冷凍ATCC細(xì)胞之活化原則為快速解凍,，以避免冰晶重新結(jié)晶而對細(xì)胞造成傷害,，導(dǎo)致細(xì)胞之死亡,。

細(xì)胞活化后,，約需數(shù)日,，或繼代一至二代,，其細(xì)胞生長或特性表現(xiàn)才會恢復(fù)正常(例如產(chǎn)生單株抗體或是其它蛋白質(zhì))。

材料

37℃ 恒溫水,，新鮮培養(yǎng)基,，無菌吸管/ 離心管/ 培養(yǎng)瓶，液氮或干冰容器

步驟：

操作人員應(yīng)戴防護面罩及手套,，防止冷凍管可能爆裂之傷害,。

自液氮或干冰容器中取出冷凍管，檢查蓋子是否旋緊,，由于熱脹冷縮過程,，此時蓋子易松掉。

將新鮮培養(yǎng)基置于37 °C 水槽中回溫,，回溫后噴以70 % 酒精并擦拭之,，移入無菌操作臺內(nèi)。

取出冷凍管,，立即放入37 °C 水槽中快速解凍,，輕搖冷凍管使其在1 分鐘內(nèi)全部融化，以70 % ethanol 擦拭保存管外部，移入無菌操作臺內(nèi),。

取出0.9 ml 解凍之ATCC細(xì)胞懸浮液,，緩緩加入有培養(yǎng)基之培養(yǎng)容器內(nèi)(稀釋比例1:10～1:15)，混合均勻,，放入CO2 培養(yǎng)箱培養(yǎng),。另取0.1 ml 解凍細(xì)胞懸浮液作存活測試。

解凍后是否立即去除冷凍保護劑(例如DMSO 或glycerol),，依細(xì)胞種類而異,，一般而言，大都不需要立即去除冷凍保護劑,。惟若要立即去除,，則將解凍之細(xì)胞懸浮液加入含有5-10 ml 培養(yǎng)基之離心管內(nèi)，離心1,000 rpm, 5 分鐘,，移去上清液,，加入新鮮培養(yǎng)基，混合均勻,，放入CO2 培養(yǎng)箱培養(yǎng),。

若不需立即去除ATCC細(xì)胞冷凍保存劑，則在解凍培養(yǎng)后隔日更換培養(yǎng)基,。