溫10分鐘,，確認(rèn)*融解.2,、C緩沖溶液(1X)制備：使用前將10XC緩沖...
Biozellen基質(zhì)膠在細(xì)胞侵襲實(shí)驗(yàn)的操作方法2022/3/22
細(xì)胞侵襲實(shí)驗(yàn)準(zhǔn)備程序A、試劑準(zhǔn)備:1,、C緩沖溶液(0.5X)制備:使用37℃水浴回溫的無血清細(xì)胞培養(yǎng)液(例如:無血清DMEM等,，用于稀釋A膠)稀釋C緩沖溶液(10X)(貨號:B-P-00002-C)至...
基質(zhì)膠斷貨了，實(shí)驗(yàn)怎么辦,？Biozellen®3D基質(zhì)膠解您燃眉之急,！2022/3/21
▲Biozellen®3D基質(zhì)膠傳統(tǒng)動(dòng)物源基質(zhì)膠是一種從Engelbreth-Holm-Swarm小鼠肉瘤中提取的可溶性基底膜基質(zhì)，其用于細(xì)胞培養(yǎng)已有30多年歷史,。然而,，由于其動(dòng)物源的成分復(fù)雜...
免疫組化IHC實(shí)驗(yàn)經(jīng)驗(yàn)總結(jié)2022/3/15
1、免疫組化實(shí)驗(yàn)所用的組織和細(xì)胞標(biāo)本有哪些,？實(shí)驗(yàn)所用主要為組織標(biāo)本和細(xì)胞標(biāo)本兩大類,，前者包括石蠟切片（病理大片和組織芯片）和冰凍切片，后者包括組織印片,、細(xì)胞爬片和細(xì)胞涂片,。其中石蠟切片是制作組織標(biāo)本最...
細(xì)胞增殖與毒性檢測實(shí)驗(yàn)方法及經(jīng)驗(yàn)總結(jié)-CCK-8 法2022/3/15
實(shí)驗(yàn)原理：CellCountingKit-8（簡稱CCK-8）試劑可用于簡便而準(zhǔn)確的細(xì)胞增殖和毒性分析。其基本原理為：該試劑中含有WST-8【化學(xué)名：2-(2-甲氧基-4-硝基苯基)-3-(4-硝基苯...
細(xì)胞轉(zhuǎn)染技術(shù)原理及應(yīng)用（瞬時(shí)轉(zhuǎn)染和穩(wěn)定轉(zhuǎn)染）2022/3/14
常規(guī)轉(zhuǎn)染技術(shù)可分為兩大類,，一類是瞬時(shí)轉(zhuǎn)染,，一類是穩(wěn)定轉(zhuǎn)染（永（jiu）轉(zhuǎn)染）。前者外源DNA/RNA不整合到宿主染色體中,，因此一個(gè)宿主細(xì)胞中可存在多個(gè)拷貝數(shù),，產(chǎn)生高水平的表達(dá)，但通常只持續(xù)幾天,，多用于...
瞬時(shí)轉(zhuǎn)染分析法2022/3/14
摘要：介紹5種瞬時(shí)轉(zhuǎn)染分析法：瞬時(shí)轉(zhuǎn)染分析法,、穩(wěn)定轉(zhuǎn)染分析法、體外轉(zhuǎn)錄分析法,、轉(zhuǎn)基因分析法和同源重組分析法.1.瞬時(shí)轉(zhuǎn)染分析法目前有很多功能性分析方法用于研究轉(zhuǎn)錄調(diào)控尤為常用的方法是瞬時(shí)轉(zhuǎn)染分析法.該...
細(xì)胞瞬時(shí)轉(zhuǎn)染2022/3/14
摘要：通過脂質(zhì)體介導(dǎo)轉(zhuǎn)染法及電穿孔等基因轉(zhuǎn)染技術(shù),，將靶基因?qū)爰?xì)胞,，一般在轉(zhuǎn)染后48小時(shí)左右，靶基因即可在細(xì)胞內(nèi)表達(dá),。根據(jù)不同的實(shí)驗(yàn)?zāi)康模?8小時(shí)后即可進(jìn)行靶基因表達(dá)的檢測等實(shí)驗(yàn),。原理：通過脂質(zhì)體介導(dǎo)...
哺乳動(dòng)物細(xì)胞瞬時(shí)基因轉(zhuǎn)移法制備重組蛋白實(shí)驗(yàn)2022/3/14
材料與儀器步驟一、轉(zhuǎn)染方法對于脂質(zhì)體轉(zhuǎn)染(Upofection),可以從商業(yè)途徑獲得許多配方,，這些配方都具有單一的專（禾刂）化組分,，而且毫無疑問，它們中的大部分都能非常有效地將質(zhì)粒DNA轉(zhuǎn)人細(xì)胞,。其缺...
斑點(diǎn)濾膜結(jié)合法2022/3/14
原理材料與儀器待測蛋白質(zhì)樣品10％三氯醋酸（TCA）考馬斯亮藍(lán)凝膠染色液考馬斯亮藍(lán)凝膠脫色液Whatman3MM濾紙步驟1.用鉛筆在3mm濾紙上畫出1cmx1cm大小的方格,；2.在每一方格中心加入3u...
T,、B淋巴細(xì)胞分離2022/3/11
原理淋巴細(xì)胞與用溴花二氨基異硫氫化物（簡稱AET）處理的綿羊紅細(xì)胞（SRBC）混合后,，其中全部T淋巴細(xì)胞均能吸附AET-SRBC，形成牢固穩(wěn)定而巨大的E-花環(huán),，較正常未處理的SRBC形成的E-花環(huán)百分...
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