1ml（100ul×10支） BL21（DE3）感受態(tài)細胞
| 參考價 | ￥ 100 |
| 訂貨量 | ≥1 |
具體成交價以合同協(xié)議為準
- 公司名稱 武漢華聯(lián)科生物技術(shù)有限公司
- 品牌
- 型號 1ml（100ul×10支）
- 產(chǎn)地 中國
- 廠商性質(zhì) 經(jīng)銷商
- 更新時間 2016/9/30 14:22:02
- 訪問次數(shù) 795
聯(lián)系我們時請說明是化工儀器網(wǎng)上看到的信息，謝謝!
動物飼養(yǎng),、籠位出租,、動物模型研發(fā)、疾病模型定制,、基因編輯,、凈化、擴繁,、保種,、中藥安全性評價、藥理藥效評價,、抗體篩選發(fā)現(xiàn),、綜合檢測等
BL21（DE3）感受態(tài)細胞說明書
（Rev.A）
貨號 | 規(guī)格 | 儲藏 |
PD6229-10×100μl | 10×100μl | -80℃保存 |
PD6229-20×100μl | 20×100μl | -80℃保存 |
保 存：-80℃保存，運輸為干冰包裝。自收貨之日起液氮保存至少一年,，-80℃保存至少 6 個月,。
產(chǎn)品簡介：
本公司生產(chǎn)的BL21（DE3）感受態(tài)細胞是采用大腸桿菌BL21（DE3）菌株經(jīng)特殊工藝制備得到，可用于DNA的化學轉(zhuǎn)化,。使用pUC19 質(zhì)粒檢測,，轉(zhuǎn)化效率zui高可達 2×107cfu/μg，-80℃保存 6 個月轉(zhuǎn)化效率不發(fā)生改變,。
基因型: F_ ompT hsdSB（rB_mB_）dcm gal（DE3）
特 點: 一種用于鋪制與培養(yǎng)質(zhì)粒平板和粘粒平板的重組缺陷的抑制型菌株,。其 φ80 lacZ△M15 基因的產(chǎn)物可與 pUC 載體編碼的 β-半乳糖苷酶氨基端實現(xiàn) β 互補，可用于藍白斑篩選,。
操作方法：（以下操作均按無菌條件的標準進行）
- 將感受態(tài)細胞置于冰上融化,，以下實驗以 100 μl 感受態(tài)細胞為例。
- 向感受態(tài)細胞懸液中加入需轉(zhuǎn)化的目的 DNA,，注意目的 DNA 的體積不要超過感受態(tài)細胞懸液體積的十分之一,，輕輕旋轉(zhuǎn)離心管以混勻內(nèi)容物，冰浴放置 30 分鐘,。
- 將離心管置于 42℃水浴中熱擊60-90秒,，然后快速轉(zhuǎn)移到冰浴中放置 2-3 分鐘，注意不要搖動離心管,。
- 向離心管中加入 900μl 無菌無抗的 SOC 或 LB 培養(yǎng)基,，37℃ 180 rpm 振蕩培養(yǎng) 30分鐘到1小時。目的是使質(zhì)粒上相關(guān)的抗性標記基因表達,，使菌體復蘇,。
- 取適量已轉(zhuǎn)化的感受態(tài)細胞涂布含相應(yīng)抗生素的 SOC 或 LB 平板，37℃倒置培養(yǎng) 12-16小時或6-8小時培養(yǎng),。涂布用量可根據(jù)具體實驗來調(diào)整,，如轉(zhuǎn)化的 DNA 總量較多，可取200μl 左右的轉(zhuǎn)化產(chǎn)物涂板,；反之,，如轉(zhuǎn)化的 DNA 總量較少，可4℃,，2500g離心5min后,，棄去上清約700μl，用剩余約200-300μl 的轉(zhuǎn)化產(chǎn)物涂板,。過多菌液可以抑制細菌生長,。
注意事項：
- 感受態(tài)細胞應(yīng)保存在-80℃，不可反復凍融,，否則其轉(zhuǎn)化效率將會降低。
- 實驗過程中應(yīng)嚴格無菌操作，防止其它 DNA 或雜菌的污染,，避免為以后的篩選,、鑒定帶來影響。
- 轉(zhuǎn)化時,，轉(zhuǎn)化效率與外源 DNA 的濃度在一定范圍內(nèi)成正比,，但當加入的外源 DNA 量過多或體積過大反而會降低轉(zhuǎn)化效率。轉(zhuǎn)化時 DNA 體積要小于感受態(tài)細胞體積的十分之一,。
- 轉(zhuǎn)化率的計算：轉(zhuǎn)化率＝產(chǎn)生菌落的總數(shù)/鋪板 DNA 總量,。
- 為防止轉(zhuǎn)化實驗不成功，可以保留部分連接產(chǎn)物,，以重新轉(zhuǎn)化,，將損失降到zui低。
感謝您對我們公司的支持與信任,！
使用我公司產(chǎn)品時,，如有任何實驗相關(guān)的問題，請致郵：cs_bioswamp,。我們會*時間協(xié)助解決,，謝謝！
采購中心
化工儀器網(wǎng)