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微生物學(xué)技術(shù)：紫外線滅菌實(shí)驗(yàn)
標(biāo)簽：紫外線滅菌紫外線滅菌是用紫外線燈進(jìn)行的，波長為200~300nm的紫外線都有殺菌能力,，其中以260nm的殺菌力zui強(qiáng),。在波長一定的條件下，紫外線的殺菌效率與強(qiáng)度和時間的乘積成正比,。紫外線殺菌機(jī)制主要是因?yàn)樗T導(dǎo)了胸腺嘧啶二聚體的形成,，從而抑制了DNA的復(fù)制。實(shí)驗(yàn)方法紫外線滅菌實(shí)驗(yàn)方法原理由于輻射能使空氣中的氧電離成［O］,，再使O2氧化生成臭氧（O3）或使水（H2O）氧化生成過氧化氫（H2O2）,，O3和H2O2均有殺菌作用。紫外線穿透力不大,，所以,，只適用于無菌室、接種箱,、手術(shù)室內(nèi)的空氣及物 -
微生物學(xué)技術(shù)：用比濁法測定大腸桿菌的生長曲線
(一)實(shí)驗(yàn)?zāi)康牧私饧?xì)菌生長曲線的持點(diǎn)及測定原理,，學(xué)會用比濁法測定細(xì)菌的生長曲線。(二)實(shí)驗(yàn)原理將一定數(shù)量的細(xì)菌,，接種于適宜的液體培養(yǎng)基中,，在適溫下培養(yǎng)，定時取樣測數(shù),，以菌數(shù)的對數(shù)為縱坐標(biāo),，生長時間為橫坐標(biāo)，作出的曲線稱為生長曲線,。該曲線表明細(xì)菌在一定的環(huán)境條件下群體生長與繁殖的規(guī)律,。一般分為延緩期、對數(shù)期,、穩(wěn)定期及衰亡期四個時期,，各時期的長短同菌種本身特征、培養(yǎng)基成分和培養(yǎng)條件不同而異,。比濁法是根據(jù)細(xì)菌懸液細(xì)胞數(shù)與混濁度成正比,，與透光度成反比關(guān)系，利用光電比色計(jì)測定細(xì)胞懸液的光密度(即OD值),， -
PCR法是20世紀(jì)80年代中期建立起來的一種體外DNA擴(kuò)增技術(shù),，其基本原理是酶促DNA合成反應(yīng)，即在DNA模板,、引物和脫氧核糖核酸存在下,，經(jīng)DNA聚合酶的作用,，使DNA鏈擴(kuò)增延伸。該方法具有靈敏度高,、特異性強(qiáng),、快速的特點(diǎn)，但其對實(shí)驗(yàn)環(huán)境的要求嚴(yán)格,，實(shí)驗(yàn)成本較高,，有時還有假陽性的現(xiàn)象出現(xiàn)。1,、儀器設(shè)備超凈工作臺,、PCR儀、電泳儀,、凝膠成像分析系統(tǒng),、臺式離心機(jī)、旋渦混懸器等,。2,、實(shí)驗(yàn)試劑選用美國Stratagene公司生產(chǎn)的支原體檢測試劑盒（內(nèi)有引物、陽性對照,、內(nèi)對照,、StrataCleanresi
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微生物學(xué)技術(shù)：高壓蒸汽滅菌實(shí)驗(yàn)
標(biāo)簽：高壓蒸汽滅菌高壓蒸汽滅菌是將待滅菌的物品放在一個密閉的加壓滅菌鍋內(nèi)，通過加熱,，使滅菌鍋隔套間的水沸騰而產(chǎn)生蒸汽,。待水蒸汽急劇地將鍋內(nèi)的冷空氣從排氣閥中驅(qū)盡，然后關(guān)閉排氣閥,，繼續(xù)加熱,，此時由于蒸汽不能溢出，而增加了滅菌器內(nèi)的壓力,，從而使沸點(diǎn)增高，得到高于100℃的溫度,。導(dǎo)致菌體蛋白質(zhì)凝固變性而達(dá)到滅菌的目的,。實(shí)驗(yàn)方法高壓蒸汽滅菌實(shí)驗(yàn)實(shí)驗(yàn)方法原理在使用高壓蒸汽滅菌鍋滅菌時，滅菌鍋內(nèi)冷空氣的排除是否*極為重要,，因?yàn)榭諝獾呐蛎泬捍笥谒羝呐蛎泬?，所以，?dāng)水蒸汽中含有空氣時,，在同一壓力下,，含空氣蒸 -
微生物學(xué)技術(shù)：微生物的接種,、分離和培養(yǎng)
一,、目的要求1,、掌握各種分離、接種方法,。2,、掌握無菌操作基本環(huán)節(jié)。二,、實(shí)驗(yàn)說明微生物在自然界中呈混雜狀態(tài)存在,，要獲得所需菌種，必需從中把它們分離出來,。在保存菌種時不慎受到到污染也需予以分純,。微生物分離和純化的方法很多，但基本原理卻是相似的,，即將待分離的樣品進(jìn)行一定的稀釋,，并使微生物的細(xì)胞（或孢子）盡量以分散狀態(tài)存在，然后使其長成一個個純種單菌落,。然而上述工作又離不開接種,，即將一種微生物移到另一滅過菌的培養(yǎng)基上的過程。三,、實(shí)驗(yàn)材料1、恒溫培養(yǎng)箱,。2,、接種環(huán),、玻璃棒,、吸管,、酒精燈。3,、培養(yǎng)基（上次實(shí) -
微生物學(xué)技術(shù)：微生物鑒定中常用的生化反應(yīng)
實(shí)驗(yàn)原理有些細(xì)菌具有合成淀粉酶的能力,，可以分泌胞外淀粉酶。淀粉酶可以使淀粉水解為麥芽糖和葡萄糖,，淀粉水解后遇碘不再變藍(lán)色,。細(xì)菌產(chǎn)生的脂肪酶能分解培養(yǎng)基中的脂肪生成甘油及脂肪酸,。脂肪酸可以使培養(yǎng)基pH下降，可通過在油脂培養(yǎng)基中加入中性紅做指示劑進(jìn)行測試。中性紅指示范圍為pH6.8（紅）～8.0（黃）,。當(dāng)細(xì)菌分解脂肪產(chǎn)生脂肪酸時，則菌落周圍培養(yǎng)基中出現(xiàn)紅色斑點(diǎn),。某些細(xì)菌分泌蛋白酶分解明膠，產(chǎn)生小分子物質(zhì),。如果細(xì)菌具有分解明膠的能力，則培養(yǎng)基可由原來固體狀態(tài)變成液體狀態(tài),。牛乳中主要含有乳糖、酪蛋白等成 -
微生物學(xué)技術(shù):微生物的分離純化及稀釋平板菌落計(jì)數(shù)
實(shí)驗(yàn)原理稀釋平板測數(shù)是根據(jù)微生物在高度稀釋條件下固體培養(yǎng)基上所形成的單個菌落是由一個單細(xì)胞繁殖而成這一培養(yǎng)特征設(shè)計(jì)的計(jì)數(shù)方法，即一個菌落代表一個單細(xì)胞,。計(jì)數(shù)時,，首先將待測樣品制成均勻的繁殖稀釋液，盡量使樣品中的微生物細(xì)胞分散開，使其成單個細(xì)胞存在,，否則一個菌落就不只是代表一個細(xì)胞,，再取一定稀釋度,、一定量的稀釋液接種到平板中,，使其均勻分布于平板中的培養(yǎng)基內(nèi),。經(jīng)培養(yǎng)后,，由單個細(xì)胞生長繁殖形成菌落,，統(tǒng)計(jì)菌落數(shù)目,，即可計(jì)算出樣品中的含菌數(shù)。此記數(shù)方法所計(jì)算的菌數(shù)是培養(yǎng)基上長出來的菌落數(shù)，故又稱活菌計(jì)數(shù),。 -
免疫學(xué)技術(shù)專題：非標(biāo)記抗體免疫電鏡技術(shù)
一、原理標(biāo)記抗體法雖然具有許多優(yōu)點(diǎn),，但也存在一些難以克服的問題,，如標(biāo)記抗體的分子增大，對細(xì)胞膜和組織的穿透力減弱,；化學(xué)交聯(lián)反應(yīng)對抗體和酶的活性有所影響,；結(jié)合物中未標(biāo)記的抗體可與抗原競爭結(jié)合，影響檢測方法的敏感性等,。不標(biāo)記抗體法可以避免上述的不利影響因素,，通過一系統(tǒng)的非標(biāo)記抗體的免疫學(xué)反應(yīng),，對組織中的抗原進(jìn)行定位檢測,。不標(biāo)記抗體法又可分為用標(biāo)記物顯示和不同標(biāo)記物顯示兩種方法,。前者利用基因工程方法制備雙特異性抗體的F(ab′)2,，一個Fab片段與標(biāo)本中的抗原結(jié)合,，一個Fab是抗體蛋白的結(jié)合片段。在抗
