1、計算稱量

根據(jù)待檢樣品屬性計算出所需的不同培養(yǎng)基的體積,，根據(jù)說明書進行準(zhǔn)確稱量,；電子天平需開機預(yù)熱30min后使用，稱量過程中手要穩(wěn),，避免將培養(yǎng)基灑落在天平稱量盤中,，若灑落，應(yīng)立即停止稱量，使用潔凈布擦干粉末,，重新調(diào)“0"后稱量,。

2、溶化

對于可溶性淀粉,先用少量冷水調(diào)成糊狀,再放入沸水中,；不易溶解的培養(yǎng)基,，先加入少量純化水振搖溶解后，二次加水配制,；需分裝的培養(yǎng)基,，需溶解，含瓊脂的培養(yǎng)基需加熱融化,，溶解后,，分裝至不同容器中進行滅菌。

3,、分裝

如果要制作斜面培養(yǎng)基，須將培養(yǎng)基分裝于試管中,。如果要制作平板培養(yǎng)基或液體,、半固體培養(yǎng)基，則須將培養(yǎng)基分裝于錐形瓶內(nèi),。分裝時,，一手捏松彈簧夾，使培養(yǎng)基流出,，另一只手握住幾支試管或錐形瓶,，依次接取培養(yǎng)基。分裝時,，注意不要使培養(yǎng)基粘附管口或瓶口,，以免引起雜菌污染。裝入試管的培養(yǎng)基量,，視試管和錐形瓶的大小及需要而定,。一般制作斜面培養(yǎng)基時，每只15×150毫米的試管,，約裝3～4毫升（1/4～1/3試管高度）,，如制作深層培養(yǎng)基，每只20×220毫米的試管約裝12～15毫升,。

4,、加塞

分裝完畢后，需要用硅膠塞堵住管口或瓶口,。主要目的是過濾空氣,，避免污染。不要用脫脂棉，以免因脫脂棉吸水使棉塞無法使用,。塞入管口或瓶口中的硅膠塞,，應(yīng)緊貼內(nèi)壁不留縫隙，以防空氣中微生物沿褶皺侵入,，塞好后,，以手提塞，管,、瓶不下落為合適,；硅膠塞的2/3應(yīng)在管內(nèi)，上端露出少許便于拔取,。

5,、包扎

塞好塞的試管和錐形瓶應(yīng)蓋上牛皮紙用繩扎緊，同時貼上標(biāo)簽,，注明培養(yǎng)基的名稱,、組別、配制日期后,，準(zhǔn)備滅菌,。

6、滅菌

根據(jù)培養(yǎng)基說明書規(guī)定的滅菌參數(shù)進行滅菌,。滅菌后,，如制作斜面培養(yǎng)基和平板培養(yǎng)基，須趁培養(yǎng)基未凝固時進行,。