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本方案適用于果粒橙,、果凍,、火腿、酸奶,、棒棒糖,、黑巧克力和調(diào)制乳粉等樣品中胭脂蟲紅的測(cè)定。

本方法的定量限為：當(dāng)稱樣量為2g時(shí),，液體及半固體試樣（含乳半固體除外）中胭脂蟲紅（以胭脂紅酸計(jì)）定量限為0.02g/kg,，固體及含乳半固體試樣（調(diào)制乳粉除外）中胭脂蟲紅（以胭脂紅酸計(jì)）定量限為0.04g/kg，調(diào)制乳粉中胭脂蟲紅（以胭脂紅酸計(jì)）定量限為0.1g/kg,。

(1) 標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備液(1.0mg/mL)(Cat.#:48204)：準(zhǔn)確稱取10.0mg標(biāo)準(zhǔn)品，用水溶解,，并定容至10mL容量瓶中,，搖勻。

(2) 標(biāo)準(zhǔn)系列工作液：分別準(zhǔn)確吸取標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備液(1.0mg/mL):0.05mL,、0.1mL,、0.2mL、0.5mL,、1.0mL于10mL容量瓶中,，用0.1%磷酸水溶液定容至刻度,，搖勻，配制成質(zhì)量濃度分別為5.00mg/L,、10.0mg/L,、20.0mg/L、50.0mg/L和100mg/L標(biāo)準(zhǔn)系列工作液,。

3.1 液體及半固體試樣(含乳半固體除外)

稱取2g試樣于50mL離心管中，加入40mL鹽酸溶液(2.0mol/L),，搖勻,，置于沸水浴中加熱30min，取出冷卻至室溫后,，振蕩5min,，超聲5min，5000rpm離心5min,，上清液轉(zhuǎn)移至50mL容量瓶中,，用水定容至刻度，經(jīng)適量脫脂棉過濾,，待凈化,。

3.2 固體及含乳半固體試樣(調(diào)制乳粉除外)

稱取2g試樣于50mL離心管中，加入40mL鹽酸溶液(2.0mol/L),，搖勻,，置于沸水浴中加熱30min，取出冷卻至室溫后,，振蕩5min,，超聲5min，5000rpm離心5min,，上清液轉(zhuǎn)移至100mL容量瓶中,，殘?jiān)尤?0mL鹽酸溶液(2.0mol/L)，常溫條件下,，重復(fù)提取一次,，合并兩次提取液,，用水定容至刻度,，經(jīng)適量脫脂棉過濾，待凈化,。

3.3 調(diào)制乳粉

稱取2g試樣于50mL離心管中,，加入40mL鹽酸溶液(2.0mol/L)，搖勻,，置于沸水浴中加熱30min,，取出冷卻至室溫后,，振蕩5min，超聲5min,，5000rpm離心5min,，上清液轉(zhuǎn)移至250mL容量瓶中，殘?jiān)尤?0mL鹽酸溶液(2.0mol/L),，常溫條件下,，重復(fù)提取兩次，合并三次提取液,，用水定容至刻度,，經(jīng)適量脫脂棉過濾，待凈化,。

ProElut^® PXA 150mg/6mL（Cat.#:68304）

(1)活化：依次加入6mL甲醇、6mL水,，棄去流出液,；

(2)上樣：將25mL待凈化液加入柱中，棄去流出液,；

(3)淋洗：依次加入12mL水,、6mL甲醇，棄去流出液,，真空抽至柱體近干,；

(4)洗脫：加入6mL 2%磷酸甲醇溶液，收集洗脫液,；

(5)重新溶解：將洗脫液在40℃水浴下氮?dú)獯抵两?，?.1%磷酸水溶液定容至2mL，渦旋混勻,，8000rpm離心5min,，取清液上機(jī)分析。

色譜柱：Diamonsil^® Plus C18 150x4.6mm,5μm（Cat.#:99401）

流  速：1.2mL/min    

進(jìn)樣量：10μL

柱  溫：40℃

檢測(cè)器：PDA 494nm

流動(dòng)相：A:0.1%磷酸水溶液 B:0.1%磷酸乙腈溶液

梯度設(shè)置:

食品中胭脂蟲紅的HPLC檢測(cè)的添加回收結(jié)果。