1,、計算稱量
根據(jù)待檢樣品屬性計算出所需的不同培養(yǎng)基的體積，根據(jù)說明書進行準(zhǔn)確稱量,；電子天平需開機預(yù)熱30min后使用,，稱量過程中手要穩(wěn)，避免將培養(yǎng)基灑落在天平稱量盤中,，若灑落，應(yīng)立即停止稱量,，使用潔凈布擦干粉末,，重新調(diào)“0"后稱量。

2,、溶化
對于可溶性淀粉,先用少量冷水調(diào)成糊狀,再放入沸水中,；不易溶解的培養(yǎng)基,，先加入少量純化水振搖溶解后，二次加水配制,；需分裝的培養(yǎng)基,，需完quan溶解，含瓊脂的培養(yǎng)基需加熱融化,，完quan溶解后,，分裝至不同容器中進行滅菌。

3,、分裝
如果要制作斜面培養(yǎng)基,，須將培養(yǎng)基分裝于試管中。如果要制作平板培養(yǎng)基或液體,、半固體培養(yǎng)基,，則須將培養(yǎng)基分裝于錐形瓶內(nèi)。分裝時,，一手捏松彈簧夾,，使培養(yǎng)基流出，另一只手握住幾支試管或錐形瓶,，依次接取培養(yǎng)基,。分裝時，注意不要使培養(yǎng)基粘附管口或瓶口,，以免引起雜菌污染,。裝入試管的培養(yǎng)基量，視試管和錐形瓶的大小及需要而定,。一般制作斜面培養(yǎng)基時,，每只15×150毫米的試管，約裝3～4毫升（1/4～1/3試管高度）,，如制作深層培養(yǎng)基,，每只20×220毫米的試管約裝12～15毫升。

4,、加塞
分裝完畢后,，需要用硅膠塞堵住管口或瓶口。主要目的是過濾空氣,，避免污染,。不要用脫脂棉，以免因脫脂棉吸水使棉塞無法使用,。塞入管口或瓶口中的硅膠塞,，應(yīng)緊貼內(nèi)壁不留縫隙，以防空氣中微生物沿褶皺侵入，塞好后,，以手提塞,，管、瓶不下落為合適,；硅膠塞的2/3應(yīng)在管內(nèi),，上端露出少許便于拔取。

5,、包扎
塞好塞的試管和錐形瓶應(yīng)蓋上牛皮紙用繩扎緊,，同時貼上標(biāo)簽，注明培養(yǎng)基的名稱,、組別,、配制日期后，準(zhǔn)備滅菌,。

6,、滅菌
根據(jù)培養(yǎng)基說明書規(guī)定的滅菌參數(shù)進行滅菌。滅菌后,，如制作斜面培養(yǎng)基和平板培養(yǎng)基,，須趁培養(yǎng)基未凝固時進行。