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IML-128 SK-OV-3-LUC-EGFP(人卵巢癌細(xì)胞-熒光素酶標(biāo)記-綠色熒光蛋白(STR鑒定正確))
具體成交價(jià)以合同協(xié)議為準(zhǔn)
- 公司名稱(chēng) 南京賽泓瑞生物科技有限公司
- 品牌
- 型號(hào) IML-128
- 產(chǎn)地
- 廠商性質(zhì) 生產(chǎn)廠家
- 更新時(shí)間 2024/12/28 9:25:01
- 訪問(wèn)次數(shù) 238
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一,、細(xì)胞基本屬性 | ||||
細(xì)胞名稱(chēng) | SK-OV-3-LUC-EGFP(人卵巢癌細(xì)胞-熒光素酶標(biāo)記-綠色熒光蛋白(STR鑒定正確)) | |||
細(xì)胞別稱(chēng) | SK-OV-3-LUC-EGFP;人卵巢癌細(xì)胞-熒光素酶標(biāo)記-綠色熒光蛋白,;人卵巢癌細(xì)胞-LUC-EGFP | |||
種屬來(lái)源 | 人 | |||
組織來(lái)源 | 卵巢 | |||
生長(zhǎng)特性 | 貼壁生長(zhǎng) | |||
細(xì)胞形態(tài) | 上皮細(xì)胞樣 | |||
細(xì)胞代數(shù) | p3-p8 | |||
背景介紹 | Luciferase SKOV3細(xì)胞穩(wěn)定表達(dá)螢火蟲(chóng)熒光素酶,。該細(xì)胞株性狀穩(wěn)定,培養(yǎng)時(shí)不需要添加抗生素維持,??捎米魑灮鹣x(chóng)熒光素酶活性檢測(cè)中的陽(yáng)性對(duì)照,,也可用于活體動(dòng)物成像實(shí)驗(yàn)。 SK-OV-3-LUC-EGFP細(xì)胞通過(guò)慢病毒轉(zhuǎn)染的方式攜帶Luc基因,。 SK-OV-3細(xì)胞是由G.Trempe和L.J.Old于1973年從卵巢腫瘤病人的腹水分離得到,。SK-OV-3細(xì)胞對(duì)腫瘤壞死因子和幾種細(xì)胞毒性藥物包括白喉毒素、和均耐受,。SK-OV-3細(xì)胞在裸鼠中致瘤,,且形成與卵巢原位癌一致的中度分化的腺癌。 | |||
bsd藥篩濃度 | SK-OV-3-LUC-EGFP細(xì)胞PURO藥篩濃度為4.0ug/ml,,培養(yǎng)過(guò)程中可不用再添加PURO,,如若擔(dān)心抗性隨著傳代時(shí)間降低,可定期用2ug/ml濃度PURO維持 | |||
Luciferase活性檢測(cè) | ![]() SKOV3-PLV-LUC-BSD Luciferase檢測(cè)報(bào)告下載 | |||
Luc成像文獻(xiàn) | ![]() SKOV3-LUC活體成像參考文獻(xiàn)1 SKOV3-LUC活體成像參考文獻(xiàn)2 SKOV3-LUC活體成像參考文獻(xiàn)3 SKOV3-LUC活體成像參考文獻(xiàn)4 | |||
STR位點(diǎn)圖 | ||||
生物安全等級(jí) | 1 | |||
細(xì)胞規(guī)格 | 1x106cells/T25培養(yǎng)瓶或者1mL凍存管包裝 | |||
支原體檢測(cè) | 無(wú) | |||
保藏機(jī)構(gòu) | ATCC; HTB-77 ECACC; 91091004 | |||
培養(yǎng)基 | 90% McCoy’s 5A+10% FBS+雙抗 | |||
培養(yǎng)條件 | 氣相:95%空氣+5%二氧化碳,;溫度:37℃ | |||
凍存條件 | 無(wú)血清凍存液,,液氮儲(chǔ)存 | |||
細(xì)胞貨期 | 現(xiàn)貨,1周左右 | |||
運(yùn)輸方式 | 復(fù)蘇發(fā)貨(T25瓶免運(yùn)輸費(fèi)用)/ 凍存發(fā)貨(需加干冰運(yùn)輸費(fèi)用) 順豐快遞 | |||
供應(yīng)限制 | 于科學(xué)研究,,絕不可作為動(dòng)物或人類(lèi)疾病的治療產(chǎn)品使用 | |||
特別說(shuō)明 | 以下細(xì)胞培養(yǎng)凍存處理僅供參考,,具體操作步驟以隨貨產(chǎn)品說(shuō)明書(shū)為主 | |||
二、細(xì)胞培養(yǎng)操作 | ||||
收貨方式 | T25瓶 | 凍存管 | ||
收貨處理 | 觀察好細(xì)胞狀態(tài)后,,75%酒精消毒瓶壁,,將T25瓶置于37度培養(yǎng)箱放置2-4h,以便穩(wěn)定細(xì)胞狀態(tài) | 收到細(xì)胞后,,需立即轉(zhuǎn)入液氮凍存或直接復(fù)蘇 | ||
傳代密度 | 細(xì)胞密度達(dá)80%-90%,,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng) | 第二天換液并檢查細(xì)胞密度 | ||
傳代比例 | 傳代建議1:2傳代 1:2傳代就是1個(gè)T25瓶傳2個(gè)T25瓶或者2個(gè)6cm皿。不是1個(gè)T25瓶傳2個(gè)10cm皿 | 一管細(xì)胞建議接種到6cm培養(yǎng)皿或者T25瓶 | ||
傳代方法 | a,、棄去培養(yǎng)上清,,用不含鈣、鎂離子的PBS潤(rùn)洗細(xì)胞1-2次,。 b,、加1 mL消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養(yǎng)瓶中,使消化液浸潤(rùn)所有細(xì)胞,,將培養(yǎng)瓶置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2 min(視細(xì)胞情況而定),,然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況,,若細(xì)胞大部分變圓并脫落,,迅速拿回操作臺(tái),輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加2-3ml培養(yǎng)基終止消化,。輕輕打勻后裝入無(wú)菌離心管中,,1000 rpm離心5 min,棄去上清液,,補(bǔ)加1-2 mL培養(yǎng)液后吹勻,。 c,、將細(xì)胞懸液按1:2比例分到新的含8 mL培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中,置于培養(yǎng)箱中培養(yǎng),。 | 將含有1 mL細(xì)胞懸液的凍存管在 37℃水浴中迅速搖晃解凍,,加4 mL培養(yǎng)基混合均勻。在1000 rpm條件下離心3 min,,棄去上清液,,加1-2 mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液加入含適量培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過(guò)夜(或?qū)⒓?xì)胞懸液加入6 cm皿中,,加入約4 mL培養(yǎng)基,,培養(yǎng)過(guò)夜)。第二天換液并檢查細(xì)胞密度,。 | ||
注意事項(xiàng) | 1.運(yùn)輸用的培養(yǎng)基(灌液培養(yǎng)基)不能再用來(lái)培養(yǎng)細(xì)胞,,請(qǐng)換用按照說(shuō)明書(shū)細(xì)胞培養(yǎng)條件新配制的培養(yǎng)基來(lái)培養(yǎng)細(xì)胞。 2.因運(yùn)輸問(wèn)題,,部分細(xì)胞由于溫度變化及劇烈碰亡破碎形成碎片,,是正常現(xiàn)象,。 | 1.收貨時(shí)若發(fā)現(xiàn)干冰化完,,檢查凍存管是否融化,若已融化需直接離心細(xì)胞接種觀察,,若未融化可以將細(xì)胞按正常步驟保存,; 2.為保證細(xì)胞的高存活率,收到產(chǎn)品后,,請(qǐng)立即解凍復(fù)蘇細(xì)胞,。 | ||
到貨須知 | 1.收到細(xì)胞后,首先觀察并拍照記錄細(xì)胞瓶是否完好,,培養(yǎng)液是否有漏液,、渾濁等現(xiàn)象,干冰運(yùn)輸?shù)募?xì)胞檢查干冰是否揮發(fā),,細(xì)胞是否解凍,,若有上述現(xiàn)象發(fā)生請(qǐng)及時(shí)和我們聯(lián)系。 2.靜置完成后,,取出細(xì)胞培養(yǎng)瓶,,鏡檢、拍照(當(dāng)天以及第 2,3 天請(qǐng)拍照),,記錄細(xì)胞狀態(tài) (所拍照片將作為后續(xù)服務(wù)依據(jù)),;建議細(xì)胞傳代培養(yǎng)后,定期拍照,、記錄細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài),。 3.由于運(yùn)輸?shù)脑?,個(gè)別敏感細(xì)胞會(huì)出現(xiàn)不穩(wěn)定的情況,請(qǐng)及時(shí)和我們聯(lián)系,,告知細(xì)胞的具體情況,,以便我們的技術(shù)人員跟蹤回訪直至問(wèn)題解決。 4.仔細(xì)閱讀細(xì)胞說(shuō)明書(shū),,了解細(xì)胞相關(guān)信息,,如細(xì)胞形態(tài)、所用培養(yǎng)基,、血清比例,、所需細(xì)胞因子等,確保細(xì)胞培養(yǎng)條件一致,,若由于培養(yǎng)條件不一致而導(dǎo)致細(xì)胞出現(xiàn)問(wèn)題,,責(zé)任由客戶(hù)自行承擔(dān)。 | |||
備注:客戶(hù)在細(xì)胞培養(yǎng)過(guò)程中,,有任何技術(shù)問(wèn)題可以技術(shù)服務(wù)電話(huà): 按 2,,我們隨時(shí)給予解答。 | ||||
三,、細(xì)胞凍存操作 | ||||
凍存液配方 | 無(wú)血清凍存液,,液氮儲(chǔ)存 | |||
細(xì)胞密度 | 待細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài)良好時(shí),可進(jìn)行細(xì)胞凍存,。下面 T25 瓶為例 | |||
凍存方法 | a,、收集細(xì)胞及細(xì)胞培養(yǎng)液,裝入無(wú)菌離心管中,,1000 rpm條件下離心4 min,,棄去上清液,用PBS清洗一遍,,棄盡PBS,,加 1 mL血清重懸細(xì)胞,進(jìn)行細(xì)胞計(jì)數(shù),。 b,、根據(jù)細(xì)胞數(shù)量加入無(wú)血清細(xì)胞凍存液,使細(xì)胞密度5x106~1x107/mL,,輕輕混勻,,每支凍存管凍存1mL細(xì)胞懸液,注意凍存管做好標(biāo)識(shí),。 c,、將凍存管放入-80℃冰箱,,24 h后轉(zhuǎn)入液氮灌儲(chǔ)存,。記錄凍存管位置以便下次拿取,。 | |||
注意事項(xiàng) | 凍存細(xì)胞轉(zhuǎn)入液氮后及時(shí)復(fù)蘇一管檢查細(xì)胞凍存活性,若有異常,,及時(shí)調(diào)整實(shí)驗(yàn)方案 | |||
四,、售后服務(wù) | ||||
重發(fā)標(biāo)準(zhǔn) | 1.細(xì)胞運(yùn)輸途中遭遇的各種問(wèn)題,細(xì)胞丟失,、瓶身破損,、培養(yǎng)液嚴(yán)重漏液等,重發(fā),; 2.收到細(xì)胞未開(kāi)封,,如出現(xiàn)污染狀況,重發(fā),; 3.收到細(xì)胞3天內(nèi),,發(fā)現(xiàn)污染問(wèn)題,經(jīng)核實(shí)后,,重發(fā),; 4.常溫發(fā)貨的細(xì)胞靜置 2 小時(shí)后,干冰凍存發(fā)貨的細(xì)胞復(fù)蘇 2 天后,,絕大多數(shù)細(xì)胞未存活,,經(jīng)核實(shí)后,重發(fā),; 5.常溫發(fā)貨的細(xì)胞靜置 22 小時(shí)并且未開(kāi)封或干冰凍存發(fā)貨的細(xì)胞復(fù)蘇 2 天后,,出現(xiàn)污染,經(jīng)核實(shí)后,,重發(fā),; 6.細(xì)胞活性問(wèn)題,請(qǐng)?jiān)谑盏疆a(chǎn)品 3 天內(nèi)給我們提出真實(shí)的實(shí)驗(yàn)結(jié)果,,用臺(tái)盼藍(lán)染色法鑒定細(xì)胞活力,,經(jīng)核實(shí)后,重發(fā),; 7.視具體情況而定,。 | |||
不予重發(fā) | 1.客戶(hù)操作造成細(xì)胞污染,不重發(fā),; 2.客戶(hù)嚴(yán)重操作失誤致細(xì)胞狀態(tài)不好,,不重發(fā); 3.非我們推薦細(xì)胞培養(yǎng)體系致的細(xì)胞狀態(tài)不好,,不重發(fā),; 4.細(xì)胞狀態(tài)不好,未提供真實(shí)清晰的培養(yǎng)前 3 天的細(xì)胞狀態(tài)照片,,不重發(fā),; 5.細(xì)胞培養(yǎng)時(shí)經(jīng)其它處理導(dǎo)致細(xì)胞出現(xiàn)問(wèn)題的,,不重發(fā); 6.收到細(xì)胞發(fā)現(xiàn)問(wèn)題與客服人員溝通的時(shí)間證明大于3天的,,不重發(fā),; 7.視具體情況而定。 |
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