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在使用傳統(tǒng)高保真酶進行PCR時,,難免會遇到一些棘手的問題,。例如保真度不夠,,擴增得到的片段測序后發(fā)現(xiàn)仍有目的堿基發(fā)生突變或缺失,。擴增的時間也相對漫長,有時擴增5kb的片段也要花費將近2個小時的時間?,F(xiàn)小翌推出一款快速高保真PCR以解決您的煩惱,!
2× Hieff Canace® AdvanceFast PCR Master Mix (With Dye) 預(yù)混液中含有預(yù)先添加的電泳指示劑,PCR產(chǎn)物可直接進行電泳,,擴增產(chǎn)物為平末端,。該產(chǎn)品具有快速簡便、靈敏度高,、特異性強,、穩(wěn)定性好等優(yōu)點,反應(yīng)體系中只需加入引物和模板即可,。另外,,該產(chǎn)品還含有特異保護劑,使得預(yù)混液反復(fù)凍融后仍可維持穩(wěn)定活性,。
2× Hieff Canace® AdvanceFast PCR Master Mix (With Dye)
超高保真:低錯配率,,高GC易突變序列中堿基錯配比231/300000;
擴增速度快:延伸速度快至5 sec/kb,;
適用性廣:可覆蓋20-80%GC含量的基因,,耐受小鼠裂解物和20%的血液;
穩(wěn)定性好:37℃下存放7d,,不影響產(chǎn)品性能,;
快速簡便:只需加入引物和模板即可進行擴增,帶有上樣染料,,可直接電泳,;
以不同物種基因組為模板,,選取6段GC rich,、極易發(fā)生堿基突變/丟失的片段進行擴增,將各自PCR產(chǎn)物克隆至載體,,并對每種序列挑取100個單克隆進行測序以確認堿基序列錯配/突變情況,。結(jié)果顯示10164ES發(fā)生堿基錯配/突變的比例優(yōu)于國內(nèi)外品牌試劑。
使用10164ES和T產(chǎn)品均以5 sec/kb的延伸速度從100 ng人基因組模板擴增不同長度片段(0.4-10 kb),延伸時間均要求為5 sec/kb,。結(jié)果顯示,,10164ES在10kb以內(nèi)的片段均可以5 sec/kb的延伸速度擴增。Marker: Yeasen 10510ES,。
使用10164ES從人gDNA模板中擴增23-76% GC含量片段,,延伸時間設(shè)置5 sec/kb。結(jié)果顯示,,產(chǎn)品擴增特異性良好,,能兼容不同GC含量片段擴增。Marker: Yeasen 10510ES,。
使用10164ES從不同樣本中擴增不同長度片段,,延伸時間設(shè)置5-10 sec/kb。結(jié)果顯示本產(chǎn)品擴增特異性良好,,能兼容不同模板的不同片段擴增,。
注:1.小鼠gDNA 1 kb;2.小鼠gDNA 2 kb,;3.小鼠gDNA 6 kb,;4.玉米gDNA 1 kb;5.水稻gDNA 2 kb-A,;6.水稻gDNA 2 kb-B,;7.人293細胞cDNA 1 kb;8.人293細胞cDNA 2 kb ,;9.人293細胞cDNA 3 kb,;10.人293細胞cDNA 12 kb;11.大腸桿菌菌液8 kb,;12.大腸桿菌菌液16 kb,;13.水稻gDNA 10 kb-A;14.水稻gDNA 10 kb-B,;15.水稻gDNA 10 kb-C,;16.水稻gDNA 20 kb-A;17.水稻gDNA 20 kb-B,;18.人血液直擴3 kb,。Marker: Yeasen 10510ES
用10164ES分別對擬南芥、油菜,、馬鈴薯0.5-10 kb 不同GC含量的片段進行擴增,,延伸時間5 sec/kb,結(jié)果顯示10164ES可保證擴增,。Marker: Yeasen 10510ES,。
用10164ES分別對擬南芥,、油菜、果蠅,、秀麗線蟲和斑馬魚中隨機序列(序列隨機拉取),,0.5-10kb覆蓋20-80%GC含量的片段進行擴增,延伸時間5 sec/kb,,結(jié)果顯示10164ES檢出率高,。
使用37℃熱加速放置3 d和7 d的10164ES分別擴增100 ng人基因組中3 kb和5 kb的DNA片段,,延伸時間設(shè)置5 sec/kb,。結(jié)果顯示產(chǎn)品具有不錯的穩(wěn)定性。Marker: Yeasen 10510ES,。
客戶評價:PCR過程速度快,,條帶合適,,可在瓊脂糖電泳中直接上樣,。進口N品牌的條帶偏上,可能是自身的buffer影響,,且未添加loading buffer,,該產(chǎn)品可替代目前我的實驗方案中的高保真酶。
客戶評價:與進口T品牌相比,,克隆條帶更加清晰單一,,整個PCR時間也更快,跑膠時不用再額外加染料,,非常方便快捷,。
客戶評價:與國產(chǎn)V品牌相比,,效果相當,個人感覺更佳,。
客戶評價:效果很好,,條帶清楚。
10163ES01-無電泳指示劑
10164ES-含電泳指示劑
產(chǎn)品定位 | 產(chǎn)品名稱 | 貨號 | 規(guī)格 |
5s/kb,,保真???無上樣染料) | 2× Hieff Canace® AdvanceFast PCR Master Mix | 10163ES03 | 1 mL |
5s/kb,保真???含上樣染料) | 2× Hieff Canace® AdvanceFast PCR Master Mix (With Dye) | 10164ES03 | 1 mL |
平末端拓撲克隆 | Hieff Clone® Zero TOPO-Blunt Cloning Kit | 10909ES20 | 20 T |
平末端拓撲克隆,,不含多克隆位點 | Hieff Clone® Zero TOPO-Blunt Simple Cloning Kit | 10910ES20 | 20 T |
單片段同源重組克隆 | Hieff Clone® Plus One Step Cloning Kit | 10911ES20/50 | 20/50 T |
單多片段通用同源重組 | Hieff Clone® Universal One Step Cloning Kit | 10922ES20/50 | 20/50 T |
常規(guī)克隆感受態(tài) | 10 Chemically Competent Cell | 11801ES80 | 10×100μL |
常規(guī)克隆感受態(tài) | DH5α Chemically Competent Cell | 11802ES80 | 10×100 μL |
快速克隆感受態(tài) | DH5α Fast Chemically Competent Cell | 11803ES80 | 10×100 μL |
常規(guī)克隆感受態(tài) | BL21(DE3) Chemically Competent Cell | 11804ES80 | 10×100 μL |
快速PCR | 2×Hieff® Ultra-Rapid HotStart PCR Master Mix(with Dye) | 10157ES03/08 | 1/5×1 mL |
常規(guī)條帶分離 | Agarose瓊脂糖 | 10208ES60 | 100 g |
翌圣生物科技(上海)股份有限公司 - 主營產(chǎn)品: 抗體,小分子抑制劑,熒光染料,干細胞培養(yǎng),血清
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