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漲知識 | qPCR專場六:一文讀懂qPCR文章金標準-MIQE
熒光定量PCR是實驗室中出鏡率非常高的一種檢測方法。該方法通過在PCR體系中添加熒光基團來記錄DNA產(chǎn)物的累積情況,從而達到對PCR過程進行實時監(jiān)控的目的,,并且可以通過數(shù)據(jù)分析計算出起始模板量,,這就是“熒光定量”中“定量”一詞的來源,。熒光定量PCR實驗因為靈敏度高所以經(jīng)常是差之毫厘謬以千里,,所以在實驗過程中,我們需要注意諸多細節(jié),,謹慎操作,。小伙伴們看到這里就要著急了,我怎樣才能做好qPCR實驗,,拿到實驗結(jié)果,,發(fā)表高分文章,走上人生巔呢,?日常在進行qPCR時,,需要注意多個操作細節(jié),有時稍不留意就會 -
膠原蛋白(Collagen)是結(jié)締組織和內(nèi)臟器官外基質(zhì)的主要成分,,比如I型膠原在骨、跟腱,、皮膚、血管壁中含量豐富,;II型膠原在透明軟骨中含量豐富,;III型膠原在皮膚、血管內(nèi)膜,、腸道中含量豐富,,彈性較好;IV型在晶狀體中含量豐富,;V型主要分布在皮膚和血管壁中等,。膠原蛋白在結(jié)構(gòu)和遺傳學上有不同類型,膠原蛋白由三個自身按左螺旋排列的多肽鏈構(gòu)成,,三條相互獨立的膠原蛋白肽鏈依靠甘氨酸之間形成的氫鍵維系三股螺旋相互纏繞的結(jié)構(gòu)[1],。商業(yè)上有天然和人工合成兩種不同的生產(chǎn)路徑,在醫(yī)療,、美容,、醫(yī)學和科學研究領(lǐng)域有
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復制型病毒(RCR/RCL)復制型病毒/病毒載體回復突變(ReplicationCompetentVirus,RCV),,可產(chǎn)生于病毒載體制造過程中的所有步驟當中。并且,,RCV感染宿主細胞后能隨宿主細胞在培養(yǎng)液中增殖,、擴增對人體健康具有嚴重的隱患,是免疫細胞治療類產(chǎn)品,如CAR-T產(chǎn)品的主要安全性風險之一,。近年來,,CAR-T細胞制備過程中,伴隨載體的不斷升級優(yōu)化,,重組產(chǎn)生的復制型逆轉(zhuǎn)錄病毒/慢病毒(ReplicationCompetentRetrovirus/Lentivirus,RCR/RCL)
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新品上市 | 通用型高靈敏一步RT-qPCR試劑,,省時高效,!
一步法RT-qPCR是常用的RNA分析方法之一。在一步RT-qPCR中,,反轉(zhuǎn)錄酶和DNA聚合酶預混于同一管內(nèi),,從而使得在單個反應中就可同時進行反轉(zhuǎn)錄和DNA擴增。相比于進行完反轉(zhuǎn)錄,,準備試劑配制熒光定量反應的兩步法而言,,一步RT-qPCR更加簡單快速,移液步驟更少,,污染的風險大大降低,,對于高通量實驗應用十分適宜。Hifair®AdvancedOneStepRT-qPCRSYBRGreenKit是一款基于SYBRGreenI染料進行熒光定量的試劑盒,。對于RNA樣本,,試劑盒采用耐熱Hifair®VR -
你在進行RNA建庫時,,是否遇到過這樣的困擾:RNA實驗時,有些試劑打開一股臭味襲來,,尤其是樣本很多時,,這酸爽簡直能把人帶走,讓人不得不懷疑這試劑是不是有毒性,;建庫試劑要求避光,,總不能全程黑燈熄火操作吧?這個毒性以及需要避光的罪魁禍首就是放線菌素D,。那么,,建庫試劑盒中為什么要加放線菌素D呢,?相關(guān)資料顯示,放線菌素D(ActinomycinD)又稱更生霉素,,分子中含有一個苯氧環(huán)結(jié)構(gòu),,通過它連接兩個等位的環(huán)狀肽鏈。此肽鏈可與DNA分子的脫氧鳥嘌呤發(fā)揮特異性相互作用,,使放線菌素D嵌入DNA雙螺旋的小溝中
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精品推薦 | 無需RNA提取,從細胞板直接獲得基因表達分析結(jié)果
精品推薦|無需RNA提取,,從細胞板直接獲得基因表達分析結(jié)果如果你想要快速,、簡便的進行細胞水平基因功能批量驗證;如果你的細胞珍貴不易獲取,,想一次性針對多目標基因表達分析,;如果你的起始細胞樣本稀少,希望樣本不被提取,、避免損失,;如果你的細胞目的基因表達水平低,希望多增加上樣量,、提高成功率,!Hieff®FastCellDirectProbeRT-qPCRKit針對細胞水平基因表達分析研究瓶頸設計,適用于對各種動物細胞直接進行RT-qPCR表達分析,,用時短,操作簡單,,出錯率低,,最短只需1.5小時就可高效完 -
基因編輯在免疫細胞治療中的應用1.基因編輯是什么,?基因編輯是通過人工核酸酶技術(shù)將靶基因或轉(zhuǎn)錄產(chǎn)物進行敲除,,插入等精確修飾的基因工程技術(shù)。目前基因編輯已經(jīng)在多個領(lǐng)域中有著重要的應用,,在腫瘤治療中主要與免疫治療相結(jié)合,,尤其在免疫細胞治療上有巨大的發(fā)展前景。2.基因編輯的分類,?目前的基因編輯技術(shù)有可編程的核酸酶技術(shù)和BE(Baseeditors)及PE(Primeeditors)技術(shù)(圖1),。圖1.基因編輯技術(shù)分類[1]可編程核酸酶主要包括鋅指核酸酶(ZFNs)和轉(zhuǎn)錄激活因子樣效應核酸酶(TALENs
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漲知識 | qPCR專場五:如何分析熒光定量數(shù)據(jù),?
漲知識|qPCR專場五:如何分析熒光定量數(shù)據(jù),?熒光定量PCR是實驗室中出鏡率非常高的一種檢測方法,。該方法通過在PCR體系中添加熒光基團來記錄DNA產(chǎn)物的累積情況,從而達到對PCR過程進行實時監(jiān)控的目的,,并且可以通過數(shù)據(jù)分析計算出起始模板量,,這就是“熒光定量”中“定量”一詞的來源。熒光定量PCR實驗因為靈敏度高所以經(jīng)常是差之毫厘謬以千里,,所以在實驗過程中,,我們需要注意諸多細節(jié),謹慎操作,。小伙伴們看到這里就要著急了,,我怎樣才能做好qPCR實驗,拿到實驗結(jié)果,,發(fā)表高分文章,,走上人生呢?熒光定量PCR可