1,、ATCC細胞冷凍細胞之活化原則為快速解凍,，以避免冰晶重新結(jié)晶而對細胞造成傷害,，導致細胞之死亡,。

2,、細胞活化后，約需數(shù)日,，或繼代一至二代,，其細胞生長或特性表現(xiàn)才會恢復正常(例如產(chǎn)生單株抗體或是其它蛋白質(zhì))。

3,、材料

37℃恒溫水槽,、新鮮培養(yǎng)基,、無菌吸管/離心管/培養(yǎng)瓶、液氮或干冰容器

4,、ATCC細胞步驟：

(1)操作人員應(yīng)戴防護面罩及手套,，防止冷凍管可能爆裂之傷害。

(2)自液氮或干冰容器中取出冷凍管,，檢查蓋子是否旋緊,，由于熱脹冷縮過程，此時蓋子易松掉,。

(3)將新鮮培養(yǎng)基置于37℃水槽中回溫,，回溫后噴以70%酒精并擦拭之，移入無菌操作臺內(nèi),。

(4)取出冷凍管,，立即放入37℃水槽中快速解凍，輕搖冷凍管使其在1分鐘內(nèi)全部融化,，以70%酒精擦拭保存管外部,，移入無菌操作臺內(nèi)。

(5)取出解凍之細胞懸浮液,，緩緩加入有培養(yǎng)基之培養(yǎng)容器內(nèi)(稀釋比例為1:10～1:15),，混合均勻，放入CO2培養(yǎng)箱培養(yǎng),。取0.1ml解凍細胞懸浮液作存活測試,。

(6)解凍后是否立即去除冷凍保護劑(例如DMSO或glycerol)，依細胞種類而異,，一般而言,，大都不需要立即去除冷凍保護劑。惟若要立即去除,，則將解凍之細胞懸浮液加入含有5-10ml培養(yǎng)基之離心管內(nèi)，離心1000rpm,，5分鐘,，移去上清液，加入新鮮培養(yǎng)基,，混合均勻,，放入CO2培養(yǎng)箱培養(yǎng)。

(7)若不需立即去除冷凍保存劑,，ATCC細胞則在解凍培養(yǎng)后隔日更換培養(yǎng)基,。