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新品上市 | Canace高保真酶全新升級，5sec/kb,，保真?？欤?/a>
在使用傳統(tǒng)高保真酶進行PCR時,，難免會遇到一些棘手的問題,。例如保真度不夠，擴增得到的片段測序后發(fā)現(xiàn)仍有目的堿基發(fā)生突變或缺失,。擴增的時間也相對漫長,，有時擴增5kb的片段也要花費將近2個小時的時間。現(xiàn)小翌推出一款快速高保真PCR以解決您的煩惱,！2×HieffCanace®AdvanceFastPCRMasterMix(WithDye)預混液中含有預先添加的電泳指示劑,，PCR產(chǎn)物可直接進行電泳，擴增產(chǎn)物為平末端。該產(chǎn)品具有快速簡便,、靈敏度高,、特異性強、穩(wěn)定性好等優(yōu)點,，反應體系中只需加入引物和模板即可 -
破骨細胞培養(yǎng)高成功率的關鍵——高活性RANKL和M-CSF
01破骨細胞及其作用破骨細胞是一種高度分化的多核巨細胞，主要來源于單核/巨噬細胞造血干細胞系,，是骨組織吸收的主要功能細胞,，參與貫穿生命始終的骨重建過程。建立破骨細胞體外培養(yǎng)方法有利于從細胞與分子水平進行骨吸收機制的研究,，也有利于骨質(zhì)疏松癥、骨硬化癥等代謝性骨病治療藥物的開發(fā)研究,。因此,，為了深入研究破骨細胞的形成機制并尋找其在疾病治療中的應用，誘導分化破骨細胞成為了一個研究熱點,。破骨細胞由血液及骨髓中的單核/巨噬細胞系分化而來,，其分化過程經(jīng)歷破骨細胞前體（osteoclastprecursorce -
定向進化主要包括文庫構建與突變體篩選兩部分，關鍵點則在于建立基因型和表型（即突變體性能）之間的物理對應關系,。前兩期,，我們已經(jīng)介紹了酶定向進化的突變體文庫構建技術和突變體篩選技術，今天小翌來介紹基因型與表型的關聯(lián),。高效篩選方法的前提在于建立可靠的基因型和表型的關聯(lián),，這涉及兩個層面：首先符合預期表型的突變體的基因型可被回溯，即建立氨基酸序列和基因信息之間的聯(lián)系,；其次,，突變體相比于親本的表型變化能被設備或肉眼捕捉，最好能夠量化展示突變體性能提升的程度,。依賴物理空間或分子互作的直接關聯(lián)突變體的遺傳物質(zhì)和
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熒光定量PCR是實驗室中出鏡率非常高的一種檢測方法,。該方法通過在PCR體系中添加熒光基團來記錄DNA產(chǎn)物的累積情況，從而達到對PCR過程進行實時監(jiān)控的目的,，并且可以通過數(shù)據(jù)分析計算出起始模板量,，這就是“熒光定量”中“定量”一詞的來源。熒光定量PCR實驗因為靈敏度高所以經(jīng)常是差之毫厘謬以千里,，所以在實驗過程中,，我們需要注意諸多細節(jié)，謹慎操作。小伙伴們看到這里就要著急了,，我怎樣才能做好qPCR實驗,，拿到實驗結果，發(fā)表高分文章,？在進行熒光定量實驗時,，我們通常會接觸并使用三種圖表，分別是擴增曲線,、標準曲
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上新預告 | 將PCR實驗室裝進“箱子”里的自動化核酸提取檢測系統(tǒng)
上新預告|將PCR實驗室裝進“箱子”里的自動化核酸提取檢測系統(tǒng)PART01PCR技術發(fā)展情況概覽人們研究核酸技術已經(jīng)有100多年的歷史,。第一代：1869年FridrichMiescher從膿細胞中提取“核質(zhì)”，從而打開了人類研究核酸的大門,。1953年Watson和Crick提出DNA雙螺旋結構模型,，為遺傳學進入分子水平奠定了基礎，也標志著分子生物學時代的開啟,。1984年11月,，Cetus公司的KaryMullis團隊正式完成了第一個PCR實驗。當時的PCR實驗因為所用的酶為不耐熱的Klenow酶 -
PART01PCR技術發(fā)展情況概覽人們研究核酸技術已經(jīng)有100多年的歷史。第一代：1869年FridrichMiescher從膿細胞中提取“核質(zhì)”,，從而打開了人類研究核酸的大門,。1953年Watson和Crick提出DNA雙螺旋結構模型，為遺傳學進入分子水平奠定了基礎,，也標志著分子生物學時代的開啟,。1984年11月，Cetus公司的KaryMullis團隊正式完成了第一個PCR實驗,。當時的PCR實驗因為所用的酶為不耐熱的Klenow酶,，只能在每次高溫變性后通過手動添加新的聚合酶以維系下次的擴增反
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動物疫病，指動物傳染病,、寄生蟲病,。據(jù)統(tǒng)計，我國已經(jīng)報告發(fā)生過的動物疫病超過300種,，全國每年報告發(fā)生動物疫病近100種,，發(fā)病畜禽約400萬頭（只、羽）,，病死畜禽約60萬頭（只,、羽）,，對畜禽養(yǎng)殖行業(yè)造成了巨大的損失。不論從產(chǎn)業(yè)發(fā)展的角度,，還是公共衛(wèi)生角度來看,，動物疫病的防控都需要提升到一定高度，必須引起人們的重視與關注,。大多數(shù)動物疫病沒有針對性的疫苗且治療手段不盡相同,，需要對疫病進行預防監(jiān)控和鑒別診斷。目前常用的技術手段分為“蛋白免疫法（ELISA,、膠體金）”和“核酸檢測法（熒光定量PCR）”,，其
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DNA甲基化是潛力的早篩及MRD的標志物,，基于NGS的甲基化檢測中,，重亞硫酸氫鹽轉化是DNA甲基化檢測的“金標準”，轉化率可達99.5%以上,，但重亞硫酸鹽處理會導致嚴重的DNA損傷,、片段化及解鏈。此外,，一些低質(zhì)量或嚴重降解的DNA（cfDNA,、ctDNA、FFPEDNA,、古生菌DNA等）中也含有大量的DNA單鏈,，采用常規(guī)雙鏈建庫,，文庫轉化效率較低,，測序數(shù)據(jù)質(zhì)量差。而單鏈建庫可以大幅提高DNA原始分子的利用率,，提高文庫的復雜性,，在低起始量樣本的甲基化文庫和基因組文庫構建中具有顯著的優(yōu)勢。圖1.甲基
