日韩av大片在线观看欧美成人不卡|午夜先锋看片|中国女人18毛片水多|免费xx高潮喷水|国产大片美女av|丰满老熟妇好大bbbbbbbbbbb|人妻上司四区|japanese人妻少妇乱中文|少妇做爰喷水高潮受不了|美女人妻被颜射的视频,亚洲国产精品久久艾草一,俄罗斯6一一11萝裸体自慰,午夜三级理论在线观看无码

深圳市安培生物科技有限公司
中級(jí)會(huì)員 | 第5年

19126518388

血清系列
細(xì)胞轉(zhuǎn)染
支原體清除
細(xì)胞凍存
實(shí)驗(yàn)耗材
分子試劑
細(xì)胞增殖與凋亡
Biozellen系列
培養(yǎng)基
ELISA試劑盒
TOYOBO（東洋紡）
ZYMO RESEARCH
Greiner（格瑞納）
IKA（艾卡）
化學(xué)發(fā)光底物（ECL）
PROSPEC系列
Epigentek系列
微生物檢測(cè)
細(xì)胞生物學(xué)
Corning康寧
解離試劑
細(xì)胞類-實(shí)驗(yàn)耗材
原代細(xì)胞
植物檢測(cè)系列試劑盒
SERANA
BSA
細(xì)胞系
生化試劑盒
環(huán)境檢測(cè)系列試劑盒（AKEN）
類器官培養(yǎng)
緩沖器和解決方案
生物三凝膠基質(zhì)
細(xì)胞因子分子
生物樣本庫
蛋白研究系列

冰凍切片的原位雜交實(shí)驗(yàn)

時(shí)間：2022/3/24閱讀：1580
分享：

材料與儀器


冰凍切片
Tris·Cl EDTA 甘氨酸 PBS SSC 乙醇 甲酰胺 硫酸葡聚糖 DTT NaCl
加濕盒 水浴鍋 培養(yǎng)箱


步驟


1.  從冰箱中取出載玻片，平衡至室溫,，再打開玻片盒,。置載玻片于架中，浸泡于以50 mmol/l Tris·Cl（pH7.5）/5 mmol/l EDTA所配的鏈霉蛋白酶液中,，放10 min,。
 
2.  室溫下將載玻片浸于含2 mg/ml 甘氨酸的PBS中30 s，然后再于PBS中浸2次,，毎次30 s,。
 
3.  浸載玻片于新配的TEA緩沖液中5 min。
 
4.  在一個(gè)燒杯中,，配足量TEA緩沖液以沒過載玻片,。加乙酸肝至終濃度0.25%，迅速倒在載玻片上,，晃動(dòng)玻片架使液體充分混合,，放置10 min。

5.  在2×SSC中洗載玻片2次,，每次5 min,。
 
6.  按順序經(jīng)30%、60%,、80%,、95%和100%乙醇依次縵泡脫水,，每次浸2 min，干燥切片并馬上用于雜交,。
 
7.  沉淀標(biāo)記的DNA或RNA探針,。確定標(biāo)記摻入的百分率（比活）并估計(jì)合成的探針量，并按最終每千堿基0.2 μg/ml 的濃度,，估算雜交混合液的終體積,，依此重懸探針沉淀。
 
8.  首先以2份雜交混合液B及2份去離子的甲酰胺重懸探針沉淀,，隨后加1份50%硫酸葡聚糖,，充分混合。
 
9.  標(biāo)記的DNA探針煮沸2 min,，馬上置于冰?。换蛴?0℃加熱標(biāo)記的RNA探針30 s,，維持于50℃,。熱變性后，加3.3 mol/l DTT至50 mmol/l 終濃度,。用加樣吸頭,，加足量探針充分覆蓋切片。

10.  玻片放入密封閉良好的加濕盒中溫育4 h,，加濕盒中加有加濕盒液B,。探針于37 ℃溫育探針于42℃溫育。

11.  對(duì)DNA探針：以預(yù)熱至37℃的DNA洗液洗2 h,，其間換洗液4~5次,。

12.  對(duì)RNA探針：
 
（1）在預(yù)熱至50℃的RNA洗液1中洗15 min，至少洗2次,。
 
（2）玻片在37℃的含20 μg/ml 經(jīng)煮沸處理RNA酶A的0.5 mol/l NaCl / 10 mmol/l Tris·Cl（pH8.0）液中溫育15 min,。

（3）在預(yù)熱至50℃的RNA洗液1中冼15 min至少洗2次。

（4）在預(yù)熱至50℃的RNA冼液2中冼15 min,，換液2次,，（如需要的話，洗片溫度可髙至60℃,，不過對(duì)形態(tài)學(xué)結(jié)果可能有影響）,。
 
13.  在以下各溶液中依次浸泡脫水，每次浸泡2 min：含0.6 mol/l NaCl 的30%乙醇,、含0.6 mol/l NaCl 的60%乙醇,、80%乙醇、95%乙醇和100%乙醇。

14.  于空氣中干燥切片后,，經(jīng)放射自顯影檢測(cè)雜交的探針,。


以上就是本期的內(nèi)容,，更多資訊,，歡迎點(diǎn)擊安培生物網(wǎng)站鏈接了解更多技術(shù)與產(chǎn)品資訊。


安培生物科技有限公司介紹：

安培生物堅(jiān)持為生命科學(xué)研究,、活體動(dòng)物轉(zhuǎn)染,、大規(guī)模生物生產(chǎn)、基因和細(xì)胞治療領(lǐng)域客戶,，提供*細(xì)胞體內(nèi)可代謝的核酸轉(zhuǎn)染試劑,；inviCELL™Platelet lysate無動(dòng)物血清產(chǎn)品旨在支持廣泛的細(xì)胞擴(kuò)增和生產(chǎn)，包括培養(yǎng)間充質(zhì)干細(xì)胞和多種免疫細(xì)胞系等,，為制藥公司或者生物技術(shù)公司提供無血清細(xì)胞培養(yǎng)規(guī)模生產(chǎn)服務(wù),；提供以植物生物為平臺(tái)基因序列全人源化、*的細(xì)胞培養(yǎng)可分解3D基質(zhì)膠產(chǎn)品,；提供內(nèi)毒素≦ 1.0 EU/mL,、對(duì)細(xì)胞無毒性影響、高純度的一型膠原蛋白產(chǎn)品,。安培生物專注為生物醫(yī)藥領(lǐng)域提供優(yōu)質(zhì)的產(chǎn)品和技術(shù)服務(wù),，努力發(fā)展為基因治療、細(xì)胞治療的生物科技企業(yè),。


會(huì)員登錄

×

請(qǐng)輸入賬號(hào)

請(qǐng)輸入密碼

=

請(qǐng)輸驗(yàn)證碼

收藏該商鋪

X
該信息已收藏！
標(biāo)簽：
保存成功

(空格分隔,最多3個(gè),單個(gè)標(biāo)簽最多10個(gè)字符)

常用：

提示

X
您的留言已提交成功,！我們將在第一時(shí)間回復(fù)您~
撥打電話
在線留言