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質粒轉染細胞實驗操作步驟2017/4/13
1.1轉化細胞細胞鋪板:將細胞按70%的匯合度接種到96孔板。1.2轉染:16h后轉染螢光素酶報告基因質粒和RNA,,每個樣品設置6個復孔(1)配制DNA和轉染試劑:96孔板轉染質粒時每孔比例為pLen...
小白鼠染色體的制備實驗方法和步驟2017/4/11
(一)轉化細胞秋水仙素處理取骨髓前3~4小時先給小白鼠經(jīng)腹腔注入0.1%的秋水仙素,,注射劑量為4毫克/每公斤動物體重,。(二)取骨髓經(jīng)秋水仙素處理的小白鼠,可用損傷脊髓法處死,,然后用剪刀剪開大腿上的皮膚...
細胞凋亡的變化分析2017/4/6
轉化細胞凋亡大多為生理性死亡,,是細胞衰老過程中各個細胞功能逐漸減退的結果,。凋亡可見于許多生理和病理過程中,如各種更替性組織衰亡更新,,也可見于照射及應用細胞抑制劑和數(shù)目性萎縮之時,。腫瘤細胞也發(fā)生凋亡。這...
ATCC細胞培養(yǎng)中使用血清的缺點2017/4/1
ATCC細胞培養(yǎng)中使用血清的缺點血清成分復雜,,雖含許多對細胞有利成分,,也含有對細胞有害的成分,使血清有幾個明顯的缺點:1.對大多數(shù)細胞,,在體內(nèi)狀態(tài),,血清不是它們接觸的生理學液體,只是在損傷愈合以及血液...
新生大鼠頸上交感神經(jīng)元分散細胞培養(yǎng)2017/3/30
干細胞交感神經(jīng)系統(tǒng)在維持機體的正常功能和對環(huán)境的適應性反應中起著十分重要的作用,。交感神經(jīng)細胞培養(yǎng)特別有助于神經(jīng)細胞發(fā)育和可塑性研究,,利用體外培養(yǎng)系統(tǒng)可進行交感神經(jīng)細胞的發(fā)生、死亡,、形態(tài)和生化發(fā)育,、遞質...
CO2培養(yǎng)箱如何消毒2017/3/28
干細胞CO2培養(yǎng)箱如果是隔水式培養(yǎng)箱可以采用甲酸熏蒸(甲醛與高錳酸鉀反應生成甲酸),然后再用75%酒精擦培養(yǎng)箱內(nèi)壁即可,,效果比較好,。如果是氣套式的培養(yǎng)箱用75%酒精直接擦培養(yǎng)箱內(nèi)壁即可,或采用隔水式熏...
冷凍細胞活化操作2017/3/23
1,、ATCC細胞冷凍細胞之活化原則為快速解凍,,以避免冰晶重新結晶而對細胞造成傷害,導致細胞之死亡,。2,、細胞活化后,約需數(shù)日,,或繼代一至二代,其細胞生長或特性表現(xiàn)才會恢復正常(例如產(chǎn)生單株抗體或是其它蛋...
冷凍ATCC細胞活化技術分析2017/3/21
冷凍ATCC細胞之活化原則為快速解凍,,以避免冰晶重新結晶而對細胞造成傷害,,導致細胞之死亡。細胞活化后,,約需數(shù)日,,或繼代一至二代,其細胞生長或特性表現(xiàn)才會恢復正常(例如產(chǎn)生單株抗體或是其它蛋白質),。材料...
骨髓瘤細胞懸液的制備方法分析2017/3/16
zui常用的干細胞系為SP2/0和NS-1,,均來自BALB/c小鼠骨髓瘤。一般在準備融合前的兩周就應開始復蘇骨髓瘤細胞,,為確保該細胞對HAT的敏感性,,每3~6個月應用8-氮雜鳥嘌呤篩選一次,,以防止細胞...
腫瘤細胞培養(yǎng)實驗操作分析2017/3/14
腫瘤細胞培養(yǎng)實驗原理:是將機體內(nèi)的某組織取出,分散成單細胞,,在人工條件下培養(yǎng)使其生存并不斷生長,、繁殖的方法。借助這種方法可以觀察細胞的分裂繁殖,、細胞的接觸抑制,、以及細胞的衰老,死亡等生命現(xiàn)象,。腫瘤細胞...
細胞消化的操作步驟2017/3/9
1.絕大部分干細胞消化的時候是只要用胰酶潤洗一遍即可,。吸去胰酶后,殘留的那些無法計算體積的附著在細胞表面的微量胰酶在37℃一般不到2min足夠消化細胞,。對于這些細胞原則上不要用胰酶孵育細胞,,連續(xù)這樣傳...
死活細胞測定及細胞活力測定實驗原理2017/3/7
(1)干細胞細胞膜通透性的差異:活細胞的細胞膜是一種選擇性膜,對細胞起保護和屏障作用,,只允許物質選擇性的通過;而細胞死亡之后,,細胞膜受損,通透性增加,。(2)死活細胞在代謝上的差異:由于活細胞中新陳代謝...
腫瘤細胞分離中需要注意的幾個問題2017/3/2
1.如果您要做腫瘤細胞培養(yǎng),,記住實驗中所用的試劑(分離液,洗滌液等),、器械等都要是無菌消毒的,,并注意實驗中的無菌操作。2.離心轉速單位及時間:目前國外的文獻報道基本上用g為單位,,注意g和轉速(rpm)...
細胞培養(yǎng)的各種器皿的物理消毒滅菌法2017/2/23
轉化細胞通過高潮,、射線、微波以及器械進行滅菌或除菌的方法均為物理滅菌方法,。(1)紫外線消毒用于消毒空氣,、操作臺面和一些不能用干熱、濕熱滅菌的培養(yǎng)器皿,,如塑料培養(yǎng)皿,、培養(yǎng)板等。這是常使用的消毒方法之一,。...
神經(jīng)細胞培養(yǎng)需要注意的操作方法2017/2/21
神經(jīng)細胞培養(yǎng)需要注意的操作方法神經(jīng)細胞(神經(jīng)元)不易培養(yǎng),,只有在適宜情況下,如接種在膠原底層上,,或加入神經(jīng)生長因子和膠質干細胞因子時,,可出現(xiàn)一定程度的分化,長出突起等現(xiàn)象,,但很難使之增值,。而神經(jīng)膠質細...

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