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IML-123 ACHN-LUC(人腎細胞腺癌細胞-熒光素酶標記)(STR鑒定正確)

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  南京賽泓瑞生物科技有限公司專注于是一家專注于研發(fā)和生產(chǎn)原代細胞,、腫瘤細胞及細胞培養(yǎng)相關(guān)試劑產(chǎn)品的生物高科技企業(yè),,可以為各類研究機構(gòu)提供符合標準規(guī)范的原代細胞、腫瘤細胞及相關(guān)實驗技術(shù)服務(wù),;

   南京賽泓瑞生物科技有限公司有一支由中國藥科大學和南京醫(yī)科大學多名博士組成的研發(fā)團隊,,致力于為您的細胞研究及細胞培養(yǎng)實驗提供高品質(zhì),、穩(wěn)定性良好的產(chǎn)品,做“您身邊的細胞培養(yǎng)專家”,。細胞培養(yǎng)提供全程服務(wù),,產(chǎn)品涵蓋原代細胞、細胞系,、免疫細胞及干細胞,、胎牛血清、無血清非程序凍存液,、培養(yǎng)基,、基礎(chǔ)培養(yǎng)基、“支原體”,、“黑膠蟲”清除試劑,、細胞因子、胰酶,、雙抗等細胞培養(yǎng)及實驗相關(guān)產(chǎn)品,。

  公司設(shè)立質(zhì)量管理部,建立了高標準的質(zhì)檢系統(tǒng),,產(chǎn)品從原料,、半成品、成品入庫到銷售之前,,每一個環(huán)節(jié)都有嚴格的質(zhì)檢標準,,并以標準的生產(chǎn)工藝,保證產(chǎn)品質(zhì)量的穩(wěn)定性,。



胎牛血清,,原代細胞,耐藥細胞,,標記細胞,,LUC標記細胞,培養(yǎng)基

一,、細胞基本屬性
細胞名稱ACHN-LUC(人腎細胞腺癌細胞-熒光素酶標記)(STR鑒定正確)
細胞別稱ACHN,;人腎細胞腺癌細胞
種屬來源
年齡性別男;22歲
組織來源腎細胞腺癌,,胸水轉(zhuǎn)移灶
生長特性貼壁生長
細胞形態(tài)上皮細胞樣
細胞代數(shù) 10代以內(nèi)
背景介紹ACHN細胞1979年建系,,源自一名22歲患有腎細胞腺癌的白人男性的胸腔積液。干擾素可抑制該細胞的生長,,該細胞多用于干擾素及其誘導劑的抗增殖研究,。
ACHN-LUC細胞通過慢病毒轉(zhuǎn)染的方式攜帶Luc基因。
puro藥篩濃度 ACHN-LUC細胞puro藥篩濃度為1. 0ug/ml,培養(yǎng)過程中可不用再添加puro,,如若擔心抗性隨著傳代時間降低,,可定期用0.5ug/ml濃度puro維持
STR位點信息Amelogenin:X;CSF1PO:11,;D13S317:12,;D16S539:12,13,;D18S51:16,;D19S433:14,,15,;D21S11:30;D2S1338:17,;D3S1358:17,;D5S818:12;D7S820:9,,11,;D8S1179:12;FGA:22,;TH01:8,;TPOX:8,11,;vWA:16,,17;
STR鑒定位點圖

ACHN人腎細胞腺癌細胞STR鑒定位點圖

生物安全等級 1
細胞規(guī)格1×106cells/T25培養(yǎng)瓶或者1mL凍存管包裝
支原體檢測
保藏機構(gòu)ATCC; CRL-1611 ECACC; 88100508,;中國醫(yī)學基礎(chǔ)醫(yī)學研究所細胞資源中心
培養(yǎng)基90%DMEM+10% FBS+PS
培養(yǎng)條件氣相:95%空氣+5%二氧化碳,;溫度:37℃
倍增時間~28-36 hours
致瘤性Yes, in nude mice (Tumors developed within 21 days at 99% frequency (5/5) in nude mice inoculated subcutaneously with 1×10^7 cells).
凍存條件無血清凍存液,液氮儲存
細胞貨期3周左右
運輸方式復(fù)蘇發(fā)貨(T25瓶免運輸費用)/ 凍存發(fā)貨(需加干冰運輸費用) 順豐快遞
供應(yīng)限制于科學研究,,絕不可作為動物或人類疾病的治療產(chǎn)品使用
特別說明以下細胞培養(yǎng)凍存處理僅供參考,,具體操作步驟以隨貨產(chǎn)品說明書為主
二、細胞培養(yǎng)操作
收貨方式T25瓶凍存管
收貨處理觀察好細胞狀態(tài)后,,75%酒精消毒瓶壁,,將T25瓶置于37度培養(yǎng)箱放置2-4h,以便穩(wěn)定細胞狀態(tài)收到細胞后,,需立即轉(zhuǎn)入液氮凍存或直接復(fù)蘇
傳代密度細胞密度達80%-90%,,即可進行傳代培養(yǎng)第二天換液并檢查細胞密度
傳代比例 傳代建議1:2傳代
1:2傳代就是1個T25瓶傳2個T25瓶或者2個6cm皿。不是1個T25瓶傳2個10cm皿
一管細胞建議接種到6cm培養(yǎng)皿或者T25瓶
傳代方法a,、棄去培養(yǎng)上清,,用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次,。
b,、加1 mL消化液(0.25%Trypsin-0.02% EDTA)于培養(yǎng)瓶中,,使消化液浸潤所有細胞,將培養(yǎng)瓶置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-3 min(視細胞情況而定),,然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況,,若細胞大部分變圓并脫落,迅速拿回操作臺,,輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加2-3ml培養(yǎng)基終止消化,。輕輕打勻后裝入無菌離心管中,1000 rpm離心5 min,,棄去上清液,,補加1-2 mL培養(yǎng)液后吹勻。
c,、將細胞懸液按1:2比例分到新的含8 mL培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中,,置于培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。
將含有1 mL細胞懸液的凍存管在 37℃水浴中迅速搖晃解凍,,加4 mL培養(yǎng)基混合均勻,。在1000 rpm條件下離心3 min,棄去上清液,,加1-2 mL培養(yǎng)基后吹勻,。然后將所有細胞懸液加入含適量培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜(或?qū)⒓毎麘乙杭尤? cm皿中,加入約4 mL培養(yǎng)基,,培養(yǎng)過夜),。第二天換液并檢查細胞密度。
注意事項
1.運輸用的培養(yǎng)基(灌液培養(yǎng)基)不能再用來培養(yǎng)細胞,,請換用按照說明書細胞培養(yǎng)條件新配制的培養(yǎng)基來培養(yǎng)細胞,。
2.因運輸問題,部分細胞由于溫度變化及劇烈碰亡破碎形成碎片,,是正?,F(xiàn)象。
1.收貨時若發(fā)現(xiàn)干冰化完,,檢查凍存管是否融化,,若已融化需直接離心細胞接種觀察,若未融化可以將細胞按正常步驟保存,;
2.為保證細胞的高存活率,,收到產(chǎn)品后,請立即解凍復(fù)蘇細胞,。
到貨須知
1.收到細胞后,,首先觀察并拍照記錄細胞瓶是否完好,培養(yǎng)液是否有漏液、渾濁等現(xiàn)象,,干冰運輸?shù)募毎麢z查干冰是否揮發(fā),,細胞是否解凍,若有上述現(xiàn)象發(fā)生請及時和我們聯(lián)系,。
2.靜置完成后,,取出細胞培養(yǎng)瓶,鏡檢,、拍照(當天以及第 2,3 天請拍照),,記錄細胞狀態(tài) (所拍照片將作為后續(xù)服務(wù)依據(jù));建議細胞傳代培養(yǎng)后,,定期拍照,、記錄細胞生長狀態(tài)。
3.由于運輸?shù)脑?,個別敏感細胞會出現(xiàn)不穩(wěn)定的情況,,請及時和我們聯(lián)系,,告知細胞的具體情況,,以便我們的技術(shù)人員跟蹤回訪直至問題解決。
4.仔細閱讀細胞說明書,,了解細胞相關(guān)信息,,如細胞形態(tài)、所用培養(yǎng)基,、血清比例,、所需細胞因子等,確保細胞培養(yǎng)條件一致,,若由于培養(yǎng)條件不一致而導致細胞出現(xiàn)問題,,責任由客戶自行承擔。
備注:客戶在細胞培養(yǎng)過程中,,有任何技術(shù)問題可以技術(shù)服務(wù)電話: 按 2,,我們隨時給予解答。
三,、細胞凍存操作
凍存液配方無血清凍存液,,液氮儲存
細胞密度待細胞生長狀態(tài)良好時,可進行細胞凍存,。下面 T25 瓶為例
凍存方法a,、收集細胞及細胞培養(yǎng)液,裝入無菌離心管中,,1000 rpm條件下離心4 min,,棄去上清液,用PBS清洗一遍,棄盡PBS,,進行細胞計數(shù),。
b、根據(jù)細胞數(shù)量加入無血清細胞凍存液,,使細胞密度5x106~1x107/mL,,輕輕混勻,每支凍存管凍存1mL細胞懸液,,注意凍存管做好標識,。
c、將凍存管放入-80℃冰箱,,24 h后轉(zhuǎn)入液氮灌儲存,。記錄凍存管位置以便下次拿取。
注意事項凍存細胞轉(zhuǎn)入液氮后及時復(fù)蘇一管檢查細胞凍存活性,,若有異常,,及時調(diào)整實驗方案
四、售后服務(wù)
重發(fā)標準
1.細胞運輸途中遭遇的各種問題,,細胞丟失,、瓶身破損、培養(yǎng)液嚴重漏液等,,重發(fā),;
2.收到細胞未開封,如出現(xiàn)污染狀況,,重發(fā),;
3.收到細胞3天內(nèi),發(fā)現(xiàn)污染問題,,經(jīng)核實后,,重發(fā);
4.常溫發(fā)貨的細胞靜置 2 小時后,,干冰凍存發(fā)貨的細胞復(fù)蘇 2 天后,,絕大多數(shù)細胞未存活,經(jīng)核實后,,重發(fā),;
5.常溫發(fā)貨的細胞靜置 22 小時并且未開封或干冰凍存發(fā)貨的細胞復(fù)蘇 2 天后,出現(xiàn)污染,,經(jīng)核實后,,重發(fā);
6.細胞活性問題,,請在收到產(chǎn)品 3 天內(nèi)給我們提出真實的實驗結(jié)果,,用臺盼藍染色法鑒定細胞活力,,經(jīng)核實后,重發(fā),;
7.視具體情況而定,。
不予重發(fā)
1.客戶操作造成細胞污染,不重發(fā),;
2.客戶嚴重操作失誤致細胞狀態(tài)不好,,不重發(fā);
3.非我們推薦細胞培養(yǎng)體系致的細胞狀態(tài)不好,,不重發(fā),;
4.細胞狀態(tài)不好,未提供真實清晰的培養(yǎng)前 3 天的細胞狀態(tài)照片,,不重發(fā),;
5.細胞培養(yǎng)時經(jīng)其它處理導致細胞出現(xiàn)問題的,不重發(fā),;
6.收到細胞發(fā)現(xiàn)問題與客服人員溝通的時間證明大于3天的,,不重發(fā);
7.視具體情況而定,。
五,、參考文獻
Cuproptosis-Related MiR-21-5p/FDX1 Axis in Clear Cell Renal Cell Carcinoma and Its Potential Impact on Tumor Microenvironment. Cells. 2022 Dec 31;12(1):173. doi: 10.3390/cells12010173. PMID: 36611966; PMCID: PMC9818076.
作者:Xie M, Cheng B, Yu S, He Y, Cao Y, Zhou T, Han K, Dai R, Wang R.
細胞:OSRC-2 (Cat: IM-H061) and ACHN (Cat: IM-H058)
2022年影響因子/JCR分區(qū):7.666/Q2


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