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在細(xì)胞實驗中血清熱滅活的作用和意義

時間:2023-3-31閱讀:888

一、血清滅活的目的是什么,?
1,、血清熱滅活目的主要是為了去除血清中補(bǔ)體等對熱敏感的物質(zhì),但是在胎牛血清中對補(bǔ)體的滅活則明顯沒有必要,。
2,、實驗員曾對商業(yè)胎牛血清中的補(bǔ)體成分進(jìn)行測定,他們發(fā)現(xiàn)胎牛血清中含有的C1,、C6僅達(dá)成年動物血清的1-3%,,而其它補(bǔ)體成分僅有成年動物的5-50%,至于補(bǔ)體的主要成分C3在胎牛血清中則幾乎不能檢出,。通過補(bǔ)體固定實驗,,也未發(fā)現(xiàn)有明顯的溶血現(xiàn)象。多數(shù)實驗室在培養(yǎng)前將培養(yǎng)液進(jìn)行預(yù)熱的過程,,也對熱敏的補(bǔ)體有滅活的作用,。
3、熱滅活另一個目的是為了使支原體失活,。
 
二,、血清使用前是否都必須熱滅活?
1,、在免疫學(xué)研究,、培養(yǎng)ES細(xì)胞、昆蟲細(xì)胞和平滑肌細(xì)胞時,,推薦使用熱滅活血清,。而對于其他大多數(shù)的細(xì)胞來說是不需要熱滅活血清的。
2,、很多情況下,,熱滅活并不會改善細(xì)胞的生長,反而會降低了支持細(xì)胞生長的能力。即使在少數(shù)有促進(jìn)的情況下,,其促進(jìn)的比率也是微不足道,。另外,血清的熱滅活導(dǎo)致的沉淀常常被認(rèn)為是微生物污染,,從而給用戶帶來不必要的麻煩,。
3、我司建議,,對血清進(jìn)行滅活的用戶,,需要通過試驗來證實其必要性。
 
三,、血清熱滅活應(yīng)該怎么操作,?
1、融化血清,,并充分混勻其內(nèi)容物,。
2、對照瓶裝等量水,,插入溫度計,。
3,、將血清瓶和對照瓶放入56℃水浴箱,。
4、當(dāng)溫度達(dá)到56℃,,立即開始計時,。
5、每5分鐘,,旋轉(zhuǎn)血清瓶一次,,輕微規(guī)則搖晃,以使瓶中血清受熱均勻一致,。656℃,,30分鐘后,立刻去除血清,。
注意事項:血清滅活時,,避免接觸到加熱管,防止受熱不均勻,,導(dǎo)致滅活失敗,,血清滅活后,冷水浴冷卻,。
 
四,、為什么血清滅活后產(chǎn)生大量沉淀?
1,、血清滅活后出現(xiàn)的沉淀大多數(shù)是纖維蛋白析出,,屬正?,F(xiàn)象。滅活過程多次搖晃使血清受熱均勻可以降低蛋白的析出,。
2,、當(dāng)血清在未化凍狀態(tài)時直接置56℃水浴、滅活過程中局部受熱過高,、加熱時間過長就會產(chǎn)生膠狀沉淀,,這樣的血清質(zhì)量嚴(yán)重受損,是無法繼續(xù)正常使用的,。

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