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三聚氰胺檢測卡基于競爭抑制免疫層析技術(shù)，通過抗原抗體特異性結(jié)合實現(xiàn)快速篩查,。其核心原理可分為以下步驟：
1.膠體金標記抗體：信號載體與識別元件
檢測卡中預(yù)先將抗三聚氰胺單克隆抗體與膠體金顆粒（直徑20-40nm）結(jié)合,，形成金標抗體復(fù)合物,。膠體金顆粒通過靜電作用穩(wěn)定分散，其表面標記的抗體可特異性識別三聚氰胺分子,。例如,，深圳后王電子科技有限公司的檢測卡采用高親和力單克隆抗體，確保對三聚氰胺的檢測靈敏度達0.5mg/kg（液態(tài)奶）,。
2.硝酸纖維素膜固定抗原：檢測線與質(zhì)控線
在硝酸纖維素膜上,，通過噴涂技術(shù)固定兩條關(guān)鍵線：
檢測線（T線）：包被三聚氰胺-載體蛋白偶聯(lián)物（如三聚氰胺與牛血清白蛋白結(jié)合），作為競爭結(jié)合位點,。
質(zhì)控線（C線）：包被抗鼠IgG抗體,，用于驗證檢測流程有效性。
3.競爭反應(yīng)：樣本中的三聚氰胺與固定抗原“爭奪”抗體
當樣本（如液態(tài)奶,、奶粉稀釋液）滴入加樣孔后,，通過毛細作用沿膜層析：
陰性樣本：不含三聚氰胺時，金標抗體未被結(jié)合,，繼續(xù)遷移至T線，與固定偶聯(lián)物結(jié)合形成紅色條帶,；同時,，部分金標抗體與C線抗鼠IgG結(jié)合，顯示第二條紅色條帶,。此時T線和C線均顯色,，判定為陰性。
陽性樣本：含三聚氰胺時,，樣本中的三聚氰胺與金標抗體結(jié)合,，封閉其抗原結(jié)合位點，阻止其與T線偶聯(lián)物結(jié)合,，導致T線不顯色,；而C線仍顯色，驗證檢測有效,。此時僅C線顯色,，判定為陽性。
4.結(jié)果判定與靈敏度控制
靈敏度：通過調(diào)整金標抗體濃度,、T線偶聯(lián)物密度及層析速度,，實現(xiàn)檢測限優(yōu)化。例如,，智云達檢測卡對液態(tài)奶的檢測限為0.5mg/kg,，嬰兒奶粉為1mg/kg。
無效判定：若C線未顯色,，無論T線如何,，均視為檢測卡失效,，需重新檢測。
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