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一,、使用儀器和試劑：

    高效液相色譜儀,；紫外分光光度計,；電子分析天平,；超純水機(jī),；組織搗碎機(jī)；

    漩渦混勻器,；超聲波清洗器,；高速冷凍離心機(jī)；固相萃取儀,；氮吹儀,。

試劑：三聚氰胺標(biāo)準(zhǔn)品；乙腈HPLC級,；庚烷磺酸鈉,；及色譜純或分析純。

二,、溶液配制

三聚氰胺標(biāo)準(zhǔn)溶液：稱取0.100g(精確至0.1mg)的三聚氰胺標(biāo)準(zhǔn)品,，用甲醇水溶液（1+1）超聲待溶解后冷卻定容于100ml棕色容量瓶中，該濃度為1.0mg/ml,，于4℃內(nèi)儲存,，有效期3個月。移取該標(biāo)準(zhǔn)儲備液用流動相逐級稀釋,，配制成一系列濃度的工作溶液。

離子對試劑溶液：準(zhǔn)確稱量2.02g庚烷磺酸鈉和2.10g檸檬酸,，加水定容至1000ml容量瓶中,，0.45μm水系濾膜抽濾后備用。

三,、材料

羅非魚,、對蝦。羅非魚去鱗,、去皮取背部和腹部肌肉,；對蝦去頭、去殼,、去附肢,，取肌肉部分。用高速搗碎機(jī)將樣品搗碎后置-18℃以下保存,。實(shí)驗(yàn)時將樣品自然解凍至室溫,。

四、樣品前處理方法

1.直接提取處理方法

稱取5g(精確至0.01g)樣品于50ml離心管內(nèi),，準(zhǔn)確加入10ml提取液,，渦旋混合均勻1min,，振蕩提取20min，靜止2min后,，于5000r/min的離心機(jī)上離心10min,，取上清液2ml轉(zhuǎn)移至2ml離心管中，于8000r/min的高速離心機(jī)離心8min,。取上清液過0.2μm濾膜上機(jī)測定,。

2.過固相萃取柱處理方法

稱取5g(精確至0.01g)樣品于50ml玻璃比色管內(nèi)，準(zhǔn)確加入提取液20ml混勻,，超聲20min,，冷卻至室溫，取上層提取液9000r/min離心10min,，取上清液5ml過預(yù)先經(jīng)3ml甲醇,、3ml水活化的HyperSep Retain-CX固相萃取小柱，再依次用3ml水和3ml甲醇洗滌,，棄去流出液,，至過柱速度不超過1.0ml/min。抽至近干后,，以5ml氯水-甲醇溶液（5%）洗脫,，收集流出液，于50℃下水浴氯氣流吹干,。向殘留物中準(zhǔn)確加入1.0ml甲醇水（2+8）溶液,，渦旋混合1min，過0.2μm有機(jī)濾膜,，上機(jī)測定,。

五、色譜條件

色譜柱：DIKMA C18(250mm×4.6mm,5μm),；

流動相：乙腈：離子對試劑溶液=8+92(體積比),；

流速為1.2ml/min；

檢測波長:236nm,；

柱溫：40℃,；

進(jìn)樣量：20μL；

流動相使用前過0.45μm濾膜,。

以上內(nèi)容摘自黃春麗等注的《水產(chǎn)品中三聚氰胺的快速檢測方法》,。

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