（1）原代培養(yǎng)材料的選擇,，盡量選取繁殖能力較強(qiáng)的組織,，如胚胎、幼小的生物體或者腫瘤組織等,。

（2）要注意無菌操作,。其操作要求應(yīng)高于外科手術(shù)

（3）整個(gè)取材操作要迅速，尤其孕鼠浸泡乙醇時(shí)間1min左右,，不能過長,，以確保胚胎細(xì)胞活性。

（4）運(yùn)用消化法時(shí)胰酶溫度應(yīng)低于37℃,，濃度只需平時(shí)消化細(xì)胞濃度的一半,。因?yàn)榇诉^程不像消化培養(yǎng)細(xì)胞時(shí)的1~10min，而是至少20min,，先消化下來的細(xì)胞在此胰酶消化液中繼續(xù)消化了10min以上,。所以胰酶不能作用過強(qiáng)，否則這些細(xì)胞易被損傷而不易生存,。

（5）如使用組織塊法,，則應(yīng)待組織塊略干燥，能黏附于瓶壁時(shí)再使之與培養(yǎng)液接觸,，匆使組織塊漂浮起來,。如果組織塊沒有黏壁,，則細(xì)胞不易生長，即使生長也因沒有貼在瓶壁上,，從而因不能觀察到而無法收集到生長的細(xì)胞,。

（6）原代培養(yǎng)操作時(shí)，也可以使用未添加血清的DMEM或PBS洗滌子宮,、胚胎或組織塊等,。

（7）本實(shí)驗(yàn)也可以使用新生乳鼠做培養(yǎng)材料。此時(shí)要將乳鼠浸入75%乙醇2~3min使皮膚充分消毒,，由于乳鼠原代培養(yǎng)污染概率更高,，故應(yīng)小心操作，避免污染細(xì)菌,。乳鼠原代培養(yǎng)細(xì)胞的存活率不及胚胎細(xì)胞培養(yǎng)的成功率,。

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