PRM技術在低豐度蛋白質(zhì)定量中的優(yōu)勢與挑戰(zhàn)檢測技術服務詳情介紹

在dànbáizhì組學研究中，低豐度dànbáizhì的jīngzhǔn定量對于疾病早期標志物發(fā)現(xiàn),、藥物靶點驗證以及復雜信號通路解析至關重要,。然而，常規(guī)數(shù)據(jù)依賴采集（DDA）方法在面對復雜樣本背景和極低豐度目標分子的情況下,，往往存在檢測靈敏度不足,、重現(xiàn)性差的問題。近年來,，PRM技術（Parallel Reaction Monitoring）因其高選擇性,、高重現(xiàn)性和高通量特性，在靶向低豐度dànbáizhì定量分析中受到廣泛關注,。本文將系統(tǒng)解析PRM在低豐度dànbáizhì檢測中的技術優(yōu)勢與現(xiàn)實挑戰(zhàn),，并分享百泰派克生物科技在該領域的應用經(jīng)驗與技術平臺。

一,、PRM技術概述：從SRM到PRM的演進

PRM技術是在傳統(tǒng)的選擇反應監(jiān)測（SRM/MRM）基礎上發(fā)展而來的高分辨率靶向質(zhì)譜技術,。核心原理是在高分辨Orbitrap或TOF質(zhì)譜儀上，全程監(jiān)測目標肽段的所有碎片離子,，提高了定量準確性與特異性,。

二、PRM技術的低豐度dànbáizhì定量優(yōu)勢及挑戰(zhàn)

PRM是一種建立在高分辨率質(zhì)譜平臺（如Orbitrap）基礎上的靶向定量方法,，其工作流程包括：通過LC-MS系統(tǒng)選擇特定母離子（precursor）,，隨后對其所有碎片離子（product ions）進行全掃描采集。在數(shù)據(jù)處理階段,，研究者可根據(jù)碎片圖譜自由選擇zuì具代表性的離子用于定量,，提高了方法的靈活性與特異性。

1,、關鍵優(yōu)勢包括：

（1）高分辨率與質(zhì)量準確性：Orbitrap系統(tǒng)可提供ppm級質(zhì)量精度,，顯著提升目標離子識別能力。

（2）無需預定義過渡離子：與SRM不同,，PRM技術可后期靈活選擇用于低豐度dànbáizhì定量的碎片,，提高分析深度和結(jié)果穩(wěn)健性,。

（3）適用于復雜基質(zhì)樣本：高選擇性有助于降低背景干擾，尤其適用于血漿,、腦脊液等高動態(tài)范圍樣本,。

2、PRM具有天然優(yōu)勢,，但在低豐度dànbáizhì定量檢測中仍面臨多重技術瓶頸：

（1）靶標肽段響應性差：部分dànbáizhì肽段本身離子化效率低,，易受基質(zhì)抑制，難以形成穩(wěn)定信號,。

（2）樣本復雜性干擾檢測：血漿中dànbáizhì濃度跨12個數(shù)量級,，目標肽段信號易被高豐度蛋白遮蔽。

（3）方法重現(xiàn)性與線性范圍限制：在飛摩爾（fmol）以下濃度范圍內(nèi),，實現(xiàn)跨批次,、跨樣本的穩(wěn)定檢測，需要高度優(yōu)化的分析條件與嚴格質(zhì)控,。

（4）數(shù)據(jù)分析復雜度高：盡管Skyline等工具可視化良好,，但高質(zhì)量的數(shù)據(jù)解讀仍依賴經(jīng)驗豐富的質(zhì)譜分析人員，尤其在背景干擾明顯時,。

百泰派克生物科技集成Orbitrap Exploris 480高分辨質(zhì)譜系統(tǒng)，結(jié)合深度優(yōu)化的靶向dànbáizhì組學流程,，為科研與臨床轉(zhuǎn)化提供靈敏,、準確、可重復的PRM定量服務,。百泰派克生物科技集成靶標設計,、方法開發(fā)、樣本處理與數(shù)據(jù)分析全流程能力,。我們特別針對低豐度蛋白開發(fā)了高靈敏度PRM定量流程,，適用于：

• 疾病相關生物標志物驗證（如早期腫瘤、神經(jīng)退行性疾?。?/p>

• 藥效評價與機制研究中的靶點動態(tài)追蹤

• 多中心臨床樣本中的標準化PRM分析

PRM技術為低豐度dànbáizhì定量的高靈敏度檢測提供了可能,，尤其在生物標志物驗證與臨床前研究中展現(xiàn)巨大潛力。未來,，隨著質(zhì)譜技術與數(shù)據(jù)算法的進一步融合,，PRM將在jīngzhǔn醫(yī)療領域扮演更加核心的角色。百泰派克生物科技將持續(xù)推動這一前沿技術的應用,，為生命科學研究注入更多可能,。

百泰派克生物科技特色項目

一、蛋白測序

百泰派克生物科技使用Thermo公司新推出的Obitrap Fusion Lumos質(zhì)譜儀及島津公司埃德曼降解測序系統(tǒng)對dànbáizhì序列進行分析,，提供基于質(zhì)譜的蛋白測序分析服務,，包括對dànbáizhì的氨基酸組成分析,，Nduāncèxù，Cduāncèxù和全序列分析,，以及基于埃德曼降解的dànbáizhìN端序列分析服務,。對于未知理論序列的dànbáizhì，提供基于從頭測序法的dànbáizhì從頭測序服務,，對蛋白序列進行分析,。

※服務優(yōu)勢：

1.采用目前世界上*的質(zhì)譜儀器 Obitrap Fusion Lumos;

2.可實現(xiàn)對所測定靶蛋白序列 100% 的覆蓋;

3.可測定蛋白N端多達 70個氨基酸序列;

4.可測定多種形式的樣品: 蛋白溶液、PVDF 蛋白條帶;

5.樣品用量低: 蛋白樣品僅需 5-10ug,，即可完成檢測;

6.測序不受N端封閉,，PEC和和糖基化等N端修飾的影響。

二,、dànbáizhì組學

百泰派克生物科技采用Thermo Fisher的Orbitrap Fusion Lumos質(zhì)譜平臺結(jié)合Nano-LC,，提供定量dànbáizhì組學、靶向dànbáizhì組學,、多肽組學,、翻譯后修飾蛋白組學等多種dànbáizhì組學分析服務。此外,，百泰派克生物科技新推出基于timsTOF Pro的4Ddànbáizhì組學服務,，助力微量樣本蛋白組學、大樣本群醫(yī)學及高通量修飾組學等研究工作,。

※服務優(yōu)勢：

1 .高通量定量蛋白分析:多對照組大規(guī)模實驗分析,，發(fā)現(xiàn)新的生物標記物;

2.體內(nèi)體外多種dànbáizhì標記方法，適用于分析組織,、細胞,、血液等多種樣品;

3.質(zhì)譜分析靈敏度高，實驗結(jié)果重復度高;

4.可檢測較低豐度蛋白,，線性范圍廣;

5.zhuānyè生物信息學分析,，分析更系統(tǒng)準確。

三,、單細胞質(zhì)譜流式技術分析

百泰派克生物科技采用Fluidigm質(zhì)譜流式系統(tǒng)進行單細胞質(zhì)譜流式技術分析,，采用金屬元素標記物（通常是金屬元素標記的特異抗體）標記細胞表面和內(nèi)部的分子，然后用流式細胞原理分離單個細胞,，再用電感耦合等離子體質(zhì)譜（ICP-MS）分析單個細胞的原子質(zhì)量譜,，zuì后將原子質(zhì)量譜數(shù)據(jù)轉(zhuǎn)換為細胞表面和內(nèi)部的信號分子表達量。

※服務優(yōu)勢：

1.技術*,，*技術空白

采用金屬標記抗體技術,，避免了傳統(tǒng)流式熒光通道少且易相互影響的問題。可在單細胞層面上對多種指標同時進行表征,，百泰派克生物科技可做到同時檢測51個目標蛋白,。

2.分析數(shù)量大，成本較低

單細胞RNAseq受成本等因素限制,，所有樣本細胞匯總的分析數(shù)目一般在2x10^4個左右,，而流式質(zhì)譜技術一次（單樣本）就可分析至少10^5的細胞，實現(xiàn)了數(shù)量級的提高,，且成本不高于單細胞RNAseq,。

3.應用前景大

①流式質(zhì)譜結(jié)果可以給出細胞亞群的變化，在臨床診斷,、疾病機制研究等方面具有極大的研究前景,；

②將金屬標簽技術與其他技術結(jié)合會有新應用方向。除常規(guī)蛋白外,，質(zhì)譜流式細胞技術還可用于蛋白翻譯后修飾,；

③可檢測細胞存活率、細胞大小,、mRNA轉(zhuǎn)錄子表達量,、DNA合成速率以及蛋白酶活性等。

四,、基于高精度質(zhì)譜的免疫多肽組學分析及新抗原發(fā)現(xiàn)

百泰派克生物科技的基于高精度質(zhì)譜的免疫多肽組學分析及新抗原發(fā)現(xiàn)一站式解決方案包括我們專有的,、高度敏感的免疫肽富集和鑒定方案。我們能夠幫助您實現(xiàn)10,000個以上I型多肽和10,000個以上II型多肽的鑒定和識別,。通過我們優(yōu)化的高通量免疫多肽組學分析平臺進行免疫肽組學分析,，可從zuì小的樣品材料中進行可重復的識別和定量。該服務可以應用于大規(guī)模的研究,，旨在助力科研工作者尋找癌癥、免疫疾病及傳染病的解決方案,，深入挖掘未知的靶標,。

五、生物藥物表征

百泰派克基于高分辨率質(zhì)譜技術,，MALDI TOF,，高效色譜分離技術，提供一系列完善的生物藥物分析方案,，從dànbáizhì,、多肽、抗體,、疫苗等生物制品的氨基酸組成和一級結(jié)構分析,，到產(chǎn)品變異性和純度分析。旨在提供優(yōu)質(zhì)生物藥物分析服務，幫助生物醫(yī)藥生產(chǎn)商提高生物藥物品質(zhì),。

百泰派克生物科技七大檢測平臺

百泰派克生物科技-生物制品表征,，生物質(zhì)譜多組學優(yōu)質(zhì)服務商

北京百泰派克生物科技有限公司致力于為生物/制藥和醫(yī)療器械行業(yè)提供質(zhì)量控制檢測和項目驗證等zhuānyè服務。公司實驗室遵循NMPA,、ICH,、FDA和EMA等的法規(guī)和指導原則，通過CNAS/ISO9001雙重質(zhì)量體系認證,，建立了完備的質(zhì)量體系,，數(shù)據(jù)冷熱/異地備份，設備定期計量/期間核查,，軟件審計追蹤,，為客戶提供一體化解決方案和技術服務，支持新藥研發(fā),、藥物申報注冊和生產(chǎn)放行,。

1.公司采用ISO9001質(zhì)量控制體系，zhuānyè提供以質(zhì)譜為基礎的CRO檢測分析服務,；

2.獲國家CNAS實驗室認可,，為客戶提供符合全球藥政法規(guī)的藥物質(zhì)量研究服務；

3.業(yè)務范圍覆蓋dànbáizhì組學,、多肽組學,、代謝組學、生物藥物表征,、單細胞分析,、單細胞質(zhì)譜流式、生信云分析以及多組學生物質(zhì)譜整合分析等,；

4.七大質(zhì)量控制檢測平臺,，滿足您一站式服務需求；

5.服務3000+企業(yè),，10000+客戶的選擇,；

6.致力于為您提供優(yōu)質(zhì)的生物質(zhì)譜分析服務!

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