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一、轉(zhuǎn)染效率低影響轉(zhuǎn)染效率因素很多,,主要因素有細(xì)胞培養(yǎng)物,、血清,、載體構(gòu)建,、DNA質(zhì)量以及轉(zhuǎn)染技術(shù)等,。1.沒(méi)有使用優(yōu)化條件:優(yōu)化陽(yáng)離子脂質(zhì)體試劑和DNA的量,。2.DNA-陽(yáng)離子脂質(zhì)體試劑復(fù)合物在存在血清...
①有些情況下結(jié)合蛋白質(zhì)能與有毒金屬和熱原質(zhì)結(jié)合,,起到解毒作用,。②是細(xì)胞貼壁、鋪展在塑料培養(yǎng)基質(zhì)上所需因子來(lái)源,。③提供結(jié)合蛋白,,能識(shí)別維生素、脂類(lèi),、金屬和其他激素等,,能結(jié)合或調(diào)變它們所結(jié)合的物質(zhì)活力。④...
2013年諾貝爾獎(jiǎng)中,美國(guó)科學(xué)家詹姆斯·羅斯曼等三人發(fā)現(xiàn)了細(xì)胞的囊泡運(yùn)輸調(diào)控機(jī)制,,外泌體是囊泡的其中一種,。外泌體(exosomes)是一種能被機(jī)體內(nèi)大多數(shù)細(xì)胞分泌的微小膜泡,具有脂質(zhì)雙層膜結(jié)構(gòu),,直徑大...
DMEM高糖培養(yǎng)基DMEM高糖培養(yǎng)基是在MEM培養(yǎng)基基礎(chǔ)上改良而來(lái),,目前已廣泛應(yīng)用于各種細(xì)胞的培養(yǎng)。DMEM高糖培養(yǎng)基普遍應(yīng)用于生長(zhǎng)快,、粘附性低的細(xì)胞,。可用于多種哺乳動(dòng)物原代細(xì)胞的培養(yǎng),,例如原代成纖維...
原代細(xì)胞生長(zhǎng)緩慢,一般認(rèn)為,,原代細(xì)胞培養(yǎng)的第1代和傳代到第10代以?xún)?nèi)統(tǒng)稱(chēng)為原代培養(yǎng),。原代培養(yǎng)的細(xì)胞一般傳至10代左右就不容易傳下去了,細(xì)胞的生長(zhǎng)會(huì)出現(xiàn)停滯,,大部分細(xì)胞衰老死亡,。但是有極少數(shù)的細(xì)胞能夠度...
培養(yǎng)基變渾濁的原因可能有如下幾點(diǎn):1、細(xì)胞存在污染,,污染早期可以見(jiàn)到細(xì)胞生長(zhǎng),;2、不排除傳代時(shí)細(xì)胞密度過(guò)大,,或者操作不當(dāng)導(dǎo)致多數(shù)細(xì)胞不貼壁,,大量細(xì)胞漂浮。3,、細(xì)胞破碎,。細(xì)胞培養(yǎng)中常見(jiàn)的生物污染類(lèi)型有7...
一、血清滅活的目的是什么,?1,、血清熱滅活目的主要是為了去除血清中補(bǔ)體等對(duì)熱敏感的物質(zhì),但是在胎牛血清中對(duì)補(bǔ)體的滅活則明顯沒(méi)有必要,。2,、實(shí)驗(yàn)員曾對(duì)商業(yè)胎牛血清中的補(bǔ)體成分進(jìn)行測(cè)定,他們發(fā)現(xiàn)胎牛血清中含有...
1,、計(jì)算稱(chēng)量根據(jù)待檢樣品屬性計(jì)算出所需的不同培養(yǎng)基的體積,,根據(jù)說(shuō)明書(shū)進(jìn)行準(zhǔn)確稱(chēng)量;電子天平需開(kāi)機(jī)預(yù)熱30min后使用,,稱(chēng)量過(guò)程中手要穩(wěn),,避免將培養(yǎng)基灑落在天平稱(chēng)量盤(pán)中,若灑落,,應(yīng)立即停止稱(chēng)量,,使用潔凈...
ECL化學(xué)化學(xué)發(fā)光底物(超敏)可為使用辣根過(guò)氧化物酶(HRP)偶聯(lián)物的免疫印跡實(shí)驗(yàn)提供明亮的信號(hào)和低皮克級(jí)檢測(cè)靈敏度。該ECL底物能夠兼容各種膜,、封閉液和寬范圍抗體稀釋液,,以出色性能、通用性和高性?xún)r(jià)比...
牛血清白蛋白(BSA)是牛血清中的一種球蛋白,包含607個(gè)氨基酸殘基,,分子量為66.446KDa,,等電點(diǎn)為4.7,。應(yīng)用:牛血清白蛋白(BSA)在生化實(shí)驗(yàn)中有廣泛的應(yīng)用,例如在WB實(shí)驗(yàn)中加入BSA,,通過(guò)...
無(wú)論是原代培養(yǎng)還是細(xì)胞系的傳代培養(yǎng),,一旦培養(yǎng)開(kāi)始,就要定期更換或補(bǔ)充培養(yǎng)基,。如果細(xì)胞持續(xù)增殖,,隨后遲早要進(jìn)行傳代培養(yǎng)。對(duì)干不增殖的培養(yǎng)物,,也需要定期更換培養(yǎng)基,,因?yàn)榧?xì)胞仍會(huì)代謝,培養(yǎng)基的某些成分會(huì)耗盡...
體外培養(yǎng)動(dòng)物細(xì)胞已經(jīng)有近百年的歷史,,但該技術(shù)真正得以廣泛應(yīng)用及各種類(lèi)型組織細(xì)胞大量體外培養(yǎng)成功是由于適合細(xì)胞體外生長(zhǎng)需要的合成培養(yǎng)基的問(wèn)世,。合成培養(yǎng)基是對(duì)細(xì)胞體內(nèi)生存環(huán)境中各種已知物質(zhì)在體外人工條件下...
pH緩沖液是確保pH測(cè)量值精確的重要因素。標(biāo)準(zhǔn)緩沖液用于校準(zhǔn)pH傳感器和檢查其性能,。pH緩沖液的緩沖能力是其重要的屬性,。即使將外部物質(zhì)加入緩沖液中,這一屬性仍可使pH緩沖液保持恒定的pH值,。pH緩沖液...
酪蛋白是哺乳動(dòng)物包括母牛,,羊和人奶中的主要蛋白質(zhì),又稱(chēng):干酪素,、酪朊,、乳酪素。α-酪蛋白是哺乳動(dòng)物的主要蛋白,,人乳中沒(méi)有α-酪蛋白,,以β-酪蛋白為主要酪蛋白形式。酪蛋白對(duì)幼兒既是氨基酸的來(lái)源,,也是鈣和...
環(huán)境因素1.無(wú)菌環(huán)境無(wú)毒和無(wú)菌是體外培養(yǎng)細(xì)胞的首要條件,。細(xì)胞在活體內(nèi),,解毒系統(tǒng)和免疫系統(tǒng)可抵抗微生物或其他有害物質(zhì)的入侵,但細(xì)胞在體外培養(yǎng)的過(guò)程中,,缺乏機(jī)體免疫系統(tǒng)的保護(hù)而喪失對(duì)微生物的防御能力和對(duì)有...
細(xì)胞培養(yǎng)(cellculture)是指在體外模擬體內(nèi)環(huán)境(無(wú)菌,、適宜溫度,、酸堿度和一定營(yíng)養(yǎng)條件等),,使之生存、生長(zhǎng),、繁殖并維持主要結(jié)構(gòu)和功能的一種方法,。細(xì)胞培養(yǎng)也叫細(xì)胞克隆技術(shù),在生物學(xué)中的正規(guī)名詞為...
1.提供細(xì)胞生長(zhǎng)所需的天然激素或天然生長(zhǎng)因子,如胰島素,、IGFII等。2.提供天然的結(jié)合蛋白如胎球蛋白,、白蛋白等,,能識(shí)別氨基酸、脂質(zhì),、金屬離子和激素等,,能結(jié)合并調(diào)節(jié)它們的活性。胎球蛋白(Fetuin)...
胎牛血清是細(xì)胞培養(yǎng)中用量最大的天然培養(yǎng)基,含有豐富的細(xì)胞生長(zhǎng)必須的營(yíng)養(yǎng)成份,,常用于動(dòng)物細(xì)胞的體外培養(yǎng),,具有極為重要的功能。1.提供對(duì)維持細(xì)胞指數(shù)生長(zhǎng)的激素,,基礎(chǔ)培養(yǎng)基中沒(méi)有或量很少的營(yíng)養(yǎng)物,,以及主要的...
一、標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)監(jiān)控質(zhì)控過(guò)程通常的做法是實(shí)驗(yàn)室直接用合適的有證標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)或內(nèi)部標(biāo)準(zhǔn)樣品作為監(jiān)控樣品,,定期或不定期將監(jiān)控樣品以比對(duì)樣或密碼樣的形式,,與樣品檢測(cè)以相同的流程和方法同時(shí)進(jìn)行,檢測(cè)室完成后上報(bào)檢測(cè)結(jié)...
1,、計(jì)算稱(chēng)量根據(jù)待檢樣品屬性計(jì)算出所需的不同培養(yǎng)基的體積,,根據(jù)說(shuō)明書(shū)進(jìn)行準(zhǔn)確稱(chēng)量;電子天平需開(kāi)機(jī)預(yù)熱30min后使用,,稱(chēng)量過(guò)程中手要穩(wěn),,避免將培養(yǎng)基灑落在天平稱(chēng)量盤(pán)中,若灑落,,應(yīng)立即停止稱(chēng)量,,使用潔凈...
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