三聚氰胺檢測(cè)卡的工作原理:免疫層析技術(shù)與抗原抗體反應(yīng)
三聚氰胺檢測(cè)卡基于競(jìng)爭(zhēng)抑制免疫層析技術(shù),,通過(guò)抗原抗體特異性結(jié)合實(shí)現(xiàn)快速篩查,。其核心原理可分為以下步驟:
1.膠體金標(biāo)記抗體:信號(hào)載體與識(shí)別元件
檢測(cè)卡中預(yù)先將抗三聚氰胺單克隆抗體與膠體金顆粒(直徑20-40nm)結(jié)合,,形成金標(biāo)抗體復(fù)合物,。膠體金顆粒通過(guò)靜電作用穩(wěn)定分散,,其表面標(biāo)記的抗體可特異性識(shí)別三聚氰胺分子。例如,,深圳后王電子科技有限公司的檢測(cè)卡采用高親和力單克隆抗體,,確保對(duì)三聚氰胺的檢測(cè)靈敏度達(dá)0.5mg/kg(液態(tài)奶)。
2.硝酸纖維素膜固定抗原:檢測(cè)線與質(zhì)控線
在硝酸纖維素膜上,,通過(guò)噴涂技術(shù)固定兩條關(guān)鍵線:
檢測(cè)線(T線):包被三聚氰胺-載體蛋白偶聯(lián)物(如三聚氰胺與牛血清白蛋白結(jié)合),,作為競(jìng)爭(zhēng)結(jié)合位點(diǎn)。
質(zhì)控線(C線):包被抗鼠IgG抗體,,用于驗(yàn)證檢測(cè)流程有效性,。
3.競(jìng)爭(zhēng)反應(yīng):樣本中的三聚氰胺與固定抗原“爭(zhēng)奪”抗體
當(dāng)樣本(如液態(tài)奶、奶粉稀釋液)滴入加樣孔后,,通過(guò)毛細(xì)作用沿膜層析:
陰性樣本:不含三聚氰胺時(shí),,金標(biāo)抗體未被結(jié)合,,繼續(xù)遷移至T線,與固定偶聯(lián)物結(jié)合形成紅色條帶,;同時(shí),,部分金標(biāo)抗體與C線抗鼠IgG結(jié)合,顯示第二條紅色條帶,。此時(shí)T線和C線均顯色,,判定為陰性。
陽(yáng)性樣本:含三聚氰胺時(shí),,樣本中的三聚氰胺與金標(biāo)抗體結(jié)合,,封閉其抗原結(jié)合位點(diǎn),阻止其與T線偶聯(lián)物結(jié)合,,導(dǎo)致T線不顯色,;而C線仍顯色,驗(yàn)證檢測(cè)有效,。此時(shí)僅C線顯色,,判定為陽(yáng)性。
4.結(jié)果判定與靈敏度控制
靈敏度:通過(guò)調(diào)整金標(biāo)抗體濃度,、T線偶聯(lián)物密度及層析速度,,實(shí)現(xiàn)檢測(cè)限優(yōu)化。例如,,智云達(dá)檢測(cè)卡對(duì)液態(tài)奶的檢測(cè)限為0.5mg/kg,,嬰兒奶粉為1mg/kg。
無(wú)效判定:若C線未顯色,,無(wú)論T線如何,,均視為檢測(cè)卡失效,需重新檢測(cè),。
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