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IML-031 人臍靜脈內皮原代細胞-GFP(人臍靜脈內皮原代細胞-綠色熒光蛋白標記(免疫熒光))

具體成交價以合同協(xié)議為準

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聯(lián)系我們時請說明是化工儀器網上看到的信息,,謝謝!


  南京賽泓瑞生物科技有限公司專注于是一家專注于研發(fā)和生產原代細胞,、腫瘤細胞及細胞培養(yǎng)相關試劑產品的生物高科技企業(yè),可以為各類研究機構提供符合標準規(guī)范的原代細胞,、腫瘤細胞及相關實驗技術服務,;

   南京賽泓瑞生物科技有限公司有一支由中國藥科大學和南京醫(yī)科大學多名博士組成的研發(fā)團隊,致力于為您的細胞研究及細胞培養(yǎng)實驗提供高品質,、穩(wěn)定性良好的產品,,做“您身邊的細胞培養(yǎng)專家”。細胞培養(yǎng)提供全程服務,,產品涵蓋原代細胞,、細胞系、免疫細胞及干細胞,、胎牛血清,、無血清非程序凍存液,、培養(yǎng)基、基礎培養(yǎng)基,、“支原體”,、“黑膠蟲”清除試劑、細胞因子,、胰酶,、雙抗等細胞培養(yǎng)及實驗相關產品。

  公司設立質量管理部,,建立了高標準的質檢系統(tǒng),,產品從原料、半成品,、成品入庫到銷售之前,,每一個環(huán)節(jié)都有嚴格的質檢標準,并以標準的生產工藝,,保證產品質量的穩(wěn)定性,。



胎牛血清,原代細胞,,耐藥細胞,,標記細胞,LUC標記細胞,,培養(yǎng)基

一,、細胞基本屬性
細胞名稱人臍靜脈內皮原代細胞-GFP(人臍靜脈內皮原代細胞-綠色熒光蛋白標記)(免疫熒光)
細胞別稱人臍靜脈內皮原代細胞+GFP;人臍靜脈內皮原代細胞-綠色熒光蛋白標記
種屬來源
組織來源臍帶組織
生長特性貼壁生長
細胞形態(tài)上皮細胞樣
背景介紹
人臍靜脈內皮原代細胞細胞通過慢病毒轉染的方式攜帶GFP基因,,并穩(wěn)定表達GFP蛋白,。
臍帶是哺乳類的連接胎兒和胎盤的管狀結構。臍帶中通過尿膜的血管即臍動脈和臍靜脈,,卵黃囊的血管即臍腸系膜動脈及臍腸系膜靜脈,。在子宮中,子宮動脈在胎盤的母體部分出的毛細血管,,與胎盤的子體部胎兒毛細血管靠近,,在此處母體和胎兒的血液間進行CO2和O2,代謝產物即代謝廢物和營養(yǎng)物質的交換,。臍動脈將胎兒來的廢物運送至胎盤,,臍靜脈將O2和營養(yǎng)物質從胎盤運送給胎兒。
puro藥篩濃度人臍靜脈內皮原代細胞puro藥篩濃度為1.0ug/ml,,培養(yǎng)過程中可不用再添加puro,,如若擔心抗性隨著傳代時間降低,可定期用0.5ug/ml濃度puro維持
細胞規(guī)格1x106cells/T25或1mL凍存管
支原體檢測
培養(yǎng)基人臍靜脈內皮原代細胞專用培養(yǎng)基
培養(yǎng)條件氣相:95%空氣+5%二氧化碳;溫度:37℃
凍存條件無血清凍存液,,液氮儲存
細胞貨期2周左右
運輸方式復蘇發(fā)貨(T25瓶免運輸費用)/ 凍存發(fā)貨(需加干冰運輸費用) 順豐快遞
供應限制于科學研究,,絕不可作為動物或人類疾病的治療產品使用
特別說明以下細胞培養(yǎng)凍存處理僅供參考,具體操作步驟以隨貨產品說明書為主
二,、細胞培養(yǎng)操作
收貨方式T25瓶凍存管
收貨處理觀察好細胞狀態(tài)后,,75%酒精消毒瓶壁,將T25瓶置于37度培養(yǎng)箱放置2-4h,,以便穩(wěn)定細胞狀態(tài)收到細胞后,,需立即轉入液氮凍存或直接復蘇
傳代密度細胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養(yǎng)第二天換液并檢查細胞密度
傳代比例傳代建議1:2傳代
1:2傳代就是1個T25瓶傳2個T25瓶或者2個6cm皿,。不是1個T25瓶傳2個10cm皿
一管細胞建議接種到10cm培養(yǎng)皿或者T25瓶
傳代方法
a、棄去培養(yǎng)上清,,用不含鈣,、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次。
b,、加1 mL消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養(yǎng)瓶中,,使消化液浸潤所有細胞,棄去消化液,,將培養(yǎng)瓶置于37℃培養(yǎng)箱中消化1 min,,然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況,若細胞大部分變圓并脫落,,迅速拿回操作臺,,輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化。
c,、按6-8 mL/瓶補加培養(yǎng)基,,輕輕打勻后裝入無菌離心管中,1000 rpm離心4 min,,棄去上清液,,補加1-2 mL培養(yǎng)液后吹勻。
d,、將細胞懸液按1:2比例分到新的含8 mL培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中,,置于培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。
將含有1 mL細胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍,,加4 mL培養(yǎng)基混合均勻,。在1000 rpm條件下離心3 min,棄去上清液,,加1-2 mL培養(yǎng)基后吹勻,。然后將所有細胞懸液加入含適量培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜(或將細胞懸液加入10 cm皿中,加入約8 mL培養(yǎng)基,培養(yǎng)過夜),。第二天換液并檢查細胞密度,。
注意事項
1.運輸用的培養(yǎng)基(灌液培養(yǎng)基)不能再用來培養(yǎng)細胞,請換用按照說明書細胞培養(yǎng)條件新配制的培養(yǎng)基來培養(yǎng)細胞,。
2.因運輸問題,,部分細胞由于溫度變化及劇烈碰亡破碎形成碎片,是正?,F(xiàn)象,。
1.收貨時若發(fā)現(xiàn)干冰化完,檢查凍存管是否融化,,若已融化需直接離心細胞接種觀察,,若未融化可以將細胞按正常步驟保存;
2.為保證細胞的高存活率,,收到產品后,,請立即解凍復蘇細胞。
到貨須知
1.收到細胞后,,首先觀察并拍照記錄細胞瓶是否完好,,培養(yǎng)液是否有漏液、渾濁等現(xiàn)象,,干冰運輸?shù)募毎麢z查干冰是否揮發(fā),,細胞是否解凍,若有上述現(xiàn)象發(fā)生請及時和我們聯(lián)系,。
2.靜置完成后,,取出細胞培養(yǎng)瓶,鏡檢,、拍照(當天以及第 2,3 天請拍照),,記錄細胞狀態(tài) (所拍照片將作為后續(xù)服務依據(jù));建議細胞傳代培養(yǎng)后,,定期拍照,、記錄細胞生長狀態(tài),。
3.由于運輸?shù)脑?,個別敏感細胞會出現(xiàn)不穩(wěn)定的情況,請及時和我們聯(lián)系,,告知細胞的具體情況,,以便我們的技術人員跟蹤回訪直至問題解決。
4.仔細閱讀細胞說明書,,了解細胞相關信息,,如細胞形態(tài)、所用培養(yǎng)基、血清比例,、所需細胞因子等,,確保細胞培養(yǎng)條件一致,若由于培養(yǎng)條件不一致而導致細胞出現(xiàn)問題,,責任由客戶自行承擔,。
備注:客戶在細胞培養(yǎng)過程中,有任何技術問題可以技術服務電話: 按 2,,我們隨時給予解答,。
三、細胞凍存操作
凍存液配方無血清凍存液,,液氮儲存
細胞密度待細胞生長狀態(tài)良好時,,可進行細胞凍存。下面 T25 瓶為例
凍存方法a,、收集細胞及細胞培養(yǎng)液,,裝入無菌離心管中,1000 rpm條件下離心4 min,,棄去上清液,用PBS清洗一遍,,棄盡PBS,,加 1 mL血清重懸細胞,進行細胞計數(shù),。
b,、根據(jù)細胞數(shù)量加入無血清細胞凍存液,使細胞密度5x106~1x107/mL,,輕輕混勻,,每支凍存管凍存1mL細胞懸液,注意凍存管做好標識,。
c,、將凍存管放入-80℃冰箱,24 h后轉入液氮灌儲存,。記錄凍存管位置以便下次拿取,。
注意事項凍存細胞轉入液氮后及時復蘇一管檢查細胞凍存活性,若有異常,,及時調整實驗方案
四,、售后服務
重發(fā)標準
1.細胞運輸途中遭遇的各種問題,細胞丟失,、瓶身破損,、培養(yǎng)液嚴重漏液等,重發(fā);
2.收到細胞未開封,,如出現(xiàn)污染狀況,,重發(fā);
3.收到細胞3天內,,發(fā)現(xiàn)污染問題,,經核實后,重發(fā),;
4.常溫發(fā)貨的細胞靜置 2 小時后,,干冰凍存發(fā)貨的細胞復蘇 2 天后,絕大多數(shù)細胞未存活,,經核實后,,重發(fā);
5.常溫發(fā)貨的細胞靜置 22 小時并且未開封或干冰凍存發(fā)貨的細胞復蘇 2 天后,,出現(xiàn)污染,,經核實后,重發(fā),;
6.細胞活性問題,,請在收到產品 3 天內給我們提出真實的實驗結果,用臺盼藍染色法鑒定細胞活力,,經核實后,,重發(fā);
7.視具體情況而定,。
不予重發(fā)
1.客戶操作造成細胞污染,,不重發(fā);
2.客戶嚴重操作失誤致細胞狀態(tài)不好,,不重發(fā),;
3.非我們推薦細胞培養(yǎng)體系致的細胞狀態(tài)不好,不重發(fā),;
4.細胞狀態(tài)不好,,未提供真實清晰的培養(yǎng)前 3 天的細胞狀態(tài)照片,不重發(fā),;
5.細胞培養(yǎng)時經其它處理導致細胞出現(xiàn)問題的,,不重發(fā);
6.收到細胞發(fā)現(xiàn)問題與客服人員溝通的時間證明大于3天的,,不重發(fā),;
7.視具體情況而定。


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